allgosts.ru11. ЗДРАВООХРАНЕНИЕ11.040. Медицинское оборудование

ГОСТ 31209-2003 Контейнеры для крови и ее компонентов. Требования химической и биологической безопасности и методы испытаний

Обозначение:
ГОСТ 31209-2003
Наименование:
Контейнеры для крови и ее компонентов. Требования химической и биологической безопасности и методы испытаний
Статус:
Действует
Дата введения:
01/01/2015
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
11.040.20

Текст ГОСТ 31209-2003 Контейнеры для крови и ее компонентов. Требования химической и биологической безопасности и методы испытаний



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION. METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

ГОСТ

31209—

2003

КОНТЕЙНЕРЫ ДЛЯ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

Требования химической и биологической безопасности и методы испытаний

Издание официальное

ГОСТ 31209—2003

Предисловие

Цели, основные принципы и порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0—92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2—2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, об* новления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследовательский институт стандартизации и сертификации в машиностроении» (ВНИИНМАШ)

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 5 декабря 2003 г. № 24)

За принятие проголосовал*.

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—67

Код страны по МК (ИСО 3166> 004-67

Сокращенное наименование национального органа по стандартами**

Армения

МЛ

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Казахстан

KZ

Госстандарт Республики Казахстан

Киргизия

KG

Кыргызстацдарт

Молдова

МО

Молдова-Сгандарт

Россия

RU

Росстандарт

Таджикистан

TJ

Таджикстандарт

Туркменистан

ТМ

Главгосслужба «Туркменсгандартлары»

Узбекистан

UZ

Узсгандэрт

Украина

UA

Минэкономразвития Украины

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 ноября 2012 г. № 1323-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31209—2003 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2U16 г.

5    Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 50855—96

6    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты». а текст изменений и поправок — в ежемесячном информаци• онном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования—на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стацдартинформ. 2014

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

я

ГОСТ 31209—2003

Содержание

1    Область применения....................................... 1

2    Нормативные ссылки....................................... 1

3    Термины и определения......................................

4    Требования химической и биологической безопасности......................

5    Методы испытаний........................................

Приложение А (обязательное) Средства контроля, вспомогательные устройства и химические

реактивы....................................... 20

Приложение Б (обязательное) С*енд для испытания контейнеров для хранения крови и ее компонентов на токсичность и пирогенкость.......................... 26

ill

ГОСТ 31209—2003

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ    СТАНДАРТ

КОНТЕЙНЕРЫ ДЛЯ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ

Требоважя химической и биологической безопасности и методы испытаний

Containers (or blood and its components.

Requirements for chemical and biological safety and methods of testing

Дата введения — 2015—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на полимерные стерильные контейнеры однократного применения (далее — контейнеры), предназначенные для взятия крови, разделения ее на компоненты, а также их хранения, транспортирования и гереливания.

Стандарт устанавливает требования химической и биологической безопасности и методы проверки при приемочных, приемо-сдаточных и сертификационных испытаниях.

Требования настоящего стандарта являются обязательными.

2    Нормативные ссыпки

В настоящем стандарте истольэованы ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 8.423—81 ГСИ. Секундомеры механические. Методы и средства поверки

ГОСТ 244—76 Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия

ГОСТ 859—2001 Медь. Марки

ГОСТ 860—75 Олово. Технические условия

ГОСТ 1770—74(ИС01042—03. ИС04700—00) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2405—88 Манометры, вакуумметры, маноеакуумметры. напоромеры. тягомеры и тягонапоро-меры. Общие технические услоеия

ГОСТ 3022—80 Водород технический. Технические услоеия ГОСТ 3118—77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия ГОСТ 4108—72 Реактивы. Барий хлорид 2-водный. Технические условия ГОСТ 4204—77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия ГОСТ 4232—74 Реактивы. Калий йодистый. Технические услоеия ГОСТ 4233—77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические услоеия ГОСТ 4461—77 Реактивы. Кислота азотная. Технические услоеия

ГОСТ 5457—75 Ацетилен растворенный и газообразный технический. Технические услоеия

ГОСТ 5556—81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические услоеия

ГОСТ 5905—2004 Хром металлический. Технические требования и условия поставки

ГОСТ 5962—67* Спирт этиговый ректификованный. Технические услоеия

ГОСТ 6672—75 Стекла пок|>овные для микролрепаратов. Технические услоеия

ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652—2000 «Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия»

Издание официальное

1

ГОСТ 31209—2003

ГОСТ 7164—78 Приборы автоматические следящего уравновешивания ГСП. Общие технические условия

ГОСТ ISO 7886*1—2011 Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования

ГОСТ 8728—68 Пластификаторы. Технические условия

ГОСТ 9147—80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия ГОСТ 10163—76 Реактивы. Крахмал растворимый. Технические условия

ГОСТ 10782—65 Бутылки стеклянные для крови, трансфуэионных и инфузионных препаратов. Технические условия

ГОСТ 12026—76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия ГОСТ 14919—83 Электроплиты, электроплитки и жаропрочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 15860—64 Баллоны стальные сварные для сжиженных углеводородных газов на давление до

1.6 МПа. Технические условия

ГОСТ 17433—80 Промышленная чистота. Сжатый воздух. Классы загрязненности ГОСТ 20490—75 Реактивы Калий марганцовокислый. Технические условия ГОСТ 22260—76 Реактивы Натрий лимоннокислый 5.5-водный. Технические условия ГОСТ 22660—93 Кадмий высокой чистоты. Технические условия ГОСТ 22861 —93 Свинец высокой чистоты. Технические условия

ГОСТ 23932—90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия ГОСТ 24104—2001* Весы лабораторные. Общие технические требования ГОСТ 24297—87 Входной контроль продукции. Основные положения

ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29227—91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуировочные. Часть 1. Общие требования.

ГОСТ 29251—91 Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайга Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национатъные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (намеченным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен беа замены, то положение, е котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определениями:

3.1    Контейнеры для крови и ее компонентов — стерильные изделия медицинского назначения однократного применения, предназначенные для взятия крови, разделения ее на компоненты, а также их хранения. транспортирования и лерешвания.

Примечание — Контейнеры могут быть изготовлены из различных полимерных материалов. В зависимости от назначения контейнеры могут быть одно- и многокамерными, различной емкости, могут содержать консервант.

3.2    Химическая безопасность—отсутствие вредного действия на организм химических соединений, которые могут мигрировать из материалов или изделий медицинского назначения, контролируемое с помощью совокупности санитарно-химических и токсикологических показателей.

3.3    Биологическая безопасность—отсутствие в материалах или изделиях медицинского назначения биологических факторов, таких как живые микроорганизмы, их споры, токсичные продукты их метаболизма. контролируемое с помощью показателей стерильности и пирогенности.

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228—2008 «Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания»

2

ГОСТ 31209—2003

3.4    Санитарно-химические испытания — испытания, проводимые с целью определения суммарного количества мигрирующих в водную вытяжку из полимерных материалов и изделий химических соединений с помощью интегральных показателей, а также индивидуальных потенциально опасных соединений (составляющих полимерных композиций, технологических добавок, стерилизующих агентов, примесей в сырье и т. л.).

3.5    Токсикологические испытания — испытания, проеодимыес целью выявления вредного действия материалов изделия на организм, включающие оценку гемолитической активности, общетоксического, сенсибилизирующего. раздражающего и цитотоксического эффектов.

3.6    Контроль стерильности — проверка отсутствия жизнеспособных микробов в рабочих объемах контейнеров.

3.7    Контроль алирогенности — проверка допустимых концентраций липополисахаридов в рабочих объемах контейнеров.

3.8    Партия контейнеров, не содержащих консервант крови — количество контейнеров, простерилизо-ванных за сутки.

3.9    Партия контейнеров, содержащих консервант крови—количество контейнеров, заполненных консервантом крови из одной партии и лростерилиэованкых за сутки.

3.10    Серия контейнеров, содержащих консервант крови — количество контейнеров, заполненных консервантом крови из одной партии и простерилиэованных за один цикл стерилизации в одном стерилизаторе.

4 Требования химической и биологической безопасности

4.1    Санитарно-химическим, токсикологическим испытаниям, испытаниям на стерильность и пироген-ность (далее — испытания) подлежат контейнеры на стадии приемочных, приемо-сдаточных и сертификационных испытаний, изготовленные из материалов, рекомендованных к применению.

4.2    Приемочные и оертифи>ационные испытания контейнеров проводят уполномоченные организации государств, упомянутых в предиоловии. как проголосовавших за принятие настоящего межгосударственного стандарта.

4.2.1    Санитарно-химичесю'е испытания контейнеров проводят на соответствие требованиям 5.3.1 — 5.3.4 последующим показателям:

-    определение восстановительных примесей:

-    определение изменения величины pH вытяжки:

-    ультрафиолетовое поглощение:

•    определение содержания металлов.

4.2.1.1    Если контейнеры изготовлены из пластифицированного диоктилфталатом(ДИ-(2-этилгексил)-фгапатом) поливинилхлоридное: пластиката, то санитарно-химические испытания дополнительно проводят на соответствие требованиям 5.3.5.5.3.6 по следующим показателям:

•    определение диоюилфталата (ДОФ) —пластика тора:

-    определение винилхлорида (ВХ)—остаточного мономера.

4.2.1.2    При изготовлении контейнеров из других полимерных материалов перечень дополнительных санитарно-химических показателей и их допустимые уровни определяют в каждом конкретном случае в соответствии с нормативным документом на данный контейнер.

4.2.2    Токсикологические испытания контейнеров проводят на соответствие требованиям 5.4.1 —5.4.5 по следующим показателям:

•    острая токсичность на белых мышах;

•    индекс токсичности (цитотоксичность) на сперматозоидах быка:

•    гемолитическая активность:

•    раздражающее действие на кожу крыс и слизистую глаза кролика:

-    сенсибилизирующий эффект на белых крысах.

4.2.3    Испытания контейнеров на стерильность проводят на соответствие требованиям 5.4.6.

4.2.4    Испытания контейнеров на алирогенность проводят на соответствие требованиям 5.4.7.

4.3 Приемо-сдаточные испытания контейнеров, а также контроль полимерного сырья, используемого для изготовления контейнеров, проводит предприятие-изготовитель.

3

ГОСТ 31209—2003

4.3.1    Полимерное сырье. из которого изготавливают основной функциональный элемент контейнв* ра—собственно контейнер, подвергают контролю на соответствие требованиям ГОСТ 24297 с учетом еле* дующих показателей:

•    санитарно-химические с определением восстановительных примесей (5.3.1). изменения величины pH вытяжки (5.3.2);

•    токсикологические с определением токсичности на клеточном тест-объекте (5.4.5) или острой токсичности на мышах (5.4.1).

4.3.2    В течение трех лет с начала серийного выпуска каждую партию изделий подвергают санитарно-химическим испытаниям с определением восстановительных примесей (5.3.1) и изменения величины pH вытяжки (5.3.2); токсикологическим испытаниям с определением токсичности на клеточном тест-объекте (5.4.5) или на мышах (5.4.1). испытаниям на апирогенностъ (5.4.7.1 или 5.47.2). Испытаниям на стерильность подвергают каждую серию изделий, стерилизованных паровым методом, и каждую партию, стерилизованную радиационным методом.

4.3.3    При отсутствии на предприятии в течение 3 лет с начала серийного выпуска изделий случаев выбраковки по санитарно-химическим показателям и токсичности контроль по указанным показателям проводят от каждой 25-й партии, но не реже одного раза в месяц. Испытаниям на апирогенностъ подвергают каждую партию изделий. Испытаниям на стерильность — каждую 15-ю партию контейнеров, стерилизованных радиационным методом, и каждую серию контейнеров, простерилизоеэнных паровым методом.

4.3.4    8 случае превышения допустимых значений санитарно-химических показателей, выявления токсичности изделий испытаниям по указанным показателям подвергают 10 партий контейнеров подряд. 8 дальнейшем при отсутствии выбраковки по санитарно-химическим показателям и токсичности контроль проводят от каждой 25-й партии, но не реже одного раза в месяц.

В случае выбраковки по нестерильности радиационно-стерилизованных контейнеров в течение первого года выпуска после устранения причины брака контролю на стерильность подвергают каждую партию контейнеров. При отсутствии в течение первого года выпуска выбраковки по нестерильности контролируют каждую 5-ю партию изделий, в юследующем — каждую 15-ю.

4.4    Допустимые значения санитарно-химических и биологических показателей

4.4.1 Значения санитарно-химических и токсикологических показателей, а также показателей стерильности и апирогенности долкны соответствовать приведенным в таблице 1.

Таблица 1 — Значения саы|ларно-химииеских. токсикологических показателей, показателей стерильности и апирогенности

Наименование труппы показателей

Перечень

показателей

Допустимое

значение

Номер nyxtta методов испытаний

1 Санигарно-химичес-

кие показатели

1.1 Общие показатели

Восстановительные при-

Не более 1.0 мл 0.02 н.

5.3.1

для всех видов контейнеров

меси

раствора На^Оз

Изменение значения pH

В пределах ±1.0

5.3.2

Ультрафиолетовое погло-

Не более 0,2 в диалазо-

5.3.3

щение

не 230—360 нм

Содержание металлов:

5.3.4

бария, меди, свища.

Не более 1.0 мг/л для

олова, хрома

каждого элемента

кадмия

Не более 0.1 мг/л

12 Дополнительные по-

Содержание викилхло-

Не более 0.01 мг/л

5.3.5

казагели для контейнеров

риаа

из поливинилхлоридного

Содержание диоктилфта-

Не более 10 мг/100 мл

5.3.6

пластиката

лата

4

ГОСТ 31209—2003

Окончание таблицы 1

Наименование группы показателей

Перечень

показателей

Допустимое

значение

Номер пуиата методов испытаний

2 Токсикологические по-

Острая токсичность

Нетоксично

5.4.1

хазатели

Индекс токсичности

70 %—120%

5.4.5

Гемолитическая активность

Не более 2 %

5.4.4

Раздражающее действие

Отсутствует

5.4.2

Сенсибилизирующий эффект

Отсутствует

5.4.3

3 Стерильность

Проросты

Отсутствуют

5.4.6

4 Апирогвнность

ЛПС

Не более 0,01 мкг/мл

5.4.7

5 Методы испытаний

5.1    Порядок подготовки к испытаниям

5.1.1    Отбор образцов

5.1.1.1    Для проведения испытаний контейнеров образцы отбирают из разных мест партии в количестве 0.1 %, но не менее указанного в таблице 2.

Таблица 2 — Количество контейнеров, необходимое для испытаний

Вид

испытания

вместимость контейнера, мл

Количество образцов ап*

испытания

. шт.

сани*

тарио*

хини*

чессого

токси-ко ПО* гичес-кого

стериль

ности

пироген*

мости

сумма

Приемочные и сертифи-

500 или 300

5

5

0,4 №

5

15 + 0.4

каииокные испытания

503/300

4

5

0.4 Vn

5

14 + 0.4 ViV

503/300/300

3

4

0,4 Vw

5

12 + 0.4VW

503/300/300/300

3

4

0.4 VW

5

12 + 0.4VW

Приемо-сдаточные ис-

50) или 300

3

3

0,4 VW

5

11 +0.4*/w

пытания

503/300

3

3

0.4 V"

5

11 *0a№

503/300/300

3

2

0,4 JN

5

11 +0.4VW

503/300/300/300

3

2

0.4 JN

5

11 ♦ 0,4 JN

Обозначение: N — количество изделий 8 партии (серии). Количество изделий, отобранных для испытания на стерильность, не должно быть менее 3 и более 40 — при радиационной стеритзации, более 13 — при других видах стерилизации.

5.1.2 Приготовление вытяжек из контейнеров

5.1.2.1    Все работы по приготовлению вытяжек из контейнеров выпол няют с соблюдением требований асептики.

5.1.2.2    Для проведения санитарно-химических и токсикологических испытаний не заполненных консервантом контейнеров образць изделий извлекают из упаковки. Каждую емкость неэависимоот их числа заполняют дистиллированной водой через донорскую трубку (однокамерные контейнеры) или через надрез. сделанный на соединяющих емкости трубках (многокамерные контейнеры). Контейнеры вместимос

5

ГОСТ 31209—2003

тью 500 мл заполняют 100 мл дистиллированной воды, контейнеры вместимостью 300 мл заполняют 50 мл дистиллированной воды. Вода должна быть равномерно распределена по всему изделию. Иглу герметизируют предохранительным колпачком, а соединительные трубки пережимают зажимами ниже надреза (ближе к мешку). Затем контейнеры выдерживают в термостате при температуре (70 + 2) *С в горизонтальном положении в течение 24 ч.

В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду, помещенную в колбу со шлифом. которая термостатируетсяе тех же условиях.

По истечении указанного сэока контейнеры и контрольный раствор извлекают из термостата и охлаждают до комнатной температурь.

В первую очередь непосредственно из контейнеров производится отбор проб для определения хро-матографичесхи активных веществ по 5.3.5.3.

Оставшуюся часть вытяжек сливают в стеклянную емкость со шлифом.

5.1.2.3    Для санитарно-химических и токсикологических испытаний контейнеров с консервантом от партии отбирают необходимое количество незаполненных контейнеров, которые предварительно взвешивают. Затем незаполненные контейнеры заполняют дистиллированной водой через донорскую трубку путем передаеливания дистиллированной воды из каждой предыдущей емкости в последующую по 100 г (для контейнеров вместимостью 500 мл) и 50 г (для контейнеров вместимостью 300 мл). Вода должна быть равномерно распределена в заполняемой емкости. Иглу герметизируют предохранительным колпачком, соединительные трубки пережимают зажимами.

В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду, помещенную в герметичный стеклянный флакон.

Затем заполненные водой контейнеры вместе с контрольными растворами помещают в стерилизатор, где они подвергаются одному циклу стерилизационного воздействия подобно контейнерам с консервантом.

В заводских условиях контейнеры. заполненные дистиллированной водой, и контрольный раствор стерилизуют одновременно с контейнерами, заполненными консервантом в том же стерилизаторе. После окончания стерилизационного воздействия контейнеры и контрольный раствор извлекают из стерилизатора и охлаждают до комнатной температуры.

В первую очередь непосредственно из контейнеров проводят отбор проб для хроматографически активных веществ по 5.3.5.3. Оставшуюся часть вытяжек сливают в стеклянную емкость со шлифом.

5.1.2.4    Приготовление вытяжек для контроля апирогенности

Приготовление вытяжек для контроля на апирогенность проводят аналогично 5.1.2.2 и 5.1.2.3, используя в качестве экстрагента 0.9%-ный раствор хлорида натрия. Заполненные 0.9 %-ным раствором хлорида натрия контейнеры помещают в термостат на 24 ч при температуре (37 ± 2) *С.

5.1.2.5    Приготовление смывов для контроля стерильности проводят по 5.4.6.

ь.1.3 Контроль сырья

5.1.3.1    Для проверки сырья на соответствие санитарно-химическим и токсикологическим показателям 300 г полимерного материала (гранулята) помещают в стеклянную емкость со шлифом, заливают 1000 мл дистиллированной воды и выдерживают в термостате при температуре (70 ±2)*Св течение 24 ч.

В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду, помещенную в колбу со шлифом. которая термостатируетсяе тех же условиях.

По истечении указанного срока колбы с испытуемыми материалами и контрольными растворами извлекают из термостата и охлаждают до комнатной температуры. Вытяжку из материала сливают в колбу со шлифом.

5.2    Средства контроля и вспомогательные устройства

5.2.1    Средства контроля, вспомогательные устройства и химические реактивы, применяемые для испытаний, приведены в приложении А.

5.3    Санитарно-химические испытания

По санитарно-химическим показателям изделия должны соответствовать требованиям, приведенным в таблице 1.

5.3.1    Определение в вытяжке восстановительных примесей (окисляемых вещаете)

Определение восстановительных примесей относится к интегральным показателям и позволяет оценивать общее количество мигрирующих из контейнеров в водную вытяжку веществ восстановительного характера.

5.3.1.1    Методика определения восстановительных примесей

20 мл исследуемой вытяжки переносят пипеткой в коническую колбу вместимостью 250 мл. снабженную притертой пробкой, прибавляют 20 мл раствора марганцовокислого калия (0.002 к.) и 1 мл серной

6

ГОСТ 31209—2003

кислоты (3 к.), закрывают колбу пробкой, осторожно перемешивают содержимое колбы и оставляют стоять на 15 мин. По истечении указанного срока прибавляют 0,1 г йодистого калия и выделившийся йод титруют раствором серноеатисгокиспого натрия (0.02 н.)до светло-желтого цвета. Затем добавляют 0.5 мл раствора крахмала (0,5 %) и продолжают титровать до обесцвечивания раствора. Титрование контрольного раствора проводят в тех же условиях. Для этого используют 20 мл контрольного раствора. Определение проводят не менее чем в двух параллельных пробах (из одной и той же вытяжки или контрольного раствора). Расхождение между параллельными пробами не должно превышать 0.05 мл 0,02 н. раствора серноеатистокислого натрия.

5.3.1.2    Обработка результатов

Количество восстановител>ных примесей выражают в объеме 0,02 н. раствора серноватистокислого натрия, затраченного на их определение (Д V), мл, и рассчитывают по формуле

AVsV.-V.

где VK — объем 0,02 н. раствора сермоватистокиспого натрия, израсходованного на титрование контрольного раствора, мл;

V, — объем 0.02 н. раствора серноеатистокислого натрия, израсходованного на титрование вытяжки. мл.

Результат определения (с доверительной вероятностью 0.95) считается приемлемым, если расхождение между значениями Vt не превышает 0.05 мл. и расхождение между значениями У* также не превышает 0,05 мл.

За результат испытаний принимают среднее арифметическое двух приемлемых результатов определения. округленное до десятичных долей.

5.3.2    Определение изменения величины pH вытяжки

Величина pH характеризует кислотность или основность вытяжки.

5.3.2.1    Методика измерения

Испытуемую вытяжку и контрольный раствор помещают в стеклянный стакан и измеряют величину pH вытяжки и контрольного раствора.

5.3.2.2    Обработка результатов

Изменение величины pH—ДрН рассчитывают по формуле

дрН = (pH). — <pH)w

ГДв (pH), — pH вытяжки;

(pH), — pH контрольного раствора.

(pH) вытяжки рассчитывают как среднее арифметическое трех параллельных определений (с доверительной вероятностью 0.95). которые считают приемлемыми, если расхождение между наибольшим и наименьшим результатами on ре делений не превышает 0.05 ед. pH.

(pH) контрольного раствора рассчитывают как среднее арифметическое двух параллельных определений (с доверительной вероятностью 0,95). которые считаются приемлемыми, если расхождение между ними не превышает 0.02 ед. pH.

Значение результатов определения pH округляют до десятичных долей.

5.3.3    Ультрафиолетовое поглощение

Ультрафиолетовое поглощение относится к интегральным показателям и позволяет оценить суммарное количество мигрирующих из контейнеров веществ, поглощающих в области длин волн от 230 до 360 нм.

5.3.3.1    Проведение определения

Снимают спектр поглощения водной вытяжки из контей нерое в диапазоне длин волн 230 — 360 нм. 8 качестве раствора сравнения используют контрольный раствор. Определяют максимальное значение оптической плотности в измеряемом диапазоне длин воли.

5.3.3.2    Обработка результатов

Значение оптической плотности рассчитывают каксреднее арифметическое двух параллельных определений (с доверительной вероятностью 0.95), которые считаются приемлемыми, если расхождение между ними не превышает 0,02 ед. оптической плотности.

Значение результатов определения округляют до десятичных долей.

5.3.4    Определение содержания металлов

Определение содержания фома. меди, свинца, кадмия, олова и бария проводят с помощью атомноабсорбционного метода анализе. Сущность метода основана на измерении атомного поглощения указанных металлов в условиях, приведенных в таблицах 4 и 5.

7

ГОСТ 31209—2003

Таблица 4 — Условия определения хрома, меди, свинца и кадмия атомно-абсорбционным методом

Элемент

Аналитическая

линия, ни

Рабочий ток иа лампу. мА

Тип

пламени

Высота горелки, мм

Ширина щели мои ох реноме тра. ум

Хром

357.9

5

Ацетилен-воздух

10

0.25

Медь

324.7

4

Пропан-воздух

14

0.25

Свинец

263.3

5

Пропан-воздух

14

0.25

Кадмий

228.8

4

Пропан-воздух

14

0.25

Таблица 5 — Условия определения олова и бария атомно-абсорбционным электротермическим методом

Акали*

тическая

Рабочим то* на

Ширина

Температура ■

< продолжительность обработки пробы

Элемент

щели

моно*

Высушивание

Пиролиз

Атомиэацил

линии.

нм

лампу.

мА

хроно* метра, мм

Темпе

ратуре.

•с

Продолжительность. с

Темпе

ратура.

Продолжительность. с

Темпе

ратура.

«С

Продолжительность. с

Олово

286.3

7.5

1.0

100

40

1700

10

2300

5

Барий

553.5

10

1.0

100

40

1500

10

2500

5

5.3.4.1    Проведение анализа

5.3.4.1.1    При определение хрома, меди, свинца и кадмия анализируемый раствор распыляют в пламени при условиях, указанных э таблице 4. и измеряют атомное поглощение. Одновременно измеряют атомное поглощение контрольного раствора. Значение атомного поглощения контрольного раствора вычитают из значения атомного поглощения анализируемого раствора. Объем анализируемого раствора на один элемент определения составляет 5 мл.

Массу хрома, меди, свинца и кадмия определяют по градуировочному графику.

5.3.4.1.2Приопределенииолоеаибария микродозатором объемом 20мкл в графитовый анализатор последовательно вводят градуировочные растворы, контрольный и анализируемый растворы. Атоми-яация пробы плущАг.тяпвйтпв я атмосфере инертного газа аргона ори уолоеивх. указанных е таблице Я Расход аргона —0.5 л/мин. Атомное поглощение измеряют амплитудой пика, записываемой на самописец.

Массовую концентрацию олова и бария определяют по градуировочному графику.

5.3.4.1.3 Построение градуировочного графика

Для градуировки приборос применяют градуировочные растворы в соответствии с таблицей 6. Измеряют атомное поглощение приготовленных растворов, как указано в 5.3.4.1.

По полученным значениям атомного поглощения растворов и соответствующим им содержаниям определяемых элементов строят градуировочный график.

Таблица 6 — Градуировочная зависимость абсорбции ог концентраты (линейный участок)

Элемент

Концентрация металлов а градуировочных растворах а мкттмл (линейный участок градуировочной зависимости атомного поглощения от концемтреции)

Хром

0.02

0.05

0,1

0.5

Медь

0.02

0.05

0.1

0.5

Свинец

0.05

0.1

0.5

1.0

2.0

Кадмий

0.02

0.05

0.1

0.5

1.0

Олово

0.05

0.1

0.5

1.0

2.0

Барий

0.5

1.0

2.0

8

ГОСТ 31209—2003

5.3.4.2 Абсолютная погрешность результатов анализа и допускаемые расхождения параллельных определений не должны превышать значений, указанных в таблице 7.

Таблица 7 — Диапазон и характеристики погрешностей результатов анализа при доверительной вероятности Р = 0.95

Элемент

Диалаэог определяемых концентраций. ык>1мл

Абсолютная погрешность результатов анализа. мкг/мл

Допускаемое расхождение двух лараллельимх определений, мкг/мл

Хром

0.02—0.5

0.10 С + 0.007

0.14 С+ 0.009

Медь

0.02—0.5

0.10 С + 0.088

0.14 С+ 0.004

Свинец

0.05—2.0

0.10 С + 0.010

0.14 С+ 0.1

Кадмий

0.02—1.0

0.18 С + 0.008

0.25 С + 0.004

Олово

0.05—2.0

0.14 С + 0.01

0.18 С+0.01

Барий

0.5—2.0

0.12 С + 0.008

0.16 С+ 0.01

Обозначение: С •

— среднее арифметическое двух результатов анализа.

5.3.S Определение винилхлорида

Методика предназначена для определения остаточных количеств мономера винилхлорида в вытяжках из контейнеров методом газожидкостной хроматографии равновесной паровой фазы {«head space»).

5.3.5.1    Калибровка газового хроматографа

Калибровку прибора осуществляют с помощью растворов винилхлорида в дистиллированной воде. Все работы, связанные с приготовлением и использованием растворов винилхлорида, проводят с соблюдением условий герметичности. Стеклянный флакон вместимостью 60—65 мл заполняют взвешенным количеством дистиллированной воды (до 0.1 мг)так. чтобы объем незаполненного пространства составлял примерно 1.0 мл. Затем флаконы герметизируют с помощью резиновой прокладки и пластмассовой крышки сотверстием посередине. С цэлью предотвращения сорбции паров раствора резиновой прокладкой ее изолируют алюминиевой фольгой.

Затем во флакон вводят шприцем примерно 1 мл (около 2.5 мг) газообразного винилхлорида, массу которого определяют взвешиванием с точностью до 0.1 мг. Получают растворе концентрацией винилхлорида примерно 40 мг/л (раствор 1), который тщательно перемешивают в течение 15 мин. 1.5 мл полученного раствора вводят в стеклянный стакан вместимостью 60—65 мл. заполненный дистиллированной водой, как описано выше. Получают раствор винилхлорида с концентрацией примерно 1.1 мг/л (раствор 2). Из этих растворов, используя набор микрошприцев и флаконов, подготовленных аналогично вышеизложенному, готовят серию стандартных растворов с концентрациями 0,001—0.01 мг/л (из раствора 2) и 0,05—0.1 мг/л (из раствора 1). В заранее приготовленные загерметизированные пенициллиновые флаконы шприцем отбирают по 3 мл каждого из приготовленных стандартных растворов. Затем эти флаконы термостатируют на кипящей водяной бане в течение 40—50 мин. По истечении указанного времени подогретым шприцем отбирают по 2 мл паровой фазы дз каждой пробы и вводят в испаритель хроматографа.

5.3.5.2    Условия хроматографирования

Температуры:

•    термостата колонок 60 °С;

•    испарителя 90 вС

•    детектора 100 вС.

Скорости газов:

- гелия ЗОмл/мик:

•    водорода 30 мл/мин;

•    воздуха 300 мл/мин.

Время выхода винилхлорида 24 с.

Допускается изменение условий хроматографирования в пределах, обеспечивающих определение винилхлорида в соответствии с тэебованиями методики.

Площади пиков обсчитывают с помощью интегратора. При отсутствии интегратора площади пиков рассчитывают как произведение высоты на среднюю линию пика. Строят калибровочный график в

9

ГОСТ 31209—2003

координатах: по оси абсцисс — концентрация винилхлорида С„. мг/л, по оси ординат — площади пиков S, мкВ с. Предел обнаружения винилхлорида 0.0005 мг/л. Калибровку проводят не реже одного раза в месяц. В случае неисправности прибора после устранения неполадок необходимо откалибровать прибор заново.

5.3.5.3 Проведение анализа

Для определения винилхлзрида в вытяжках от партии контейнеров отбирают не менее трех изделий, вытяжки из контейнеров, приготовленные в соответствии с 5.3.5.1 и 5.3.5.2, отбирают непосредственно из изделий путем прокола иглой иярица донорской трубки. Из каждого контейнера отбирают не менее двух проб по 3 мл каждая.

3 мл отобранной вытяжки помещают в заранее подготовленные загерметизированные пенициллиновые флаконы. Затем флаконы термостатируют на водяной бане 40—50 мин. 2 мл паровой фазы отбирают подогретым шприцем и вводят в испаритель хроматографа.

Из каждого флакона для анализа отбирают не менее трех параллельных проб.

Концентрацию винилхлорида в вытяжке из контейнеров См. мг/л. рассчитывают по формуле

л

О

где С; — концентрация винилхлорида в пробе, найденная по калибровочному графику, мг/л; л — число проб.

С целью оценки полученных результатов для выборки каждого отобранного из партии образца рассчитывают среднее арифметическое и среднее квадратическое отклонения, по которым уже для каждой выборки рассчитывают коэффициент вариации К:

К * — х 100%. х

где а — среднее квадратическое отклонение: х — среднее арифметическое отклонение.

В случае получения значения коэффициента вариации более 15 % хотя бы для одной из выборок, определение повторяют. Если значение коэффициента вариации для каждой из выборок менее или равно 15 %. то результат считают статистически значимым.

5.3.6 Определение диоктмфталата (ДОФ)—пластификатора

Пластификатор ДОФ определяют е водной вытяжке из контейнеров путем экстракции его водно-спиртовым раствором с последующим снятием спектра поглощения е УФ области е диапазоне длин волн от 230 до 360 нм.

5.3.6.1    Построение калибровочного графика

Снимают спектры поглощения стандартных растворов с концентрацией ДОФ: 1. 2, 5, 10 и 20 мг/100 мл. В качестве раствора сравнения используют экстрагирующий водно-спиртовой раствор. Строят график в координатах: по оси ординат — оптическая плотность при максимуме поглощения (О^,) при 272 нм. по оси абсцисс — концентрация ДОФ Сдоф. мг/100 мл.

5.3.6.2    Экстрагирование ДОФ

Через узел для взятия крсеи заполняют три пустых полимерных контейнера до половины их номинальной вместимости. Используют предварительно нагретый до температуры (37 ± 2) ®С экстрагирующий водно-спиртовой раствор. Пот-остью удаляют из контейнеров воздух и герметично закрывают узел для взятия крови. Заполненные контейнеры в горизонтальном положении погружают на (6011) мин в водяной термостат, не встряхивая. По истечении указанного времени извлекают контейнеры из термостата, аккуратно перевертывают 10 раз и переливают содержимое контейнеров в стеклянную колбу со шлифом.

5.3.6.3    Определение ДОФ в вытяжках из контейнеров

Снимают спектр поглощения экстракта из контейнеров, используя в качестве раствора сравнения экстрагирующий еодно-спиртоеой раствор. Определение проводят не менее чем в двух параллельных пробах из одного и того же экстракта. Измеряют оптическую плотность при максимуме поглощения (D^,).

5.3.6.4    Обработка результатов

Содержание ДОФ в экстракте определяют путем сравнения результатов, полученных для контейнеров. сданными калибровочного графика для стандартных растворов.

10

ГОСТ 31209—2003

Значение концентрации ДОФ рассчитывают как среднее арифметическое двух результатов параллельных определений (с доверительной вероятностью 0,95). которые считаются приемлемыми, если расхождение между ними не превышает 0.02 ед. оптической плотности.

Значение результатов определения округляют до десятичных долей.

5.4Токсикологические исследования

Требования к изделиям по показателям токсичности должны соответствовать приведенным в таблице 1.

5.4.1    Определение острой токсичности на белых мышах

Вытяжки из изделий испытывают на беспородных белых мышах-самцах массой 18—25 г. прошедших 7-дневный карантин. Вопытной v контрольной группах должно быть не менее 8 животных. Водные вытяжки в количестве 50 мл на килограмм массы тела животных вводят однократно внутрибрюшинно. Животным контрольной группы в том же объеме вводят дистиллированную воду. Через 24 ч после введения вытяжек состояние животных оценивают то следующим тестам:

• масса тела в граммах —определяют до введения вытяжек и через сутки после введения, натощак: . общее состояние животных: поведение, подвижность, состояние шерстного покрова — сразу после введения, через 4 и 24 ч после введения:

-макроскопическая оценка состояния внутренних органов и тканей на вскрытии—животных через 24 ч умерщвляют декапитацией. Сначала вскрывают контрольную группу, затем подопытную, обращая внимание на область введения вытяжки, состояние подкожной клетчатки, брюшины, мышц брюшной стенки. региональных лимфоузлов и их протоков, внутренних органов:

- взвешивание внутренних органов: печени, почек, селезенки — определение коэффициентов массы внутренних органов делением массы органа в миллиграммах на массу тела в граммах. Полученные цифровые данные подлежат статистической обработке с использованием критерия «и Сгьюдента. В случае получения достоверной разницы между подопытной и контрольной группами по двум из исследуемых показателей вытяжка из изделия признается токсичной. При обнаружении достоверного отличия по одному из показателей состояния животных испытания следует повторить на удвоенном количестве животных. При повторном обнаружении достоверных различий изделие считают токсичным. В случае гибели 1 —2 животных испытание повторяют на удвоенном количестве животных (по 16 мышей в каждой группе). При гибели хотя бы одного подопытного животного при повторном испытании изделие считают токсичным.

5.4.2    Определение раздражающего действия на кожу белых крыс и слизистую глаза кролика Определение раздражающего действия на кожу белых крыс и слизистую глаза кролика проводят на

белых крысах при нанесении экстракта из изделия на кожу выстриженного бока либо на кроликах при инсталляции экстракта в конъюнктивальный мешок глаза.

На белых крысах испытания проводят при ежедневном в течение 7 дней нанесении 1 мл экстракта из изделия на участок 2 х2 см выстриженного бока. Контрольным животным аналогичным образом апплиииру-ют контрольный раствор. В каждой группе должно быть по 8 животных. Каждый день до и после аппликации отмечают реакцию кожи на контагт с вытяжкой в соответствии с классификацией, приведенной в таблице 8.

Таблица 8 — Оценка кожно-раздражакнцего действия

Кожная реакиив

Оценка в баллах

Эритема

Нет эритемы

0

Очень слабая эритема

1

Отчетливая эритема

2

Средняя эритема

3

Сильная эритема (свекольно-красная)

4

Образование отека

Нет отека

0

Очень слабый отек

1

Отчетливый отек

2

Средний отек (возвышение на 1 мм)

3

Сильный отек (возвышение более 1 мм)

4

Общий возможный балл, оценивающий раздражение. — в.

11

ГОСТ 31209—2003

Для получения индекса раздражения для одного животного надо сложить баллы раздражения как по эритеме, так и по отеку для всех сроков обследования и разделить на число обследований. Общий индекс раздражения сравнивают с приведенным в таблице 9.

Таблице 9 — Оценка кожно-раздражакхцего действия

Кожная реакция

Средний балл

Не принимается но внимание

0—0.4

Слабая реакция

0,5—1.9

Средняя реакция

2—4.9

Сильная реакция

5—В

Изучение раздражающего действия на слизистую глаза проводят на 3 кроликах, которым в один глаз вносят вытяжку ежедневно в течение 5 дней с помощью пипетки по 1—2 капли. Состояние глаз контролируют через 1 и 24 ч. перед следующим воздействием.

Реакцию учитывают в соответствии со шкалой, приведенной в таблице 10.

Таблице 10 — Оценка раздражающего действия на слизистую глаза

Реакция слиаисюй оболочки

Оценка в баллах

Реакции нет

0

Легкое покраснение конъюнктивы

1

Покраснение коньюнктиеы и чгстично склеры

2

Резкое покраснение конъюнктивы и всей склеры, гнойный офтальмит

3

Результаты обследования каждого из 3 кроликов суммируют и делят на число обследований. Общий индекс раздражения определяют по таблице 10.

5.4.3    Определение сенсибилизирующего действия на белых крысах

Определение сенсибилизирующего действия проводят на белых крысах. В каждой группе должно быть не менее 8 животных. Сенсибилизируют животных при введении 0.02 мл вытяжки из контейнеров в кожу наружной поверхности уха. Контрольным животным вводят контрольный раствор — дистиллированную веду, через 10 дней проводят 5—/ ежедневных эликутанных аппликаций вытяжки, нанося на кожу выстриженного бока по 0.5 мл вытяжки. На следующий день после последней аппликации проводят провокационную внутрикожную пробу. Для этого 0.02 мл вытяжки инъецируют в кожу другого выстриженного бока животного. Реакцию на провокационную внутрикожную пробу отмечают через 15 мин. 24 и 48 ч. отмечая интенсивность покраснения и площадь гиперемированного участка. Через 48 ч после введения внутри-кожной пробы животных забивают декалитацией. отбирая кровь для проведения специфических иммунологических реакций. Используют иммунологические тесты, основанные на определении образования комплекса антиген-антитело: реакцию дегрануляции тучных клеток (PQTK). реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА). реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию специфической агломерации лейкоцитов (РСАЛ), реакцию специфического лизиса лейкоцитов (PCCJI). До начала проведения иммунологических специфических реакций необходимо тщательно подобрать рабочую концентрацию вытяжки, не вызывающую денатурации сывороточных белков и не оказывающую цитотоксического действия.

У забитых животных определяют коэффициенты массы иммуиокомпетентных органов—селезенки и тимуса и обрабатывают полученный материал статистически с определением коэффициента «и Стыеденга.

При оценке сенсибилизирующего эффекта учитывают результаты внутри кожной пробы, определения коэффициентов массы внутренних органов и иммунологических тестов с кровью животных.

5.4.4    Определение гвмоттической активности

5.4.4.1    Принцип метода —определение гемолитического действия вытяжки по 100%-ному гемолизу.

5.4.4.2    Вытяжки готовятся в соответствии с 4.1.

5.4.4.3    Приготовление 10%-ной взвеси эритроцитов

Для приготовления взвеси эритроцитов может быть использована эритроцитная масса или нитратная кровь, заготовленная на 3.9%-ном растворе цитрата натрия е соотношении 1:9. Срок хранения цитратной

12

ГОСТ 31209—2003

крови (эригроцитной массы) 72 ч при температуре от4вСдо6фС.5мл крови (эритроцитной массы) центрифугируют 10 мим при 2000 об/м^н. Надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 8 мл стерильного 0.9%-ного раствора хлористого натрия. Содержимое взбалтывают и центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают. Эту операцию (отмывание клеток) повторяют два раза. После отмывания над осадочная жидкость должна быть прозрачна, бесцветна и не иметь следов гемолиза.

Если надосадочная жидкость не отвечает указанным требованиям, эритроциты не могут быть использованы для приготовления взвеси.

Для получения 10%-ной взвеси эритроцитов 1 мл осадка клеток смешивают с 9 мл 0.9%-ного раствора хлористого натрия. Полученную взвесь эритроцитов допускается хранить не более 24 ч при температуре от 4 вС до 6 вС в холодильнике.

5.4.4.4    Приготовление проб (контрольной и с 100%-ным гемолизом)

5.4.4.4.1а) Контрольная проба —0.5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов и 5 мл 0.9%-ного раствора хлористого натрия — для контейнеров «Комполласт».

б) Контрольная проба—0,5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов и 5 мл раствора «Глюгицир» (в стекле), используемого в качестве контрольного образца данной испытуемой партии. — для контейнеров «Гемакон».

5.4.4.4.2 Проба с 100%-ным гемолизом: 0.5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов и 5 мл дистиллированной воды — происходит полное разр/шение эритроцитов, что соответствует 100%-ному гемолизу.

Контрольную пробу и пробу с 100%-ным гемолизом готовят для каждого образца эритроцитной взвеси.

5.4.4.5    Проведение определения

В три пробирки помещают по 0.5 мл 10%-ной взвеси эритроцитов. К0.5мл 10%-ной взвеси эритроцитов в каждую пробирку прибавляют по 5 мл вытяжки, в которую предварительно добавлен хлористый натрий. Смесь ставят в термостат на 1 ч при температуре (37 ± 2) *С. затем центрифугируют в течение 20 мин при 2000 об/мин.

Все манипуляции по отношению к контрольной пробе и пробе с 100%-ным гемолизом проводят параллельно с опытными пробами, как описано выше. Надосадочную жидкость отделяют для проведения измерений оптической плотности.

5.4.4.6    Оптические измерения

Оптическую плотность опытной, контрольной пробы и пробы с 100%-ным гемолизом измеряют на фотоэлектроколориметре при дгине волны 540 нм против «холостой» пробы (вода). Толщина кюветы 1 см.

Результаты регистрируют пэ оптической плотности.

5.4.4J Расчет процента гемолиза проводят по формуле

Процент гемолиза =    ^ * Ю0 хК,

fc«oo

где — оптическая плотность опытной пробы:

Е* — оптическая плотность контрольной пробы:

Е100 — оптическая плотность воды со взвесью эритроцитов—100%-ный гемолиз;

К — поправочный коэффициент, учитывающий дополнительное разбавление дистиллированной водой при условии, что £,оо > 1.0.

Примечание — Если оптическая плотность контрольной пробы (10%-ная эригроцитная взвесь с 0.9%-ным раствором хлористого катрия) составляет 0.03 и более, результаты всего опыта недостоверны и не учитываются.

Оптическая плотность раствора с 100%-ным гемолизом должна быть не менее 0.8 и не более 1.0.

В случае отклонения от указанного предела опыт следует повторить с вновь приготовленной эритроцитной взвесью.

5.4.4.8 Оценка результатов

Испытуемое изделие свободно от гемопитически действующих веществ, если процент гемолиза во всех трех пробах менее двух.

Если процент гемолиза одной пробы более 2. опыт следует повторить. При получении такого же результата вытяжку считают гемопитически активной, и дальнейшие испытания не проводят.

В случае отсутствия гемолитического действия проводят дальнейшие токсикологические испытания.

13

ГОСТ 31209—2003

5.4.5 Определение индекса токсичности на сперматозоидах быка

5.4.5.1    Все растворы в течение эксперимента должны находиться при постоянной температуре (40 + 1.5) *С.

5.4.5.2    Для определения индекса токсичности опытного раствора необходимо сравнить его с контрольным (модельным) раствором. В качестве контрольного раствора выбирают глюкозо-цитратную среду (глюкоза — 4 г. цитрат натрия 1 г. дистиллированная вода 100 мл). Контрольная среда одновременно является разбавителем для оттаивания замороженной спермы. Опытным раствором является вытяжка из изделия. доведенная до изотонии глюкозой и цитратом (глюкоза—4 г. цитрат 1 г. вытяжка 100 мл). Контрольный и опытный растворы по 1 мл помешают е пробирки с притертыми пробками и ставят в водяную баню при температуре (40 + 1.5) *С. Контрольный и опытный растворы приготавливают заранее, за час до начала эксперимента.

5.4.5.3    Оттаивание замороженной спермы

Дозируют а пробирки по 025 или 0.5 мл разбавителя и ставят их в водяную баню при температуре (40 + 1.5) *С. Охлажденным до температуры жидкого азота анатомическим пинцетом извлекают из сосуда Дьюара гранулу спермы и быстро опускают в нагретый раствор. НЕ ДОПУСКАЕТСЯ ОТТАИВАТЬ НЕСКОЛЬКО ГРАНУЛ В ОДНОЙ ПРОБИРКЕ! Сразу после размораживания содержимое пробирок с целью приготовления маточного раствора спермы сливают в пробирку и тщательно перемешивают.

5.4.5.4    Приготовление рабочих образцов

В каждую пробирку контрольной и опытной серий помещают по 0.2 мл маточного раствора спермы.

5.4.5.5    Подготовка пробы к исследованию

Каждый рабочий образец переносят в кювету. Кювету герметизируют, устанавливают в кюветодержа-тель и помещают в стенд.

5.4.5.6    Накопление экспериментальных данных

Нажатием кнопки «ПУСК» зключают процесс накопления данных. При достижении нулевых значений показателя подвижности во всех кюветах отжатием кнопки «ПУСК» производят остановку процесса накопления данных.

5.4.57 Обработка экспериментальных данных

Обработку экспериментальных данных осуществляют с помощью компьютера. Для каждого образца рассчитывают среднее время подвижности в условных единицах

1(ш, х;)

*«■>"    1ш,    •

где т, — /-е значение показателя подвижности;

/ текущий номер оценки показателя подвижности.

Для контрольной и опытной выборок образцов вычисляют среднее арифметическое значение и среднее квадратическое отклонение.по которым в свою очередь рассчитывают для каждой выборки коэффициент вариации С по формуле

С в х 100%.

где я — среднее квадратическое отклонение; х — среднее арифмегичесхое отклонение.

В случае получения значения коэффициента вариации более 15 % хотя бы для одной из выборок, эксперимент повторяют. Если значение коэффициента вариации для каждой из выборок меньше или равно 15 %. результаты считаются статистически верными.

Затем рассчитывают индекс токсичности I, по формуле

/,.^хЮ0%,

'С0

где f£, f‘p — среднее арифметическое значений среднего времени подвижности для опытной и контрольной выборок образцов соответственно.

5.4.5.8 Оценка результатов контроля

Испытуемую партию изделий считают нетоксичной, если индекс токсичности в пределах 70 % —120 %. Во всех остальных случаях партию изделий считают токсичной.

14

ГОСТ 31209—2003

5.4.6 Испытания на стерильность

5.4.6.1    Испытания на стерильность методом прямого посева

5.4.6.1.1    Отбор проб

Количество проб, отбираемых для первичного посева, составляет 0.4 Jn . где N — количество изделий в серии или партии.

Максимальное количество проб, отбираемых для первичного посева, составляет: 13 — при паровом методе стерилизации: 40 — лри радиационном методе стерилизации.

Кроме изделий, направленных непосредственно на анализ, отбирают также дубликаты в тройном ко» личестве: две части из них используют в случае необходимости для повторного контроля, одну часть оставляют для арбитражного хранения.

5.4.6.1.2    Испытания на стерильность

Испытания на стерильность проводят методом прямого посева в тиогликолевую среду. Посевы помещают в термостат при температуре 32 вС и выдерживают 8 сут при паровом методе стерилизации или 14 сут при радиационном методе стерилизации, после чего проводят учет результатов.

5.4.6.2    Испытания на стерипьностьс использованием биотестов

5.4.6.2.1    Методика контроля стерильности полимерных контейнеров, стерилизованных паровым методом с помощью биотестов

5.4.6.2.1.1    Требования к биотесту

5.4.6.2.1.1.1    Биотест представляет собой носитель (инсулиновый флакон), содержащий споры микроорганизмов Вас. Stearothrmophilus ВКМ В-718 с регламентированной устойчивостью к пару.

5.4.6.2.1.1.2    Биотесты поставляются в комплекте, состоящем из носителей с высушенными спорами микроорганизма; цветной питательной среды; стерильного шприца и стерильных резиновых пробок размером 6,5; термовременных бумажных индикаторов: соответствующих эталонов цвета питательной среды и термоиндикаторов, а также инструкции по применению комплекта. Изготовитель биотестов должен быть аттестован.

5.4.6.2.1.1.3    Каждая партия биотестое сопровождается паспортом с указанием:

-    метода стерилизации, для которого предназначен биотест;

•    названия культуры микроорганизма;

•    количества спор в биотесте;

•    устойчивости биотеста к тару;

-    номера партии;

-    срока годности;

-    условий хранения:

•    наименования предприя туя-изготовителя,

5.4.6.2.1.2    Контроль стерильности

5.4.6.2.1.2.1 Контролю подвергают каждую серию продукции, изготовленную на одном предприятии и простерилиэоеанную в одной стерилизационной камере за один цикл. Биотесты должны быть упакованы в пакеты из упаковочной бумаги, запечатанные в полиэтиленовые пакеты.

5.4.62.12.2    Число и расположение биотестое в стерилизационной камере зависят от размера камеры и типа стерилизатора (прямоугольный, круглый) в соответствии с таблицей 11.

Таблица 11 — Расположение <онгрольных точек в паровых стерилизаторах

Емкость камеры стерилизатора, ам5

Общее число контрольных точек

Расположение контрольных точек

а стерилизационных коробках

ене стерилизационных коробок

До 100

5

3

2

Св. 100 ДО 750

11

9

2

Св. 750

12

11

2

Примечание — Точка 1 — у загрузочной двери; 2 — у противоположной стенки (разгрузочной двери): 3 — 13 — внутри стерилизационной камеры на разных уровнях или внутри стерилизуемых упаковок.

15

ГОСТ 31209—2003

5.4.6.2.1.2.3    На предприятиях, длительное время осуществляющих стерилизацию на собственной базе, периодичность контроля, количество биотестов, помещаемых в камеру, могут быть изменены.

5.4.6.2.1.2.4    Методика и техника исследования биотестов

После цикла стерилизации биотесты извлекают и собирают в полиэтиленовый пакет, где они хранятся до проведения контроля стерильности. Для определения жизнеспособности популяции спор носители (флаконы) вынимают из защитной упаковки (до исследования флаконы допускается хранить 2 недели в холодильнике). Резиновую пробку флакона с индикаторной питательной средой обрабатывают спиртом и прокалывают стерильной иглой с ватным фильтром. Затем пробку прокалывают иглой шприца и набирают в него питательную среду из флакона. Над огнем спиртовки в каждый биотест наливают примерно по 1 мл цветной питательной среды, флаконы закрывают стерильной резиновой пробкой и оставляют в термостате при 55 *С на 48 ч.

5.4.6.2.1.2.5    Обработка результатов

Обработку результатов исследования биотестов проводят после термостатирования в течение 48 ч. Предварительный учет результатов проводят через 24 ч.

О гибели спор в биотесте а процессе стерилизации свидетельствует неизменный цвет по всех биоте-стах-флаконах. После сравнения с эталонами делается выводов эффективности процесса стерилизации и о стерильности данной партии продукции. Если цвет питательной среды во фпаконе-биотесте в процессе термостатирования изменился ка желтый, это свидетельствует о наличии жизнеспособных микроорганизмов. В этом случае для убедительности проводят бактериологический анализ (если в данном учреждении имеется бактериологическая лаборатория) выросших микроорганизмов. При выявлении роста тест-культуры (Вас. SfearotfvmopMus) делается вывод о неэффективности процесса стерилизации и о нестерильности данной партии продукции.

5.4.6.2.2 Методика контроля стерильности полимерных контейнеров, стерилизованных радиационным методом с помощью биотестов.

5.4.6.2.2.1    Требования к б^отесту

5.4.6.2.2.1.1    Биотест представляет собой носитель (шприц инъекционный однократного применения 2А или 5Б Луер по ГОСТ ISO 7886-1), содержащий споры культуры микроорганизмов с радиорезистентностью не менее 2.1 кГр. например. Вас. Subtilis JSY 228.

5.4.6.2.2.1.2    Биотесты поставляются в комплекте, состоящем из носителей со спорами и индикаторной питательной среды, расфасованной во флаконы. Изготовитель биотестов должен быть аттестован.

5.4.6.2.2.1.3    Каждая партия биогестов сопровождается паспортом с указанием:

•    метода стерилизации, для которого предназначен биотест:

-    стерилизующей дозы, на которую рассчитан биотест;

-    название культуры микроорганизмов;

-    количества микробных клеток;

•    радиорезистентности культуры микроорганизмов;

•    номера партии;

•    срока годности;

-    условий хранения;

•    наименования предприятия-изготовителя.

S.4.6.2.2.2 Контроль стерильности

5.4.6.2.2.2.1    Контролю стерильности подвергают каждую партию стерилизуемой продукции. Партией считают однотипную продукцию, изготовленную на одном предприятии и простерилизованную за один технологический цикл. Для проведения контроля биотесты помещают в коробки (ящики) с продукцией между индивидуальными упаковками. В каждую коробку (ящик) укладывают 5 биотестов. Каждую коробку (ящик), содержащую биотест, маркируют. Коробки (ящики), содержащие биотесты, облучают одновременно с контролируемой продукцией. Допускается использовать фантомы, имитирующие облучаемую продукцию.

5.4.6.2.2.2.2    Для гамма-установок с периодическим технологическим циклом на каждый цикл 3 коробки (ящика) с биотестами размещают в местах поля гамма-установок с наименьшей мощностью дозы. Для гамма-установок с непрерывным технологическим циклом коробку (ящик)с биотестами помещают на транспортное устройство через каждые 2 ч работы установки, но не менее 3 коробок на партию продукции. Для ускорителей электронов, работающих в циклическом режиме, на каждый цикл используют одну коробку (ящик) с биотестами. Для ускорителей электронов, работающих в непрерывном режиме. — одну коробку через каждые 2 ч работы, но не менее 3 коробок на партию продукции.

16

ГОСТ 31209—2003

5.4.6.2.2.2.3    На предприятиях, осуществляющих стерилизацию на собственной базе, по результатам оценки санитарногигиенического состояния производства, технологии стерилизации, вида стерилизуемой продукции могут быть изменены периодичность контроля, количество биотестов. помещаемых в коробку, количество коробок, используемых для контроля, период их помещения на транспортное устройство.

5.4.6.2.2.2.4    Методика и техника исследования биотестов

После проведения облучешя партии продукции работник службы контроля качества предприятия из* впекает биотесты из коробок (ящиков) и собирает в полиэтиленовый пакет, где они хранятся не менее 24 ч до проведения контроля стерильности.

Для определения жизнеспособности популяции микроорганизмов носители (шприцы) вынимают из защитной упаковки (до исследования шприцы допускается хранить в защитной упаковке 2 недели в холодильнике). снимают колпачок сислы, прокалывают иглой обработанную спиртом резиновую пробку флакона с индикаторной питательной средой и. не освобождая цилиндр от воздуха, набирают в цилиндр 1 мл питательной среды. Колпачок вновь надевают на иглу, а шприц с питательной средой возвращают в пакет и устанавливают в термостате при температуре (37 ± 1) вС. Пакет помещают таким образом, чтобы шприц оказался иглой вниз. Биотесты помещают в термостат и оставляют в термостате на 48 ч.

5.4.6.2.2.2.5    Обработка результатов

Обработку результатов исследования биотестов проводят после термостатирования в течение 48 ч. Предварительную обработку результатов проводят через 24 ч.

О гибели микроорганизмов в шприце-биотесте в процессе стерилизации свидетельствует неизменный цвет питательной среды (зеленый). Сохранение цвета питательной среды во всех шприцах-биотестах свидетельствует об эффективности процесса стерилизации и о стерильности данной партии продукции.

Изменение цвета питатель-юй среды в шприце в процессе термостатирования на желтый свидетельствует о наличии жизнеспособных микроорганизмов. В этом случае проводят бактериологический анализ выросших микроорганизмов. При выявлении роста тест-культуры делают вывод о неэффективности процесса стерилизации и о нестерильности данной партии продукции.

5.4.7 Испытания на пирогонность

5.4.7.1    Испытание на пирогенность на кроликах

Отбор, содержание, подготовку животных к испытаниям, повторность их использования проводят по Государственной Фармакопеи* XI издания.

Тест-доза —10 мл на килограмм массы кролика. Вытяжку вводят в ушную вену.

Испытуемую партию продукции считают непирогенной, если после введения вытяжки ни у одного из 3 подопытных кроликов ни при одном из трех измерений не наблюдалось повышение температуры более чем на 0.6 *С по сравнению с исходной температурой и в сумме повышение температуры при каждом измерении у 3 кроликов не превышало 1,4 *С.

Если у одного или двух кроликов томпбротура повысилась болев чем на 0.6 "С и в сумма при каждом

измерении у 3 кроликов повышение температуры составило более 1.4 °С. испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах.

Партию полимерных контейнеров считают непирогенной, если не более чем у 3 из 8 кроликов наблюдалось индивидуальное повышение температуры не более чем на 0.6 *С, и общая сумма повышений температуры у всех 8 кроликов не превышала 3.7 *С.

Допускается максимальное понижение температуры на 0.6 *С. В случае понижения температуры у одного кролика более чем на 0.6 *С испытание повторяют на 5 кроликах.

Партию полимерных контейнеров считают непирогенной, если после повторного исследования ни у одного из 5 кроликов максимальное понижение температуры не превысило 0,6 °С . и не более чем у 2 кроликов из 5 температура понизилась на 0.6 вС по сравнению с исходной. В противном случае партию контейнеров бракуют.

5.4.7.2    Испытание на пирогенность методом реакции связывания комплемента

5.4.7.2.1    Приготовление раствора антител

Берут длинным анатомическим пинцетом замороженную гранулу антител из сосуда Дьюара и помещают в пробирку.

5.4.7.2.2    Приготовление раствора антигена концентрацией 5 минимальных пирогенных доз в миллилитрах.

Вскрывают ампулу с липополисахаридом. содержащую 500 минимальных пирогенных доз в 1 мл. 0.1 мл этого препарата переливают в пробирку с 0,9 мл апирогенного раствора хлорида натрия. Приготов-

' Действует на территории Пжсийской Федерации.

17

ГОСТ 31209—2003

ленный раствор тщательно перемешивают, при этом концентрация антигена в нем составляет 50 минимальных пирогенных доз в 1 мл. Берут 0.1 мл этого раствора и переливают в пробирку с 0.9 мл апирогенного раствора хлорида натрия. После этого концентрация антигена будет составлять 5 минимальных пирогенных доз в 1 мл.

5.4.7.2.3 Приготовление раствора комплемента

Берут длинным анатомическим пинцетом гранулу замороженного комплемента и помещают в пробирку.

5.47.2.4    Приготовление огытного образца

В пробирку с притертой пробкой наливают 1 мл испытуемого образца вытяжки, антитела и комплемент согласно паспорту. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием.

5.47.2.5    Приготовление кочтрольногообразцасотрицательной реакцией

В пробирку с притертой пробкой наливают 1 мл раствора хлорида натрия, антитела и комплемент согласно паспорту. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием.

5.47.2.6    Приготовление контрольного образца о положительной реакцией

В пробиркус притертой пробкой наливают0.1 мл раствора антигена по 5.47.2.2 и добавляют антитела и комплемент согласно паспорту. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием.

5.47.27 Опытный и контрольные образцы помещают в термостат. Проводят инкубацию в течение 18—24 ч при температуре (27 ± 2) *С в термостате или при температуре (5 ± 2) “С в холодильнике. Рекомендуемый температурный режим — в соответствии с указанным в паспорте.

5.47.2.8    Приготовление биосенсорной системы

В пробирки отмеряют пипеткой объем разбавителя, указанный в паспорте, ставят их в водяную баню при температуре (40+1.5) "С. В каждую пробирку добавляют объем антител, указанный в паспорте, тщательно перемешивают встряхиванием. Длинным анатомическим пинцетом, охлажденным до температуры жидкого азота, извлекают из сосуда Дьюара гранулу спермы и быстро опускают в нагретый раствор. После оттаивания гранулы содержимое пробирки перемешивают и выдерживают 15 мин. НЕ ДОПУСКАЕТСЯ ОТТАИВАТЬ НЕСКОЛЬКО ГРАНУГ В ОДНОЙ ПРОБИРКЕ* Содержимое пробирок сливают в одну и перемешивают встряхиванием. Получается маточный раствор спермы.

5.47.2.9    Приготовление рабочих образцов

В каждую пробирку контрольной и опытной серий добавляют по0,2 мл маточного раствора спермы.

5.4.7.2.10    Подготовка пробы к исследованию на стенде

Каждый рабочий образец переносят в кювету. Затем кювету устанавливают в кюветодержатель стенда.

5.4.7.2.11    Проведение накопления экспериментальных данных

Нажатием кнопки «ПУСК» включают процесс накопления. При достижении нулевых значений показателя подвижности во всех кюветах или по желанию оператора проводят остановку процесса накопления данных отжатием кнопки «ПУСК».

5.4.7.2.12    Обработка экспериментальных данных

Для каждого образца выживаемость S рассчитывают по формуле

ft

S в Хш,.

Г-1

где т, — i-e значение показателя подвижности;

/ — текущий номер оценки показателя подвижности; п — количество оценок показателя подвижности.

5.4.7.2.13 Оценка результатов контроля

5.4.7.2.13.1 Если для контрольных образцов с положительной и отрицательной реакциями выполнено соотношение

S*n . S*°.

где S™ и S*° — среднее арифметическое выживаемости выборок образцов положительного и отрицательного контроля, то оценивают результаты испытаний образцов по 5.4.7.2.13.2. в любом другом случае испытания повторяют, начиная с 5.47.2. Если при повторных испытаниях результат будет таким же. испытания повторяют с новым набором реактивов и посуды.

18

ГОСТ 31209—2003

5.4.7.2.13.2 Оценка результатов испытаний образца вытяжки Если S4" >S°. образец считают апирогенным: если S ° 2 S*". образец признают пирогенным.

где S° — среднее арифметическое выживаемости выборки образцов опыта.

При обнаружении пирогенности испытания по 5.47.2 необходимо повторить. При этом вытяжку приготавливают из вновь отобранных изделий. При получении такого же результата вытяжку признают пирогенной.

Результаты приемочных испытаний оформляют токсикологическим заключением. Результаты приемосдаточных и сертификационных испытаний оформляют протоколами.

19

ГОСТ 31209—2003

Приложение А (обязательное)

Средства контроля.

Вспомо'атольные устройства и химические реактивы

Таблица А.1

Вмд испытания, процедура

Приме>иое оборудование, реактивы

Требования а оборудованию и реактивам

Обозначение

межгосударственного

стандарта

Приготовление

О&орудсвание

вытяжек

Термостат

Стерилизатор воздушный Стерилизатор паровой

Весы

Температура (70 ± 2) "С Температура (180 1 2) *С Температура (120 1 2) *С Давление пара.

(1.1 + 0.2) кг/см3

Погрешность взвешивания 0.1 г

Колбы конические со шлифом

Объем 250. 500. 1000 мл

ГОСТ 1770

Бутылки стеклянные для крови, грансфуэионных и инфузионных препаратов

Объем 250 мл

ГОСТ 10782

Санитарно-химические испытания

Восстанови-

Цилиндр

Реактивы

Вода дистиллированная Стерильный, а пирогенный, изотонический раствор 0.9%-ного хлорида натрия

Оборудование

Объем 50 и 100 мл

ГОСТ 1770 ГОСТ 6709

тельные примеси

Весы аналитические Секундомер

Погрешность взвешивания 0.0002 г

ГОСТ 0.423

Бюретка

Объем 5 мл:

цена деления 0.02 мл

ГОСТ 29251

Колбы мерные

Объем 100 и 1000 мл

ГОСТ 1770

Пипетки мерные

Объем 0,1—20 мл

ГОСТ 29227

Колбы конические со шлифом Реактивы

Объем 250 мл

ГОСТ 1770

Калий марганцовокислый KMnOj 0.1 и. раствор;

ХЧ.

ГОСТ 20490

Натрия *иосульфат кристаллический 0.1 н раствор:

0.002 н. раствор (готовят в день проведения анализа из 0,1 н. раствора)

ХЧ.

ГОСТ 244

Калий йодистый

ХЧ.

ГОСТ 4232

Кислота серная H2S04 2 н. раствор (готовят из концентрированной H2S04 плотностью 1.84 г/мл)

х.ч.. плотность 1,84 т/мл

ГОСТ 4204

Крахмал растворимый 0.5%-ный раствор

хч.

ГОСТ 10163

20

ГОСТ 31209—2003

Продолжение таблицы А. 1

Вид испытания.

Примерное оборудование.

Требования

Обозначение

процедура

реактивы

с оборудованию и реактивам

межгосударственного

стандарта

Изменение ее*

Оборудование

личины pH 8ЫГЯЖ-

рН-метр

Тип pH-121

ки

Стакан химический Реактивы

Объем 50 мл

ГОСТ 23932

Вода дистиллированная

ГОСТ 6709

Ультрафиопе-

Оборудование

тоеое поглощение

УФ-спектэофотометр

Рабочий диапазон длин волн от 230 до 360 нм

Кюветы кз кварцевого стекла

Толщина 1.0

Определение

Оборудование

металлов

Спектрометр атомно-флюорвс*

ТипАФА «Квант-444*

ценгный дпч определения хрома.

меди, свинца, кадмия

Спектрометр агомно-абсорбци-

Тип «Квант-Зееман

онный с графитовым атомизатором для определения олова и бария

ЭТАП-233»

Самописец

Тип СП-КСП-4

ГОСТ 7164

Микродозагор пипеточный

Тип П1-0.02

Пакты с полым катодом на хром, медь, свинед. кадмий, олово и барий

Тип ЛТ-2

Весы лабораторные аналитичес-

2-й класс точности

ГОСТ 24104

кие

Ацетилен растворенный и газообразный

ГОСТ 5457

Пропан-бутан: смесь в баллонах Воздух схатый в баллонах'

ГОСТ 17433

Аргон высокой чистоты Редуктор ацетиленовый Плитка электрическая с захры-

ГОСТ 14919

той спиральо

Пипетки 'радуировочные

Объем 1—10 мл

ГОСТ 29227

Колбы мерные

Объем 25—500 мл

ГОСТ 1770

Стаканчиси (бюкса) для взвеши-

Тип СВ

ГОСТ 25336

еания

Стаканы термостойкие

Объем 50—100 мл

ГОСТ 25336

Реактивы

Кадмий высокой чистоты

ГОСТ 22860

Свинец высокой чистоты

ГОСТ 22861

Олово металлическое

ГОСТ 860

Медь мв'алличесхэя

ГОСТ 859

Хром ме*аллический

ГОСТ 5905

Барий хгористый

ГОСТ 4108

Кислота азотная

ГОСТ 4461

Кислота соляная

ГОСТ 3118

Вода дистиллированная

Стандартный раствор хрома кон-

Устойчив в течение года

ГОСТ 6709

центрацией 1 мт/мл;

готовят следующим образом: 0.5000 г хрома растворяют в

30 мл 18%-ной (об.) соляной кислоты доводят до 500 мл дистиппиро-

ванной ведой

21

ГОСТ 31209—2003

Продолжение таблицы А. 1

Вид испытания, процедура

Примерное оборудование, реактивы

Требования с оборудованию и реактивам

Обозначение

межгосударственного

стандарта

Определение

Стандартные растворы меди.

Устойчивы в течение

металлов

свинца и одмия концентрацией

года

1 мг/мл; гоювят следующим обра-

зом:

0.5000 г соответствующего металла растворяет в 20 мл 50%-ной (об.) азотной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой

Стандар*ный раствор олова кон-

Устойчив в течение 2 мес.

цвнтрацивй 1 мг/мл; готовят следую-

Хранят в полиэтилено-

шим образом:

0.5000 г олова растворяют в 40 мл царской водки, добавляют 60 мл концентрированной азотной кислоты, доводят до 500 мл диет ил-

вой посуде

лированной водой

Стандвр*ный раствор бария концентрацией 1 мг/мл; готовят следующим образом:

0,8693 г бария хлорида 2-вод-ного растворяют в диет ил лированной воде, добавляют 20 мл концентрированной сспяной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой

Устойчив в течение года

Растворы хрома, меди, свинца.

Устойчивы в течение

кадмия, бария и олова концентра-

2—3 мес.

цивй 0.1 мг/мл; готовят разбавлена-

Раствор олова хранят в

ем соответствующих стандартных

полиэтиленовой посуде: ус-

растворов сонцентрацией 1 мг/мл дистиллированной водой

тойчиа в течение 2 недель

Градуировочные растворы кон-

Устойчивы в течение

цвнтрацивй металлов 2 мкг/мл и 10 мкг/мл: готовят разбавлением ра-

2—3 недель

створов металлов концентрацией

0,1 мг/мл дисгиллироаатой водой

Градуировочные растворы кон-

Устойчивы в течение

ценграцией 0,02: 0.05 и 0.1 мкг/мл: готовят разбавление растворов металлов концентрацией 1 мкг/мл дис-

1— 2 дней

тиллированной водой

Градуирсвочныв растворы олова

Устойчивы в течение 1-й

должны содзржать 5% (об.) концентрированной азотной кислоты; хранят их в лошэтиленоаой посуде

недели

Определение

Оборудование

винилхлорида

Газовый хроматограф с пламен-

Тип 3700. Хром-5, я Ши-

но-ионизационным детектором и интегратором

мадэу»

Баллоны со сжатыми газами:

- гелием

ГОСТ 15860

- водородом'*

ГОСТ 3022

- воздухэм"

Шприц стеклянный

Объем 1.0 мл; цена деления 0.02 мл

ГОСТ 17433

22

ГОСТ 31209—2003

Продолжение таблицы А. 1

Вид испытания.

Примерное оборудование.

Требования

Обозначение

процедура

реактивы

с оборудованию и реактивам

межгосударственного

стандарта

Определение

Шприц стеклянный

Объем 1—5 мл

винилхлорида

Шприц ГсЭОВЫЙ

Объем 1—5 мл

Шприц млкролитровый

Объем 50—500 мкп

Весы аналитические

Погрешность взвешивания 0.1 мг

Секундомер

Флаконы стеклянные с резино-

Объем 60—65 мл

ГОСТ 8.423

выми прокладками и пластмассовыми крышками с отверстиями посередине

Стальная колонка 1.8 м х 3 мм.

заполненная 10%-ным Carbovax 20М на Cromosorb W-AW-DMCS 80/100 мвш.

Флаконы пенициллиновые с си-

ликоновыми прокладками и герметичными крышками

Объем 10 мл

Реактивы

Винил хлористый СгН3С( газ Вода дистиллированная

Технический

ГОСТ 6709

Определение

Оборудование

диокгилфталага

УФ-спектэофотометр

Рабочий диапазон длин волн от 230 до 360 нм

Кюветы V2 кварцевого стекла

Толщина 1.0 см

Термостат водяной

Температура (37 ± 2) *С

Пикнометр

Рабочий диапазон плотностей 0,9373—0.9378 г/мл

Секундомер Весы аналитические

Погрешность взввшиаа-

ГОСТ 8.423

кия 0.0002 г

Колбы мерные

Объем 100—1000 мл

ГОСТ 1770

Пипетки мерные Реактивы

Объем 1—10 мл

ГОСТ 29227

Вода дистиллированная

ГОСТ 6709

Спирт этиловый С2Н5ОН

ГОСТ 5962

Диокгилфгалат С6Н4(СООСвН1?)

Плотность

ГОСТ 8728

0.982—0.986 г/мл

Показатель преломле-

кия при 20 *С равен 1.486—1.487

Экстрагирующий раствор:

Плотность по пикномет-

смесь дистиллированной воды и этилового сгирта

Раствор диоктилфталата в этиловом спирте концентрацией 1 г/100 мл

Стандартные растворы диоктип-фталата в эестрагирукхцем растворе концентрациями:

ру 0.9373—0.9378 г/мл

1; 2:5; 10;20мг/100мл

23

ГОСТ 31209—2003

Продолжение таблицы А. 1

Вид испытания.

Примежое оборудование.

Требования

Обозначение

процедура

реактивы

с оборудованию и реактивам

межгосударственного

стандарте

Токсикологи-

ческие ислыта-

ния

Определение

Оборудование

гемолитической

Центрифуга

6000 об/мин

активности

Фотометр

Тип КФК-3

Пробирки химические

Объем 1—5 мл

ГОСТ 1770

Пипетки

Объем 1—2 мл

ГОСТ 29227

Штатив для пробирок

Шприцы

Вата

Объем 1—5 мл

ГОСТ 5556

Ножницы

Реактивы

Спирт этиловый 96%-ный

ГОСТ 5962

Хлорид натрия — водный раствор 0.9%-ный

ГОСТ 4233

Натрий лимонно-кислый 5.5-водный

ГОСТ 22280

Определение

Оборудование

острой токсично-

Весы лабораторные

Типа ВЛКТ-500

ГОСТ 24104

сто

Шприцы

Лупа

Объем 2 мл

Определение

Стаканчик химический

Объем 50 и 100 мл

ГОСТ 23932

раздражающего

Пипетка глазная

действия

Шпатель

Лупа

Определение

Шприц

Объем 1 мл

сенсибилизирую-

Пипетка глазная

щей активности

Шпатель

Весы лабораторные

Предел взвешивания

ГОСТ 24104

200 г

Пробирки центрифужные

Объем 10 мл

ГОСТ 1770

Центрифуга Стекла предметные

6000 об/мин

Стекла покровные

Размер 18 х 18 мм

ГОСТ 6672

Электроплитка

Микроскоп

Пипетки пастеровские Груши резиновые Скальпель

Тип БМИ-3

Термостат

Бумага аильтровальная

Температура (40 ± 2) °С

ГОСТ 12026

Чашка фарфоровая Реактивы

Объем 100 мп

ГОСТ 9147

Хлорид натрия — водный раствор 0.9%-ный

ГОСТ 4233

Парафин

24

ГОСТ 31209—2003

Продолжение таблицы А. 1

Вид испытания, процедура

Примерное оборудование, реактивы

Требования с оборудованию и реактивам

Обозначение ыежтосударс таенного стандарта

Токсикологические испытания на клеточном тест-обьекте

Оборудование

Стенд дгя испытаний на клеточном тест-объекте

Пробирки с притертой пробкой — 10 шт.

Дозатор пипеточный Мерная колба — 2 шт.

Весы аналитические

Пинцет анатомический Сосуд Дьюара - 2 шт.

Реактивы

Вода дистиллированная Сперма Зыка замороженная

Технические характеристики стенда приведены в приложении Б Объем по 3 мл

Объем 0,2: 0,5 мл Объем 100 мл Погрешность взаешива-шя не более 0.001 г Длина 250 мм Тип СДС-25

ГОСТ 6709

Испытания на апирогенносгь

Оборудование

Стенд дгя испытаний на клеточном тест-объекте

Пробирки с притертой пробкой — 10 шт.

Дозатор пипеточный

Весы аналитические

Пинцет анатомический

Сосуд Дьюара — 2 шт.

Стерилизатор воздушный медицинский

Холодильник бытовой

Термостат

рН-метр

Реактивы

Стерильный, алирогенкый изотонический раствор хлорида натрия 0.9%-ный

Сперма Зыка (замороженная в жидком азота)'"

Антитела (замороженные в жид* ком азоте)”'

Комплемент (замороженный в жидком азоте)”'

Лилополйсахарид (в ампуле)'”

Технические характеристики стенда приведены в приложении Б Объем по 3 мл

Объем 0.5; 0.2; 0.1; 0.05: 0.02 мл

Погрешность взвешивания не более 0,001 г Длина 250 мм Тип СДС-25

Температура (180 + 2) *С

Максимальная температура плюс 50 *С Тип pH-121

Испытания на стерильность

Оборудование Ножниць хирургические Пинцет анатомический Термостат

Длина 250 мм Температура (40 1 2) *С

25

ГОСТ 31209—2003

Окончание таблицы А. 1

Вид испытания, процедура

Примонос оборудование, реактивы

Требования ■ оборудованию и реактивам

Обозначение

межгосударственного

стандарта

Испытания на стерильность

Реактивы

Питательная среда тиогликопе-вая*"

Биотест для контроля стерильности радиационно-стерилизованных изделий''*

Биотест для контроля стерильности изделий, стерилизованных паровым методом'"

' Допускается использование компрессора воздушного типа ПК-1, давление воздуха 4—6 кг/см2.

" Допускается использование генератора водорода типа СГС-2 (давление водорода 1—2 кг/см2) и компрессора воздушного типа ПК-1 ‘давление воздуха 4—6 кг/см2).

Поставляют в виде набсра.

Приложение Б (обязательное)

Стенд дгя испытания контейнеров для хранения крови и ее компонентов на токсичность и пирогенность

Б.1 Назначение стенда

Б. 1.1 Стенд для испытания сонгейнерет на токсичность и пирогенность (далее — стенд) предназначен для претерки вытяжек из конгейнвроЕ на цитотоксичность и пирогенность.

Б. 2 Технические характеристики стенда К 7 1 Длина вппым пачарыпт получение — П.АЯ мш Б.2.2 Мощность лазерного излучения не менее 1 мВт.

Б.2.3 Время одного анализа от 10 до 300 с с шагом 10 с.

В2А Время перемещения капилляра с образцом не более 2 с.

Б2.5 Время обратного хода каретки не более 15 с.

Б.2.6 Температура проб и рабочих образцов в диапазоне 35 *С — 45 'С с шагом 1 *С. Отклонение температуры от установленного значения в пределах ± 0.5 *С.

Б.2.7 Основные размеры кахлляра должны ооотвегствовать приведенным на рисунке Б.1.

50

с>-

Рисунок Б.1 — Капилляр

Б.З Краткое техническое огисание стенда

Б.3.1 Принципиальная схема стенда и основные геометрические размеры должны соответствовать приведенным на рисунке Б.2. Конструктивное исполнение стенда обеспечивает одновременную оценку подвижности суспензии рабочего образца и визуальное наблюдение за клетками суспензии.

Б.3.2 Проведение испытали

Включают стенд с помощью компьютера 14 задают контроллеру 13 необходимые значения температуры карегки и блока подготовки проб, время одного анализа, количество используемых в данном эксперименте

26

ГОСТ 31209—2003

капилляров. После получения на дисплее компьютера информации о достижении заданных значении температуры готовят рабочие образцы в соответствии с 5.4.5.Д настоящего стандарта.

Переносят рабочие образцы в капилляры и герметизируют путем поочередного окунания концов капилляров 5 в ванну с парафином, находящуюся на блоке подготовки проб, на глубину 3 мм. Помещают капилляры 5 с рабочими образцами на каретку 4 и устанавливают в привод б. С помощью компьютера 14 проводят идентификацию капилляров и запускают процесс накопления экспериментальных данных. При достижении нулевых значений показателя подвижности во всех капиллярах останавливают процесс накопления экспериментальных данных и проводят их математическую обработку по алгоритмам, приведенным в 5.4.S.7 и 5.4.7.2.12 настоящего стандарта. Результаты расчетов распечатывают на принтере 15 и записывают в базу данных. При необходимости происходящее в капиллярах с рабэчими образцами наблюдают визуально на экране 9. Поддержание необходимой температуры каретки и на блоге подготовки проб, а также перемещение каретки осуществляют автоматически с помощью контроллера 13 и компьютера 14.

1

2

I — ламр; i — светодепитепьмая пластина:    3 — блох терыостатиро-

вания; 4 — сарвтха; S — капилляр, в — привод:    7— микрообьектиа.

в — сеетодегнтепькая пластина: 9 — экран. 10 — паска: If — фотодиод. 12 — усипи'епь. 13 — контроллер:    14 — компьютер:    15 — принтер.

1б — блок подготовки проб и рабочих обраэцоа

Рисунок Б.2 — Принципиальная схема стенда

27

ГОСТ 31209—2003

УДК 615.38.014.8:006.354    МКС 11.040.20

Ключевые слова: контейнеры для крови и ее компонентов, требования химической и биологической безопасности. методы испытаний, полимерные стерильные контейнеры однократного применения, взятие крови. разделение на компоненты, хранение, транспортирование, переливание, методы проверки, приемочные испытания, приемосдаточные испытания, сертификационные испытания

Редактор Д М. Кутмицкий Технический редактор О. И. Власова Корректор С. И. Фирсова Компьютерная верстка Т. Ф. Кузнецовой

Сдано а набор 06 12.2013. Подписано а печать 25 02.2014. Формат 60x64 Ve. Бумага офсетная Печать офсепая Уел. печ. л. 3.72. Уч.-иад. л. 3,05. Тираж 66 эха Зак. 2011.

Гарнитура Ариал.

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ». 123905 Москва. Гранатный пер.. 4.     

Набрано и отпечатано в Калужской типографии стандартов, 248021 Капута, уп. Московская. 256.