allgosts.ru11. ЗДРАВООХРАНЕНИЕ11.040. Медицинское оборудование

ГОСТ Р ИСО 19001-2021 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания биологических материалов

Обозначение:
ГОСТ Р ИСО 19001-2021
Наименование:
Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания биологических материалов
Статус:
Действует
Дата введения:
04.01.2022
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
11.040.55, 11.100.10

Текст ГОСТ Р ИСО 19001-2021 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания биологических материалов

>

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ


НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ


ГОСТР ИСО 19001— 2021


МЕДИЦИНСКИЕ ИЗДЕЛИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO

Информация, предоставляемая изготовителем с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания биологических материалов

(ISO 19001:2013, In vitro diagnostic medical devices — Information supplied by the manufacturer with in vitro diagnostic reagents for staining in biology, IDT)

Издание официальное

Москва Российский институт стандартизации 2021

Предисловие

  • 1 ПОДГОТОВЛЕН Ассоциацией специалистов и организаций лабораторной службы «Федерация лабораторной медицины» (Ассоциация «ФЛМ»), на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 4

  • 2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 380 «Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы ин витро»

  • 3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 21 октября 2021 г. № 1215-ст

  • 4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 19001:2013 «Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем вместе с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания в биологии» (ISO 19001:2013 «In vitro diagnostic medical devices — Information supplied by the manufacturer with in vitro diagnostic reagents for staining in biology», IDT).

Международный стандарт разработан Техническим комитетом ТК 212 «Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы in vitro» Международной организации по стандартизации (ИСО).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5—2012 (пункт 3.5).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

5 ВЗАМЕН ГОСТ Р ИСО 19001—2013

Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. Nt 162-ФЗ «О стандартизации в Российской Федерации». Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (но состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официальный текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в ин-формационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регупированию и метрологии в сети Интернет (www.rst.gov.ru)

©ISO. 2013

©Оформление. ФГБУ «РСТ». 2021

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

Содержание

  • 1 Область применения

  • 2 Нормативные ссылки

  • 3 Термины и определения

  • 4 Требования к информации, предоставляемой изготовителем

Приложение А (справочное) Примеры информации, предоставляемой изготовителем с реагентами, обычно применяемыми в методиках биологического окрашивания

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам

Библиография




л/


ГОСТ Р ИСО 19001—2021

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕДИЦИНСКИЕ ИЗДЕЛИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO

Информация, предоставляемая изготовителем с диагностическими реагентами in vitro, применяемыми для окрашивания биологических материалов

In vitro diagnostic medical devices. Information supplied by the manufacturer with in vitro diagnostic reagents for biological material staining

Дата введения — 2022—04—01

  • 1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает требования к информации, предоставляемой изготовителями с реагентами, применяемыми для окрашивания биологических материалов. Требования относятся к изготовителям, поставщикам и продавцам красителей, красок, хромогенных реагентов и других реактивов. применяемых для окрашивания в гистологии и цитологии, включая бактериологию, гематологию, гистохимию; используемых в медицинских лабораториях как для плановых задач, так и для исследовательских. Требования к информации, предоставляемой изготовителями, устанавливаемые настоящим стандартом, являются необходимым условием получения сравнимых и воспроизводимых результатов во всех сферах окрашивания биологических материалов.

  • 2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты [для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных — последнее издание (включая все изменения)]:

ISO 80000*1. Quantities and units — Part 1: General (Величины и единицы. Часть 1. Общие положения)

ISO 80000-9. Quantities and units — Part 9: Physical chemistry and molecular physics (Величины и единицы. Часть 9. Физическая химия и молекулярная физика)

IS018113*1. In vitro diagnostic medical devices — Information supplied by the manufacturer (labelling)— Part 1: Terms, definitions and general requirements [Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация. предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования]

IS018113-2. In vitro diagnostic medical devices — Information supplied by the manufacturer (labelling)— Part 2: In vitro diagnostic reagents for professional use (Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация. предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения]

  • 3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими им определениями: 3.1 антитело (antibody): Специфический иммуноглобулин, образованный 8-лимфоцитами в ответ на воздействие иммуногенным веществом и способный связываться с ним.

Издание официальное

Примечание 1 — Молекула иммуногенного вещества содержит одну иг» несколько частей с характерным химическим составом. эпитоп.

  • 3.2 блокирующий реагент (blocking reagent): Реагент (реактив), используемый для уменьшения фона, присущего образцу перед окрашиванием.

  • 3.3 хромогенный реагент (chromogenic reagent): Реагент (реактив), взаимодействующий с химическими группами, присутствующими или вызванными в клетках и тканях, с образованием окрашенного соединения in situ.

Пример — Типичные хромогенные реактивы:

  • а) соль диазония:

  • Ь) реактив Шиффа.

  • 3.4 красящее вещество (dye): Окрашенное органическое соединение, которое, будучи растворенным в подходящем растворителе, способно придать цвет материалу.

  • 3.5 флюорохром (fluorochrome): Реагент, испускающий видимый свет при облучении возбуждающим светом более короткой длины волны.

Примечание 1 — Любой из различных флуоресцентных веществ, используемых в биологических окрашиваниях для получения флуоресценции в образце.

  • 3.6 реагент для диагностики in vitro (in vitro diagnostic reagent): Химические, биологические или иммунологические компоненты, растворы или препараты, предназначенные изготовителем для применения в качестве медицинского изделия для диагностики in vitro.

(ИСО 18113-1]

  • 3.7 информация, предоставляемая изготовителем (маркировка) (information supplied by the manufacturer, labelling): Письменное, напечатанное или графическое изображение:

  • - закрепленное на медицинском изделии или на его упаковке или обертке или

  • - предоставленное для применения с медицинским изделием:

  • - связанное с идентификацией, техническим описанием и применением медицинского изделия для диагностики in vitro, но не включающее в себя транспортные документы.

Пример — Этикетки, инструкции по применению.

Примечание 1 — Каталоги не являются маркировкой медицинских изделий.

(ИСО 18113-1]

  • 3.8 этикетка (label): Печатная, рукописная или графическая информация, помещенная на медицинском изделии для диагностики in vitro или на его упаковке.

Примечание 1 — Этикетка, постоянно закрепленная на медицинском изделии, рассматривается как маркировка.

(ИСО 18113-1]

  • 3.9 лектин (lectin): Белок неиммуногенного происхождения с двумя или несколькими связывающими участками, который распознает и связывается со специфическими остатками сахаридов.

  • 3.10 моноклональное антитело (monoclonal antibody): Антитело, способное специфически взаимодействовать с одиночным эпитопом определенного иммуногенного вещества.

  • 3.11 поликлональные антитела (polyclonal antibody): Смесь антител, способных специфически взаимодействовать с определенным иммуногенным веществом.

  • 3.12 окрашивание (staining): Придание цвета материалу с помощью реакции с красителем или хромогенным реагентом.

  • 3.13 краситель, краска (stain): Раствор одного или нескольких красящих веществ в определенных концентрациях в определенном растворителе, используемый для окрашивания.

Примечание 1 — Краска может быть приготовлена прямым растворением красящего вещества в растворителе или разведением готового основного раствора подходящими агентами.

  • 3.14 основной раствор красителя (stock solution of stain): Стабильный определенный раствор одного или нескольких красящих веществ в более высокой концентрации, чем используемая при окраске.

Примечание — Стабильность означает постоянство свойств красящего вещества даже в присутствии других красящих веществ.

  • 3.15 зонд нуклеиновой кислоты (nucleic acid probe): Одно* или двухцепочечный олигонуклеотид или полинуклеотид определенной длины, комплементарный специфическим последовательностям нуклеотидов в нуклеиновых кислотах.

  • 4 Требования к информации, предоставляемой изготовителем

    • 4.1 Общие требования

      • 4.1.1 Взаимодействие с поставщиком

Когда изготовитель использует материалы от поставщика, то он обязан удостовериться в том. что поставщик соответствует требованиям систем обеспечения качества, описанным в ИСО 9001 и ИСО 13485.

  • 4.1.2 Предупреждения и меры предосторожности

Изготовитель реагентов (реактивов), используемых для окрашивания биологических материалов, должен предоставить информацию относительно предупреждений и мер предосторожности в соответствии сИСО 18113-1 и ИСО 18113-2.

  • 4.1.3 Форма информации, предоставляемой изготовителем

Форма информации, предоставляемой изготовителем вместе с реагентами, используемыми для окрашивания биологических материалов, должна соответствовать ИСО 80000*1 и ИСО 80000-9. Кроме того, в соответствующих случаях должны соблюдаться требования, указанные в 4.1.4—4.1.6 в отношении различных реагентов, используемых для окрашивания биологических материалов.

  • 4.1.4 Информация, предоставляемая изготовителем с реагентами, используемыми для окрашивания биологических материалов

Информация, предоставляемая изготовителем с реагентами, используемыми для окрашивания биологических материалов, должна соответствовать ИСО 80000-1. ИСО 80000-9. ИСО 18113-1 и ИСО 18113-2. Должна быть приведена информация о мерах предупреждения и предосторожности. Кроме того, если это применимо, требования, установленные в 4.1.2—4.1.4. должны быть применены к различным реагентам, используемым для окрашивания биологических материалов.

  • 4.1.5 Наименование реагента

Наименование реагента должно включать в себя регистрационный номер в CAS и номер индекса красителя, если это применимо.

Примечание 1 — Регистрациожыв номера в CAS являются регистрационными номерами в Химической справочной службе (CAS). Они представляют собой уникальные числовые кодовые номера веществ, получивших индекс, присвоенный химическим веществам в Химической справочной службе.

Примечание 2 — Индекс красителя состоит из 5-значюго номера, номера C.I. и специально составленного наименования большинства красящих веществ.

  • 4.1.6 Описание реагента

Описание реагента должно включать в себя соответствующие физико-химические данные, сопровождаемые сведениями, относящимися к каждой партии. Данные должны содержать, по крайней мере, следующую информацию:

  • а) молекулярную формулу, включая противоион;

  • Ь) молярную массу (г/моль) точно обозначенную, с включением противоиона или без него;

  • с) допускаемые пределы интерферирующих веществ;

  • d) обслуживание и хранение.

Для окрашенных органических соединений данные должны содержать:

  • е) молярную абсорбцию (вместо этого может быть приведено содержание молекулы чистого красящего вещества, но не содержание общего красящего вещества);

  • f) длину волны или число волн при максимальной абсорбции;

д) данные тонкослойной хроматографии, высокопроизводительной жидкостной хроматографии или высокопроизводительной тонкослойной хроматографии.

  • 4.1.7 Предназначенное применение

В руководстве к изделию должно быть приведено предназначенное применение и описание по окрашиванию биологических материалов и количественные и качественные методики (если это применимо). Информация должна включать следующие сведения:

  • а) тип(ы) биологического материала и требования по обращению и обработке перед окрашиванием.

Примечание 1 — Информацию о типе биологического материала и его обращении и обработке можно найти в справочнике [15].

Пример:

  • • возможно ли использовать образцы клеток или тканей или и то и другое:

  • • возможно ли использовать замороженный или комически фиксированный материал или и то и другое:

  • • процедура обработки тканей:

  • • какие фиксирующие материалы могут быть применены.

Примечание 2 — В ссылке [15] приведены процедуры использования во время испытания красящего вещества, красителя, хромогенного реагента, флюорохрома, антитела и зонда нуклеиновой кислоты, используемых для окрашивания биологических материалов;

  • Ь) детали соответствующей методики реакции, использованной изготовителем для исследования реактивности красящего вещества, краски, хромогенного реактива, флюорохрома, антитела, зонда нуклеиновой кислоты или лектина, применяемых для окрашивания в биологических материалах;

  • с) ожидаемый(е) результаты) с учетом иследуемого(ых) тила(ов) биологического материала в соответствии с методикой, указанной изготовителем;

Примеры — См. А.2 и А.З.

  • d) данные о положительном или отрицательном контроле ткани и об интерпретации результата(ов);

  • е) ссылки на опубликованные результаты, полученные при использовании реагента для диагностики in vitro по методике, предлагаемой изготовителем.

  • 4.2 Дополнительные требования к реагентам специфических видов

  • 4.2.1 Флюорохромы

Независимо от типа применения, флюорохромы. предлагаемые для окрашивания, должны сопровождаться следующей информацией:

  • а) избирательность, например, описание мишени(ей), которая(ые) можвт(могут) быть лроде-монстрирована(ы) с использованием специфических условий;

  • Ь) длины волн света возбуждения и испускания;

  • с) для флюорохромое. конъюгированных с антителами, отношение количества флюорохрома к белку (соотношение количества вещества F/P) является существенным для количественных определений. Соотношение F/P вычисляют путем раздельного определения концентрации белка и флуорохрома — на основе измерений поглощения, и выражают в виде соотношения этих концентраций.

  • 4.2.2 Соли металлов

Если предлагаются к исследованию металлсодержащие соединения по методике проведения специфической реакции с металлом при окрашивании биологических материалов, должна быть приведена следующая дополнительная информация:

  • а) системное наименование;

  • Ь) чистота (отсутствие примесей).

  • 4.2.3 Антитела

Антитела, предлагаемые для окрашивания биологического материала (образцов), должны сопровождаться следующей информацией, если иное не оговорено национальными нормативными документами:

  • а) описание антигена (иммуногенного вещества), против которого направлено антитело и. если антиген определен кластером системы дифференциации. — номер CD. Описание должно содержать, если это приемлемо, тип обнаруживаемой макромолекулы, часть которой должна быть обнаружена, клеточная локализация и клетки или ткани, в которых она находится, и любая перекрестная реактивность с другими эпитопами.

  • b) для моноклональных антител — клон, метод образования (супернатант культуры ткани или асцитическая жидкость), подкласс иммуноглобулина и идентичность легкой цепи.

Примечание — В ссылке [в] содержится обновленная информация о современных иммуногистохимических процедурах;

  • с) для поликлональных антител — животное-хозяин, и используется ли цельная сыворотка или фракция иммуноглобулина;

  • d) описание формы (раствор или лиофилизированный порошок), количество общего белка и специфическое антитело, а для раствора — природа и концентрация растворителя или среды;

  • е) описание любых молекулярных связующих веществ или наполнителей, добавленных к антителу;

0 заявление о чистоте, технике очищения и методах обнаружения примесей.

Пример — Вестерн-блоттинг, иммуногистохимия;

д) соответствующие ссылки на публикации, посвященные применению антитела.

Примечание — Примеры процедур, которые могут использоваться изготовителем или конечным пользователем. приведены в руководстве CLSII/LA28 [8].

  • 4.2.4 Зонды нуклеиновой кислоты

Зонды нуклеиновой кислоты, предлагаемые для окрашивания биологических материалов, должны сопровождаться следующей информацией, если иное не оговорено национальными нормативными документами:

  • а ) одно- или двухслиральная последовательность оснований в зонде:

  • Ь ) молярная масса зонда или число оснований и. если приемлемо, число фракций (в процентах) пар оснований гуанин-цитозин;

  • с ) использованный маркер (радиоактивный изотоп или нерадиоактивная молекула), точка прикрепления к зонду (3* и/или 5') и доля вещества в процентах меченого зонда;

  • d ) обнаруживаемая генная мишень (последовательность ДНК или РНК);

  • е ) описание формы (лиофилизированный порошок или раствор) и количество <пг или пмоль) или концентрация [nr/см3 (лг/мл) или пмоль/см3 (лмоль/мл)]. если применимо, и. в случае раствора, природа и концентрация растворителя или среды:

  • 0 заявление о чистоте, методиках очистки и методах обнаружения примесей.

Пример — Высокопроизводительная жидкостная хроматография;

  • д ) соответствующие ссылки на публикации, касающиеся источников описания последовательности ДНК (18]. [22].

  • h ) наличие любых известных патентов и информации по применению эондое нуклеиновой кислоты.

Приложение А (справочное)

Примеры информации, предоставляемой изготовителем с реагентами, обычно применяемыми в методиках биологического окрашивания

А.1 Общие положения

Следующая информация представляет собой примеры процедур окрашивания и ее не следует рассматривать как единственный способ проведения описанных процедур. Эти процедуры могут быть использованы изготовителем для исследования реактивности красящих веществ и иллюстрируют то. каким образом изготовитель может представить информацию, соответствующую настоящему стандарту.

А.2 Краситель метиловый зеленый — пиронин Y. Пример 1

Информация, предоставленная производителем вместе с красящими веществами, используемыми в данной процедуре для окрашивания (метиловый зелень» или этиловый зеленый и пиронин Y). переделенными ниже.

А.2.1 Красящее вещество метиловый зеленый

А.2.1.1 Метиловый зеленый краситель

ВНИМАНИЕ — R 36/37/38: Вызывает раздражение глаз, дыхательных путей и кожи: S 26: В случае контакта с глазами немедленно промыть: S 36: Соответствующая защитная одежда и перчатки.

А.2.1.1.1 Описание продукта (наименование):

  • - метиловый зеленый (синонимы: двойной зеленый SF. легкий зеленый):

  • - регистрационный номер CAS: 22383-16-0:

  • • наименование и номер индекса красителя: основной голубой 20.42585.

А.2.1.1.2 Состав продукта:

молекулярная формула, включающая противоион: 2 BF4':

молярная масса с противоионом (или без него): 561.17 г/моль (387,56 г/моль);

массовая доля (содержание) метилового зеленого катиона: 85 %, определена с помощью метода абсорбционной спектрометрии: допустимые пределы интерферирующих веществ, приведенные как массовые доли:

  • • вода: менее 1 %:

  • • неорганические соли: менее 0,1 %;

  • • детергенты: не присутствуют;

  • • окрашенные примеси, включая кристаллический фиолетовьм: не обнаруживаются с помощью тонкослойной хроматографии:

  • • индифферентные соединения: 14 % растворимого крахмала.

А.2.1.1.3 Обращение и хранение

Стабилен при хранении в тщательно закупоренной коричневой бутылке при комнатной температуре (от 18*Сдо28 ’С).

Длина волны максимальной абсорбции раствора красящего вещества: 633 нм.

Тонкослойная хроматография: присутствует только один основной компонент, соответствующий метиловому зеленому.

А.2.1.2 Красящее вещество этиловый зеленый

ВНИМАНИЕ — R 36/37/38: Вызывает раздражение глаз, дыхательных путей и кожи: S 26: В случае контакта с глазами немедленно промыть; S 36: Соответствующая защитная одежда и перчатки.

А.2.1.2.1 Описание продукта (наименование):

  • • этиловый зеленый (синоним: метиловый зеленый);

  • • регистрационный номер CAS: 7114-03-6;

  • • наименование и номер индекса красителя: наименование в индексе красителя отсутствует. 42590.

А.2.1.2.2 Состав:

молекулярная формула, включающая противоион: 2 BF4’.

молярная масса с противоионом (или без него): 575,19 г/моль (401,58 г/моль);

массовая доля этилового зеленого катиона: 85 %, определена с помощью абсорбционной спектрометрии: допустимые пределы интерферирующих веществ, приведенные как массовые доли:

  • • вода: менее 1 %:

  • - неорганические соли: менее 0.1 %:

  • • детергенты: отсутствуют:

  • • окрашенные примеси, включая кристаллический фиолетовый: не обнаруживают с помощью тонкослойной хроматографии:

  • • индифферентные соединения: 14 % растворимого крахмала.

А.2.1.2.3 Обращение и хранение

Стабилен при хранении в тщательно закрытой бутылке из коричневого стекла при комнатной температуре от 18*С до 28‘С.

Длина волны максимальной абсорбции раствора красящего вещества: 633 нм.

Тонкослойная хроматография: присутствует только один основной компонент, совпадающий с этиловым зеленым.

А.2.1.3 Красящее вещество пиронин Y.

ВНИМАНИЕ — R20/21/22: Вреден при вдыхании, попадании на хожу и проглатывании.

А.2.1.3.1 Описание продукта (название):

  • • пиронин Y (синонимы: ругогеле Y, пиронин G. pyronine G);

  • • регистрационный номер CAS: 92-32-0;

  • • наименование и номер индекса красителя: наименование в индексе красителя отсутствует. 45005.

А.2.1.3.2 Состав продукта;

молекулярная формула, включающая противоион; Ct7H1gN2O*Cr:

молярная масса с противоионом (или без него): 302.75 г/моль (267,30 г/моль):

массовая доля пиронина Y катиона: 80 %, определена с помощью абсорбционной спектрометрии: допустимые пределы интерферирующих веществ, приведенные как массовые доли:

  • • вода: менее 1 %;

  • • неорганические соли: менее 0.1 %;

  • • детергенты: отсутствуют;

  • • окрашенные примеси, включая кристаллический фиолетовый; не обнаруживают с помощью тонкослойной хроматографии;

  • • индифферентные соединения: 19 % растворимого крахмала.

А.2.1.3.3 Обращение и хранение.

Стабилен при хранении в тщательно закрытой бутылке из коричневого стекла при комнатной температуре от 18 *С до 28’С.

Длина волны максимальной абсорбции раствора красящего вещества: 550 нм.

Тонкослойная хроматография; присутствует только один основной компонент, совпадающий с пиронином Y.

А.2.2 Предназначенное применение метода окрашивания метиловым зеленым — пиронином Y

Эта процедура используется для демонстрации ДНК (нуклеинов) и РНК (рибосом) в клеточном материале. Это особенно подходит для демонстрации плазменных клеток.

А.2.3 Тип(ы) материала

Краситель метиловый зеленъм — пиронин Y применяется для окрашивания свежезамороженных, парафинированных или пластиковых срезов тканей различных видов.

А.2.4 Обращение и обработка перед окрашиванием

А.2.4.1 Возможные фиксирующие средства включают в себя:

жидкость Карноя {этанол (объемная доля 99 %) + хлороформ + уксусная кислота (массовая доля 99 %), смешанные в объемах (60 + 30+10) см3 (мл)]; или

формальдегид (массовая доля 3.6 %), забуференный фосфатом (pH = 7.0): высушивание, очистка, пропитывание и покрытие парафином, приготовление срезов с помощью микротома.

А.2.5 Рабочий раствор

А.2.5.1 Приготовление рабочего раствора [15]. [16]

  • а) Готовят раствор этилового зеленого или метилового зеленого из котчества. соответствующего массе 0,15 г чистого красящего вещества, рассчитанного как окрашенный катион (в приведенных выше примерах 0.176 г в каждом случае) в 90 см3 (мл) горячей (температура 50 *С) дистиллированной воды [6]. [10]. [14].

  • Ь) Растворяют количество вещества соответствующее, содержанию по массе 0,03 г пиронина Y. рассчитанного как окрашенный катион (в примере, приведенном выше. 0.038 г) в 10 см3 (мл) фталатного буфера (pH = 4,0) концентрацией 0.1 моль/дм3 (моль/л) [9]. [13].

  • с) Смешивают полученный раствор с раствором этилового зеленого или метилового зеленого.

  • d) Рабочий раствор стабилен по крайней мере одну неделю при хранении в плотно закрытой бутылке из коричневого стекла при комнатной температуре от 18 *С до 28 *С.

А.2.5.2 Методика окрашивания [12]. [16]

  • а) Депарафинируют срезы.

  • Ь) Срезы смачивают.

  • с) Окрашивают срезы в течение 5 мин при комнатной температуре примерно 22 ’С в рабочем растворе.

  • d) Промывают срезы в двух сменах дистиллированной воды, от 2 до 3 с в каждой.

  • е) Стряхивают излишки воды.

  • f) Активируют в трех сменах 1-бутанола.

  • д) Переносят непосредственно из 1-бутанола в гидрофобную синтетическую смолу.

А.2.6 Ожидаемый(е) результат(ы)

Ожидается получение следующих результатов с типами материалов, перечисленными в А.2.4.1:

  • • для едерного хроматина: зеленьм (фиксатор Карнов) или голубой (фиксатор формальдегид):

  • • для нуклеол и цитоплазмы, богатой рибосомами: красный (фиксатор Карнов) или лиловато-красмый (фиксатор формальдегид);

  • • для матрицы хрящей и гранул гучшх клеток: оранжевый:

  • • для мышц, коллагена и эритроцитов: не окрашены.

А.З Реакция Фельгена-Шиффа. Пример 2

Информация, предоставленная производителем с красителем, используемым для получения хромогенного реагента (парарозанилин — реактив Шиффа), применяемого в процедуре окрашивания.

А.3.1 Краситель, использованный в реакции Фельгена-Шиффа

А.3.1.1 Красящее вещество парарозанилин

ВНИМАНИЕ — Для R 40: Возможный риск необратимых эффектов; для R 22: Не вдыхать пыль; для S 36/37: Соответствующая защитная одежда и перчатки.

АЗЛ.1.1 Описание продукта (наименование):

  • • парарозанилин (синонимы: основной рубиновый, парэфуксин. парамагвнта. магента 0):

  • • регистрационный номер CAS: 569-61-9:

  • • наименование и номер индекса красителя: основной красный 9.42500.

А.3.1.1.2 Состав:

молекулярная формула, включающая противоион: С19ННз‘СГ;

молярная масса с противоионом (или без него): 323.73 г/моль (288.28 г/моль);

массовая фракция парарозанилина катиона: 85 %, определена с помощью абсорбционной спектрометрии;

допустимые пределы интерферирующих веществ, приведенные как массовые доли:

  • • веда: менее 1 %;

  • • неорганические соли: менее 0.1 %;

  • • детергенты: не присутствуют;

  • • окрашенные примеси: метилированные гомологи парарозанилина могут присутствовать в следовых количествах. определяемые с помощью тонкослойной хроматографии, но акридин отсутствует;

  • • индифферентные соединения: 14 % растворимого крахмала.

А.3.1.1.3 Обращение и хранение.

Стабилен при хранении в тщательно закупоренной коричневой бутылке при комнатной температуре от 18 'С до 28 'С.

Длина волны максимальной абсорбции раствора красящего вещества: 542 нм.

Тонкослойная хроматография: присутствует один основной компонент, соответствующий парарозанилину; возможны метилированные гомологи парарозанилина в следовых количествах.

А.3.2 Предназначенное применение реакции Фельгена-Шиффа

Эта процедура используется для демонстрации ДНК в клеточном материале.

А.3.3 Тип(ы) материала

Реакцию Фельгена-Шиффа применяют для парафинированных или пластиковых срезов различных видов тканей или цитологического материала (мазок, отпечаток ткани, культура клеток, монослой).

А.3.4 Обращение и обработка перед окрашиванием

Возможные фиксирующие вещества включают в себя:

  • - гистологию: формальдегид (массовая доля З.б %), эабуференный фосфатом (pH = 7.0);

  • • цитологию:

  • • жидкий фиксирующий материал: этанол (объемная доля 96 %);

  • • высушенный на воздухе материал;

  • - формальдегид (массовая доля 3.6 %), эабуференный фосфатом;

  • - метанол + формальдегид (массовая доля 37 %) + уксусная кислота (массовая доля 100 %), смешанные в объемах (85 +10*5) см3 (мл). Материал, фиксированный в фиксаторе Буйна, непригоден для этой реакции.

А.З.5 Процедура окрашивания

А.3.5.1 Процедура окрашивания парарозанилином — реактивом Шиффа (11]

  • а) Растворяют 0.5 г парарозанилин хлорида в 15 см3 (мл) соляной кислоты концентрацией 1 моль/дм3 (могъ/л).

  • Ь) Добавляют 85 см3 (мл) водного раствора KjSjOg (массовая доля 0.5 %).

  • с) Ожидают 24 ч.

  • d) Взбалтывают 100 см3 (мл) этого раствора с 0.3 г древесного угля в течение 2 мин и фильтруют.

  • е) Хранят бесцветную жидкость при температуре не ниже 5 *С. Раствор стабилен в течение по крайней мере 12 мес в плотно закрытой посуде.

А.3.5.1.1 Раствор для промывания

  • а) Растворяют 0.5 г KjSjOj в 85 см3 (мл) дистиллированной воды.

  • Ь) Добавляют 15 см3 (мл) соляной кислоты концентрацией 1 моль/дм3 (моль/л). Раствор готов к немедленному применению и может быть использован в течение 12 ч.

А.3.5.2 Методика окрашивания [19]. [20]

  • а) Депарафинируют парафинированные срезы в ксилене в течение 5 мин. затем промывают в течение 2 мин. сначала в этаноле с объемной долей 99 %, а затем в этаноле с объемной долей 50 %.

  • Ь) Смачивают пластиковые срезы, депарафинируют парафинированные срезы и цитологический материал в дистиллированной воде в течение 2 мин.

  • с) Гидролизируют материал в 5 моль/дм3 (моль/л) соляной кислоты при температуре 22 °C в течение от 30 до 60 мин {точное время гидролиза зависит от типа материала).

  • d) Промывают дистиллированной водой в течение 2 мин.

  • е) Окрашивают реагентом парарозанилин в течение 1 ч.

О Промывают в трех последовагегъных сменах промывного раствора, по 5 мин в каждой.

  • д) Дважды промывают дистиллированной водой, по 5 мин каждый раз.

  • h) Дегидратируют в этаноле с объемной долей 50 %, затем с 70 % и наконец в 99 %-ном этаноле, по 3 мин каждый раз.

  • i) Дважды промывают в хсилене. по 5 мин каждый раз.

  • j) Извлекают в синтетическую гидрофобную смолу.

А.3.6 Ожидаемые результаты

Ожидается получение следующих результатов в реакции Фелыена-Шиффа [19]. [20]:

• для ядер клеток (ДНК): красный цвет.

Приложение ДА (справочное)

Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам

Таблица ДА.1

Обозначение ссылочного международного сгандарта

Степень соответствия

Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта

ISO 80000-1

ISO 80000-9

«

ISO 18113-1

ют

ГОСТ Р ИСО 18113-1—2015 «Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования»

ISO 18113-2

ют

ГОСТ Р ИСО 18113-2—2015 «Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения»

  • * Соответствующий национальный стандарт отсутствует. До его принятия рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта.

Примечание — В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов:

  • • ЮТ — идентичные стандарты.

Библиография

  • [1] Regulabon(EC) No1272/2008of the European Parliament and of the Council of 16 December 2008 on classification,

labelling and packaging of substances and mixtures (CLP Regulation), amending and repealing Directives 67/548/ EEC and 1999/45/EC. and amending Regulation (EC) No 1907/2006. Official journal of the European Union L353 of 31.12.2008. pp. 1—1355

  • [2] DiDirective 2008/112/EC of the European Parliament and of the Council of 16 December 2008 amending Council Directives 76/768/EEC. 88/378/EEC, 1999/13/EC and Directives 2000/53/EC. 2002/96/EC and 2004/42/ EC of the European Parliament and of the Council in order to adapt them to Regulation (EC) No1272/2008 on classification, labelling and packaging of substances and mixtures hhttp://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ. do?uri=CELEX:32008L0112:en:NOT

  • (3) Regulation (EC) No1336/2008 of the European Parliament and of the Council of 16 December 2008 amending Regulation (EC) No 648/2004 in order to adapt it to Regulation (EC) No 1272/2008 on classification, labelling and packaging of substances and mixtures httpy/eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uris OJ:L2008:354:0060:0061:en:PDF

  • (4) Commission Regulation (EC) No 790/2009 of 10 August 2009 amending, for the purposes of its adaptation to technical and scientific progress. Regulation (EC) No 1272/2008 of the European Parliament and of the Council on classification, labelling and packaging of substances and mixtures. http://eur-lex.europa.eu/LexUriS6rv/LexUriServ. do?uri=OJ:L:2008:354:0060;0061.en:PDF. pp. 1^139

  • [5] United Nations Economic and Social Counci's Sub-Committee of Experts on the Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (UNSCEGHS) Globatty harmonized system of classification and labelling of chemicals (GHS). Third. United Nations. revised edition. 2009 http:// kve.unece.org/fileadmn/DAM/trans/danger/ publi/ghs/ghs_rev03/E ngltshfOOe_intro.pdf

  • (6] Andersen A.P.. Jakobsen R. Lyon H.. Hoyer RE. Purification of methyl green using polyamide. Histochem. J. 1986.

18(8) pp. 461—462

  • [7] Chemical Abstracts Service (CAS) CAS Registry. www.cas.org/content/chemicaLsubstances

  • (8] CLSI Quality assurance for design control and implementation of immunohistochemistry assays: Approved Guideline. 2nd ed. CLSI document I/LA28-A2. Wayne. PA 19087 USA. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2011

  • (9] European Committee for Clinical Laboratory Standards (ECCLS). Subcommittee on Reference Materials for Tissue

Stains (SRMTS) Dye standards. Pah 11.1: Pyronin Y (Cl 45005). Histochem. J. 1992. 24 (4) pp. 220—223

  • [10] European Committee for Clinical Laboratory Standards (ECCLS). Subcommittee on Reference Materials for Tissue Stains (SRMTS) Dye standards. Part II.2: Methyl green (Cl 42585) and ethyl green (Cl 42590). Histochem. J. 1992. 24 (4) pp. 224—227

  • [11] European Committee for Clinical Laboratory Standards (ECCLS). Subcommittee on Reference Materials for Tissue Stains (SRMTS) Dye standards. Part 11.5: Pararosaniline (Cl 42500). Histochem. J. 1992. 24 (4) pp. 233—235

  • [12] Heyer P.E.. Lyon H.. Jakobsen P.. Andersen A.P. Standardized methyl green-pyronm Y procedures using pure dyes. Histochem. J. 1986. 18 (2—3) pp. 90—94

  • [13] JakobsenP., Lyon H.,TreppendahfS. Spectrophotometriccharacteristicsandassay of pure pyronin Y. Histochemistry. 1984.81 pp. 99—101

  • [14] Jakobsen P.. Andersen A.P.. Lyon H. Preparation and characterization of methyl green tetrafluoroborate. Histochemistry. 1984. 81 pp. 177—179

  • [15] Kiernan JA Histological and histochemical methods: Theory and practice. 4th ed.. Scion Publishing Ltd. Banbury. Oxfordshire. UK. 2008

  • [16] Lyon H.. De Leenheer A.P., Horobin R.W.. Lambert W.E.. Schulte E.K.. Van Liedekerke B. et al. Standardization of reagents and methods used in cytological and histological practice with emphasis on dyes, stains and chromogenic reagents. Histochem. J. 1994. 26 (7) pp. 533—544

  • [17] Lyon H.. & Prente P. Methyl green-pyronm Y staining of nucleic acids: studies on the effects of staining time, dye composition and diffusion rates. Biotech. Histochem. 2003. 78 (1) pp. 27—33

  • [18] Petterson E.. Lundeberg J.. Ahmadin N. Generations of sequencing technologies. Genomics. 2009.93 pp. 105—111

  • [19] Schulte Е.К.. & Wittekind D.H. Standardization of the Feulgen reaction: the in fluence of chromatin condensation on the kinetics of acid hydrolysis. Anal. Celt. Pathol. 1990, 2 (3) pp. 149—157

  • [20] Schulte E.K. Standardization of the Feulgen reaction for absorption DNA image cytometry: a review. Anal. CeU. Pathol. 1991. 3 (3) pp. 167—182

  • [21] Schulte E.K.. Lyon H.. Heyer P.E. Simultaneous quantification of DNA and RNA in tissue sections. A comparative analysis of the methyl green-pyronin technique with the gailocyanin chromalum and Feulgen procedures using image cytometry. Histochem. J. 1992,24 (6) pp. 167—182

  • [22] Sengupta D., & Cookson B. A general approach for improving cycle sequencing that facilitates a robust one-step combined amplification and sequencing method. J.Mol.Diagn. 2010, 12 pp. 272—277

  • [23] Society of Dyers and Colourists and the American Association of Textile Chemists and Colorists, Colour index International. 4th edition online http J/www.colour-index.org/ 2011

    УДК 616-71:006.354


OKC 11.040.55

11.100.10

Ключевые слова: медицинские изделия для диагностики in vitro, диагностические реагенты in vitro для окрашивания, красящие вещества, красители, хромогенные реактивы, лектины, флюорохромы, зонды нуклеиновых кислот, антитела

Редактор П.В. Каретникова Технический редактор И.Е. Черепкова Корректор Р.А. Ментова Комгъютерная верстка М.В. Лебедевой

Сдано е набор 26.10.202! Подписано в печать 09.>1.2021. Формат 60’844. Гарнитура Ариал. Усп. печ. л. 1.М. Уч.-изд. л. 1.66.

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

Создано в единичном исполнении в ФГБУ кРСТ» . 117416 Москва. Нахимовский пр-т, д. 3t. к. 2.

www.90slinfo.ru inio@gostnfo.ru