База ГОСТовallgosts.ru » 65. СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО » 65.120. Корма для животных


ГОСТ 33427-2015 Корма. Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои

Обозначение: ГОСТ 33427-2015
Наименование: Корма. Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои
Статус: Принят

Дата введения: 01/01/2017
Дата отмены: -
Заменен на: -
Код ОКС: 65.120
Скачать PDF: ГОСТ 33427-2015 Корма. Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои.pdf
Скачать Word:ГОСТ 33427-2015 Корма. Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои.doc


Текст ГОСТ 33427-2015 Корма. Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

ГОСТ

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ


33427-

2015

(ISO 14902:2001)

КОРМА

Определение трипсинингибирующей активности

в продуктах из сои

(ISO 14902:2001,

Animal feeding stuffs — Determination of trypsin inhibitor activity of soya products,

MOD)

Издание официальное

Москва

Стенда ртинформ 2016


Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандарт тизации установлены ГОСТ 1.0—92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положа* ния» и ГОСТ 1.2—2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила раз* работки, принятия, применения, обновления и отмены».

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом «Всероссийский научно-исследовате* льский институт комбикормовой промышленности» (ОАО «ВНИИКП») на основе официального перевода на русский яэыканглоязычной версии международного стандарта, указанного е пункте 5

2    ВНЕСЕН Межгосударственным комитетом по стандартизации МТК 4 «Комбикорма, белково-витаминные добавки, премиксы»

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 августа 2015 г. Nv 79-П)

За принятие проголосовали:

Кратки наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны

по МК (ИСО 3166) 004- 97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргыастакдврт

Россия

RU

Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 2 октября 2015 г. N91444-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33427—2015(IS014902:2001 )введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 Настоящий стандарт модифицирован по отношению к международному стандарту ISO 14902:2001 «Корма для животных. Определение активности ингибитора трипсина в продуктах из сои» («Animal feeding stuffs — Determination of trypsin inhibitor activity of soya products». IDT).

Международный стандарт разработан подкомитетом ISO/ТС 34/SC10 «Корма для животных» тех* ническогокомитета лостандартизации ISO/TC 34 «Пищевые продукты» Международной организации по стандартизации (ISO).

Уточненные отдельные слова, фразы, абзацы внесены в текст межгосударственного стандарта для приведения в соответствие с требованиями ГОСТ 1.5—2001. отраслевой терминологией и выделены курсивом. Дополнительные примечания и приложения выделены полужирным курсивом.

В настоящем стандарте заменены единицы измерения объема: «литр» на «дециметр кубический», «миллилитр» на «сантиметр кубический», для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5—2001 (пункг4.14.1).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного между* народного стандарта в соответствии с требованиями межгосударственной системы стандартизации и общепринятой в Российской Федерации отраслевой терминологией.

В настоящем стандарте ссылки на международные стандарты, используемые в примененном международном стандарте, заменены на межгосударственные стандарты, гармонизированные с международными.

Официальные экземпляры международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

Сравнение структуры международного стандарта со структурой межгосударственного стандарта приведено в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты». а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ. 2016

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

in

Содержание

1    Область применения..................................................

2    Нормативные ссылки.................................................

3    Термины и определения................................................

4    Сущность метода...................................................

5    Реактивы и растворы................................................

6    Средства измерения, вспомогательное оборудование...........................

7    Отбор проб........................................................

8    Подготовка анализируемой пробы.........................................

9    Проведение испытаний................................................

10    Обработка результатов..............................................

11    Прецизионность....................................................

12    Протокол испытания.................................................

Приложение А (обязательное) Схема разведения экстракта пробы.....................

Приложение Б ('справочное) Результаты межлабораторных испытаний...................

Приложение ДА (справочное) Сравнение структуры международного стандарта со структурой

межгосударственного стандарта...............................

Библиография........................................................

ГОСТ 33427—2015 (IS014902:2001)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА

Определение трипсинингибирующей активности в продуктах из сои

Feeds. Determination of trypsin Inhibitor activity of soye products

Дата введения — 2017—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на корма и устанавливает метод определения трипсин-ингибирующей активности (ТИА) в продуктах из сои.

Значения активности ингибитора трипсина являются показателем степени тепловой обработки этих продуктов.

Нижний предел определения активности ингибитора трипсина составляет 0.5 мг/г.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ61—75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ OIMI. R 76-1—2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 1770—74 (ИСО 1042—83. ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ3118—77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ4328—77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-1—2003' Точность(правильностьипрецизионность)методовирезультатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ ИСО 5725-2—2003** Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ГОСТ ISO 6498—2014 Корма, комбикорма. Подготовка проб для испытаний

ГОСТ6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 13496.0—80”* Комбикорма, сырье. Методы отбора проб

ГОСТ25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ2922?—91 (ИСО835-1—81) Посудалабораторнаястеклянная.Пипвткиградуированные. Часть 1. Общие требования

’ В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО S72S-1—2002.

'* в Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-2—2002.

"• В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 6497—2011 «Корма для животных. Отбор проб».

Издание официальное

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарта применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1 трипсинингибирующая активность; ТИА: Отношение массы трипсина, ингибируемого по методике, описанной е настоящем стандарте, к массе навески пробы.

Примечание — Трипсинингибирующую активность выражают в миллиграммах на грамм.

4    Сущность метода

Сущность метода заклюнаетсяааксгращт ингибитора трипсина из навески при 9.5 ед. pH. ингибировании активности трипсина, используя в качестве субстрата бензо ил-Ьаргиним-р-нитроанил ид. определении оставшейся активности трипсина путем спектрофотометрического измерения высвобож-денногор-нитроанилина и вычислении трипсинингибирующей активности.

5    Реактивы и растворы

5.1    Реактивы

5.1.1    Вода дистиллированная поГОСТ 6709.

5.1.2    Натрия гидроокись по ГОСТ4328.

5.1.3    Кислота соляная по ГОСТ3118.

5.1.4    Кислота уксусная ледяная по ГОСТ61.

5.1.5    Кальций хлористый двухводный. СаС1220. с массовой долей основного вещества не менее 99.0%.

5.1.6    Трипсин крупного рогатого скота.

5.1.7    Бензоил-Ьаргинин-р-нитроанилид (L-BAPA) с содержанием основного вещества не менее 99.0%.

5.1.8    Трис-(гидроксиметил) аминометан (Трис) с содержанием основного вещества не менее 99.0%.

5.1.9    Диметилсульфоксид (ДМСО) с содержанием основного вещества не менее 99.5 %.

Применение — Допускается использование реактивов аналогичной или болев высокой квалификации. изготовленных по другой нормативной документации.

5.2 Приготовление растворов

5.2.1    Приготовление раствора гидроокиси натрия сШаОН) * 0,01 моль/д*#5

В мерной колбе вместимостью 1000 см3 растворяют 0.4 г гидроокиси натрия и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

5.2.2    Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) = 6 моль/дм*

Раствор готовят смешиванием соляной кислоты и дистиллированной воды в соотношении 1:1 по объему.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.3    Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) « 1 моль/дм*

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 83 см3 концентрированной соляной кислоты и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой (см. 5.1.1).

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.4    Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) * 0,1 моль 1дм3

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 пипеткой вносят 8.3 см3 концентрированной соляной кислоты и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой (см. 5.1.1).

Примечание — Допускается готовить раствор из стендерт-титра соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) * 0.1 моль/дм3 или разбавлением раствора соляной кислоты c(HCl) * 1 иопь/дм3 в Юраз.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.5    Приготовление раствора соляной кислоты с(НС1) * 0,001 моль 1дм5

Готовятразбавлениемв ЮОразраствора соляной кислоты с(НС1) = 0,1 моль/дм3.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.6    Приготовлениеуксусной кислоты с(СН5СООН) * 5,3 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 303 см3 ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.7    Приготовление раствора хлорида кальция в соляной кислоте

Растворяют 735 мг двухводного хлористого кальция (см. 5.1.5) в 1000 см3 раствора соляной кислоты (см. 5.2.5)ain и проверяют pH раствора, который должен быть равен (3,010.1) ед. pH.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.2.3 Приготовление основного раствора трипсина

Трипсин (см. 5.7.6), перед использованием заранее достают из холодильника и оставляют на некоторое время для нагревания до температуры окружающей среды.

Растворяют 27,0 мг трипсина в растворе хлорида кальция (см. 5.2.7) в мерной колбе вместимостью 100 см3 (см. 6.1) и доводят до метки раствором хлорида кальция.

Срок хранения раствора трипсина при комнатной температуре — в течение пяти дней, при необходимости хранения раствора более пяти дней его хранят в холодильнике при температуре (4 ±2) *С(см. 6.3).

5.2.9    Приготовление рабочего раствора трипсина

8 мерную колбу вместимостью 100 см3 (см. 6.1) вносят 5 см3 основного раствора трипсина (см. 5.2.8) и доводят до метки раствором хлорида кальция (см. 5.2.7).

Раствор используют в день приготовления.

5.2.10    Приготовление буферного раствора

8 мерной колбе вместимостью 1000 см3 растворяют 6,05 г Трис (см. 5.7.6) и 735 мг двухводного хлористого кальция (см. 5.7.5) в 900 см3 дистиллированной воды (см. 5.7.7). Регулируют pH раствора до (8.2 ± 0.1) ед. pH с помощью соляной кислоты (см. 5.2.2). Объем доводят дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора 2 мес.

5.2.11    Приготовление реактива L-BAPA

Растворяют 60 мг L-6APA (см. 5.1.7) в 1 см3 ДМСО (см. 5.7.9) в мерной колбе вместимостью 100 см3 (см. 6.1) и доводят до метки буферным раствором (см. 5.2.70).

Раствор готовят в день использования.

6 Средства измерения, вспомогательное оборудование

Используют обычное лабораторное оборудование, в частности следующее:

6.1    Колбы мерные 1(2.2а)‘100(1000)-2по ГОСТ 1770.

6.2    Кюветы с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм.

6.3    Холодильник, поддерживающий температуру (4 ± 2) ®С.

6.4    pH-метр с пределом допускаемой погрешности 10.05 ед. pH.

6.5    Устройство для смешивания.

6.6    Спектрофотометр, позволяющий проводить измерения на длине волны 410 нм.

6.7    Секундомер.

6.8    Баня водяная с циркуляционным насосом, поддерживающая температуру (37 ± 0,25) ®С.

6.9    Мельница, снабженная ситом с отверстиями диаметром 0,5 мм.

6.10    Центрифуга лабораторная с частотой вращения не менее 1500 об/мин.

6.11    Центрифужные пробирки.

6.12    Колбы конические Кн-2-100-42-ТХС ло ГОСТ 25336.

6.13    Весы неавтоматического действия с пределами допускаемой абсолютной погрешности

10,001 г по ГОСТ OIML К 76-1 или норматиеномудокументу. действующему на территории государства. принявшего данный стандарт.

6.14    Пипетки 1(2)-1(1а, 2.2а)-1(2)-1(2.5,10) по ГОСТ29227.

6.15    Цилиндры 1(2.3.4)-50(100.500)~2поГОСТ1770.

6.16    Колбымерные 1(2)-100(1000}~2поГОСТ 1770.

Примечание — До пускается использование других средств измерений и оборудования с метрологическими характеристиками, на хуже указанных.

7    Отбор проб

Отбор проб — поГОСТ 13496.0.

Поступающая в лабораторию проба должна быть представительной, не поврежденной и не претерпевшей изменений во время транспортирования и хранения.

Проба должна храниться в условиях, предотвращающих ее порчу или изменение состава.

8    Подготовка анализируемой пробы

Анализируемую пробу готовят в соответствии с ГОСТ ISO 6498 со следующим дополнением: реп» резентатиемую часть пробы размалывают с помощью мельницы (см. 6.9) с минимальным нагреванием. Размолотую пробу тщательно перемешивают.

9    Проведение испытаний

9.1    Количество испытаний

Для каждой пробы выполняют два параллельных определения трипсинингибирующей активности в соответствии с 9.2.9.3 и 9.5 в условиях повторяемости.

9.2    Экстракция

Навеску массой (1.000 ± 0.001) г помещают в коническую колбу вместимостью 100 см3 (см. 6.12). добавляют 50 см3 раствора гидроокиси натрия (см. 5.2.1).

Доводят значение pH полученного раствора до (9.5 ±0.1) ед. pH раствором соляной кислоты (см. 5.2.3 или 5.2.4). при этом электрод промывают минимальным количеством дистиллированной воды (см. 5.1.1).

Закрывают коническую колбу пробкой и оставляют на ночь (от 15 до 24 ч) в холодильнике (см. 6.3). Также в холодильник помещают дистиллированную воду в количестве, необходимом для проведения экстракции проб.

Содержимое колбы переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 (см. 6.1). доводят объем раствора до метки дистиллированной водой изхолодильника.перемешиваюг поставляют на 15мин.

Подготовленный экстракт используют в течение рабочего дня при хранении в холодильнике.

Надосадочную часть экстракта используют для дальнейшего разбавления дистиллированной водой комнатной температуры. Степень разбавления зависит от ожидаемой величины ТИА.

9.3    Разведение экстракта

Оценивают значение ТИА пробы и готовят три различных разведения экстракта на основе схемы разведения, представленной в таблице А.1 приложения А. так. чтобы в результате измерения ТИА (см. 9.5) хотя бы одно из трех значении процентного содержания ингибитора было бы получено в пределах от 40 % до 60 %.

Если ни один из трех результатов не входит в этот диапазон, то следует подобрать другое разведение и повторить процедуру.

9.4    Проверка активности трипсина

Активность трипсина (см. 5.1.6) проверяют в каждой партии. Для этого готовят контрольный (пробирка N9 1) и анализируемый (пробирка N9 2) растворы трипсина.

Вцвнтрифужныелробирки (см. 6.11)Afrf \л N9 2 последовательно вносят по 5 см3 реа\я\леа L-BAPA (см. 5.2.11). поЗсм3 дистиллированной воды, в пробирку N91 добавляют 1 см3 раствора уксусной кислоты (см. 5.2.6).

Содержимое пробирок перемешивают с помощью устройства для смешивания (см. 6.5) и помещают пробирки на водяную баню (см. 6.8) на 10 мин.

Затем в каждую пробирку добавляют по 1 см3 рабочего раствора трипсина (см. 5.2.9). Содержимое пробирок снова перемешивают с помощью устройства для смешивания (см. 6.5) и помещают центрифужные пробирки обратно на водяную баню (см. 6.8). Через (600 ± 5) с в пробирку № 2 добавляют по

1    см3 раствора уксусной кислоты (см. 5.2.6).

Содержимое пробирок перемешивают с помощью устройства для смешивания и центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин.

Эти растворы остаются стабильными в течение 2 ч.

Измеряют оптическую плотность надосадочной жидкости в каждой пробирке относительно дистиллированной воды на спектрофотометре (см. 6.6) при длине волны 410 нм в кюветах (см. 6.2).

Разница между оптической плотностью анализируемого раствора трипсина и оптической плотностью контрольного раствора трипсина (А, — Аы) должна быть (0.380 1 0,050) в. о. п. Если условие не выполнено, то используют новый трипсин.

9.5 Измерение трипсикингибирующей активности

Для каждого разведения экстракта пробы (см. 9.3) готовят анализируемый и контрольный растворы пробы. Подготовку анализируемых растворов пробы и соответствующих контрольных растворов пробы проводят параллельно, включая центрифугирование.

8 центрифужные пробирки (по две пробирки для раствора трипсина и для каждого разведения экстракта пробы) последовательно вносят по 5 см3 реактива L-8APA (см. 5.2.11), в пробирки с растворами трипсина по 3 см3 дистиллированной воды, в пробирки с растворами проб — по 1 см3 экстракта проб и по

2    см3 дистиллированной воды. В пробирки, е которых готовят контрольные растворы трипсина и пробы. вносят по 1 см3 раствора уксусной кислоты.

Содержимое пробирок перемешивают с помощью устройства для смешивания (см. 6.5) и помещают пробирки в водяную баню (см. 6.8) на 10 мин.

Затем в каждую пробирку добавляют по 1 см3 рабочего раствора трипсина (см. 5.12). Содержимое пробирок снова перемешиваютс помощью устройства для смешивания и помещают центрифужные пробирки обратно в водяную баню. Через (600 ± 5) с е пробирки, в которых готовят анализируемые растворы трипсина и пробы, добавляют по 1 см3 раствора уксусной кислоты (см. 5.2.6).

Содержимое пробирок перемешиваютс помощью устройства для смешивания (см. 6.5). Затем все пробирки с растворами центрифугируют в центрифуге (см. 6.10) втвчвние 10 мин при 1500 об/мин.

Полученные растворы остаются стабильными в течение 2 ч.

Измеряютоптическуюплотностьнадосадочноцжидкостивоесехлробиркахнаспектрофотометре (см. 6.6) при длине волны 410 нм в кюветах (см. 6.2).

10 Обработка результатов

10.1 Вычисление содержания ингибитора трипсина в анализируемом растворе пробы Содержание ингибитора трипсина/, %,еанализируемомрастворелробывычисляютлоформуле

(V


j_(А    ~^до

(А,-А*)

где Аг — оптическая плотность анализируемого раствора трипсина, е. о. п.: АЬг — оптическая плотность контрольного раствора трипсина, е. о. п.;

As — оптическая плотность анализируемого раствора пробы, е. о.п.:

Аь, — оптическая плотность контрольного раствора пробы, е. о. л.;

100 — коэффициент пересчета в проценты.

10.2 Вычисление коэффициента разведения экстракта пробы Коэффициент разведения экстракта пробы f, вычисляют по формуле


(2)

где 100—объем экстракта анализируемой пробы (см. 9.2). см3:

100 — объем разведенного экстракта анализируемой пробы, см3:

V—объем, полученныйна основе данных в соответствии с приложением А. таблица А.1. см3.

S

10.3 Вычисление трипсинингибирующей активности

Трилсинингибирующая активность ТИА, мг/г, вычисляют по формуле

/По


ТИА- — юо

где г — содержание ингибитора трипсина в анализируемом растворе пробы. %. вычисляемое по фор• муле (1):

т, — масса трипсина, мг;

Г, — коэффициент разведения экстракта пробы, вычисленный по формуле (2): f2 — поправочный коэффициент, равный 2.8 • 10-4. основанный на чистоте трипсина (56%. см. [1 ] и [2]) и разбавлении трипсина согласно 5.2.8 и 5.2.9;

100 — коэффициент перевода из процентов: т0 — масса навески пробы, г.

Полученный результат округляют до 0.1 мг/г.

11 Прецизионность

11.1    Межлабораторные испытания

Результаты межлабораторных испытаний в отношении прецизионности метода определения трипсинингибирующей активности приведены в приложении Б. Значения, полученные при проведе-нии этих испытаний, не применимы кдиапазонам концентраций и лробам.огличающимсяотолисанныхв настоящем стандарте.

11.2    Повторяемость (сходимость)

Абсолютное расхождение между результатами двух отдельных независимых испытаний, полу* ченными одним и тем же методом на одной лабораторной пробе в одной и той же лаборатории одним и тем же оператором на одном и том же экземпляре оборудования в течение короткого промежутка времени. не должно превышать предел повторяемости г. приведенный в таблице 1. более чем в5%случаев.

Таблице 1 — Предел повторяемости г и предел воспроизводимости R

В ииппиврзиивх не грамм

Наименование анализируемой пробы

Трилсинингибирующая

активность

Предан повторяемости г

Предел воспроизводимости Я

Соя 1

1.53

0.16

1.11

Соя 2

1.30

0.09

2.11

Обжаренная соя

2.08

1.03

1.88

11.3 Воспроизводимость

Абсолютное расхождение между результатами двух отдельных испытаний, полученными одним и тем же методом на идентичных пробах в разных лабораториях разными операторами на различных экземплярах оборудования, не должно превышать предел воспроизводимости я. приведенный в таблице 1. более чем в 5 % случаев.

12 Протокол испытания

Протокол испытания должен включать в себя следующее:

а)    всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;

б)    используемый методотбора проб, если известен:

е) используемый метод испытания со ссылкой на настоящий стандарт;

г)    все обстоятельства, не указанные в настоящем стандарте ил и рассматриваемые как необязательные, которые могли повлиять на результат(ы) испытания;

д)    лолученный(е) результат(ы) испытания, среднеарифметическое значение двух испытаний, если проверена повторяемость.

Схема разведения экстракта пробы

В таблице А. 1 приведены схемы разведений экстракте пробы. На рисунках А.1 и А.2 показаны примеры графического представлений схемы разведения.

Таблица А.1 — Схема разведений экстракта пробы

Првдполагмыая ТИА. мг/т

Теоретические раэеедеиия экстракта, сагV100 саг3. при процентном содержании ингибитора

трипсина

40%

50%

во %

0.5

61

76

91

1.0

30

38

45

1.5

20

25

30

2.0

15

19

23

2.5

12

15

18

3.0

10

13

15

3.5

8.6

11

13

4.0

7.6

9.5

11

4.S

6.7

8.4

10

5.0

6.0

7.6

9.1

6

5.0

6.3

7.6

7

4.3

5.4

6.5

8

3.6

4.7

5.7

9

3.4

4.2

S.0

10

3.0

3.8

4.5

11

2.7

3.4

4.1

12

2.5

3.2

3.8

13

2.3

2.9

3.5

14

2.2

2.7

3.2

15

2.0

2.5

3.0

16

1.9

2.4

2.8

17

1.6

2.2

2.7

16

1.7

2.1

2.5

19

1.6

2.0

2.4

20

1.5

1.9

2.3

25

1.2

1.5

1.8

Творвп?»ся» решай ввгфобцш^ООш*

Рисунок А.1 — Соотношение между трипсинингибирующей активностью и теоретическим разбавлением пробы

7ИА,И*


Рисунок А.2 — Фрагмент рисунка А.1


Результаты межлабораторных испытаний

Прецизионность методе была установлена в 1998 г в результате межлабораторных испытаний, выполненных а соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1 и ГОСТ ИСО 5725-2 для определения воспроизводимости. Для определения пределе повторяемости, семь лабораторий проводили испытания пробы сои в двух повторностях. Для определения пределе воспроизводимости, испытания двух проб сои и одного образце обжаренной сои были проведены семью лабораториями.

Статистические результаты иежлабораторных испытаний приведены в таблице 6.1.

Таблица 6.1 — Статистические результаты межлабораторных испытаний

Наименование показателя

Значение показателя для проб*

1

2

3

Количество лабораторий

7

7

7

Количество лабораторий после уделения выбросов

7

7

7

Среднее значение активности ингибитора трипсина, мг/г

1.30

1.53

1.88

Стандартное отклонение повторяемости а„ мг/г

0.03

0.06

0.37

Коэффициент вариации повторяемости. %

2.31

4.18

1.03

Предел повторяемости г [г* 2.8 *а,). мг/г

0.09

0.18

1.03

Стандартное отклонение еослроизвомости $н. г/г

0.75

0.40

0.67

Коэффициент вариации воспроизводимости. %

57.7

25.9

35.7

Предел воспроизводимости Я (Я « 2.8 * $*). мг/г

2.11

1.11

1.88

* Пробы 1 и 2: соя: проба 3: обжаренная соя.

Сравнение структуры международного стандарта со структурой межгосударственного стандарта

Таблица ДА. 1

Структура международного стандарта

Структура межгосударственного стандарта

Подраздел

Пункт

Подраздел

Пункт

Раздел 5

Раздел 5

5.1

5.1

5.1.1

5.2

5.1.2

5.3

5.1.3

5.4

5.1.4

5.5

5.1.5

5.6

5.1.6

5.6

5.1.7

5.7

5.1.6

5.8

5.1.9

5.9

5.2

5.2.1

5.10

5.2.2

5.11

5.2.3

5.12

5.2.4

5.13

5.2.5

5.14

5.2.6

5.15

5.2.7

5.16

5.2.6

5.17

5.2.9

5.2.10

5.2.11

Раздел 6

Раздел 6

6.1

6.1

6.2

6.2

6.3

6.3

6.4

6.4

6.5

6.5

6.6

6.6

6.6

6.6

6.7

6.7

6.8

6.6

6.9

6.9

6.10

6.10

6.11

6.11

6.12

Окончание твбпииы ДА.1

Структура международного стандарта

Структура межгосударственного стандарта

Подраздел

Пункт

Подраздел

Пункт

6.13

Раздеп 6

Раздел 6

Раздел 7

Раздел 7

Раздел 8

Раздел 8

Раздел 9

Раздел 9

Раздел 10

Раздел 10

Раздел 11

Раздел 11

Раздеп 12

Раздел 12

Приложение

А

Приложение

А

В

Б

ДА

Библиография

Библиография

Примечания

1    Сравнение структур стандартов приведено, начиная с раздела 5. так как предыдущие разделы стандартов и их иные структурные элементы (за исключением предисловия,) идентичны.

2    Раздел 5 разделен на подразделы 5.1 «Реактивы• и 5.2 я Приготовление растворов».

3    В раздел 6 настоящего стандарте введены подразделы с неуказанным в международном стандарте оборудованием.

4    В соответствии с ГОСТ 1.5—2001 иГОСТ 1.3— 2014 в настоящий стандарт дополнен приложением ДА кСравнение структуры международного стандарта со структурой межгосударственного стандарта».

Библиография

[1]    Kakade М. L.. Simona N.. Llener I. E. An Evaluation ot Natural va. synthetic Substrates for Measunng the Antiuyptic Activity of Soybean Samplea. Cereal Chem.. 46.1969. pp. S18—526

(2)    Smith C.. Van Megen W.. Twaalfhoven L.. Hitchcock C. The Determination of Trypsin Inhibitor Levels in Foodstuffs. J. Set. FooaAgric., 31,1980. pp. 341—350

УДК 636.085.3:006.354    МКС 65.120    MOD

Ключевые слова: корма, соя. трипсин, ингибитор, активность, спектрофотометр, метод. бенэоил-L-ap* гинин-р*нитроанилид. экстракция

Редактор Н.Н. Мигумова Технический редактор 8.Н. Прусакова Корректор в.И. Варемц&ва Компьютерная верстка Д.Н. Золотаревой

Сдано а набор 02.12.2015. Подписано в печать 08.02.2015. Формат 60.84Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 1.86. Уч.-иад.л. 1.45. Тираж 41 экз. Зак. 43SS.

Издано и отпечатано во ФГУП «СТАМДАРТИНФОРМ». 123895 Москва, Гранатный пер.. 4.