База ГОСТовallgosts.ru » 65. СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО » 65.120. Корма для животных


ГОСТ 13496.19-93 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания нитратов и нитритов

Обозначение: ГОСТ 13496.19-93
Наименование: Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания нитратов и нитритов
Статус: Действует

Дата введения: 01/01/1995
Дата отмены:
Заменен на: ГОСТ 13496.19-2015
Код ОКС: 65.120
Скачать PDF: ГОСТ 13496.19-93 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания нитратов и нитритов.pdf
Скачать Word:ГОСТ 13496.19-93 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания нитратов и нитритов.doc


Текст ГОСТ 13496.19-93 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания нитратов и нитритов



ГОСТ 13496.19-93

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения содержания нитратов

и нитритов

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2011

Предисловие

1    РАЗРАБОТАН Госстандартом России

ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации

2    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.

За принятие проголосовали:

Наименование государства

Наименование национального органа по стандартизации

Киргизская Республика

Киргизстандарт

Республика Молдова

Молдовастандарт

Российская Федерация

Госстандарт России

Республика Таджикистан

Т аджикгосстандарт

Туркменистан

Главная государственная инспекция Туркменистана

Украина

Госстандарт Украины

3    Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 02.06.94 № 160 межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.19—93 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 01.01.95

4    ВЗАМЕН ГОСТ 13496.19-86

5    ПЕРЕИЗДАНИЕ. Март 2011 г.

© Издательство стандартов, 1993 © СТАНДАРТИНФОРМ, 2011

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

УДК 636.085.3:006.354

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

Группа С19

СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения содержания нитратов и нитритов

Fodder, mixed fodder and animal feed raw stuff.

Methods of nitrate and nitrite determination

ГОСТ

13496.19-93

МКС 65.120 ОКСТУ 9209

Дата введения 1995—01—01

Настоящий стандарт распространяется на корма, комбикорма, комбикормовое сырье и устанавливает ионометрический метод определения содержания нитратов и фотометрические методы определения содержания нитратов и нитритов.

1    Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0, ГОСТ 27262.

2    Ионометрический метод определения содержания нитратов

Сущность метода заключается в извлечении нитратов раствором алюмокалиевых квасцов и последующем измерении концентрации нитратов с помощью ионоселективного электрода.

2.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Измельчитель проб растений марки ИПР-2 или соломорезка марки ИСР-1 или аналогичных марок.

Мельница лабораторная марки МРП-2 или аналогичных марок.

Ножницы.

Сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Сушилка проб кормов СК-1 или шкаф сушильный лабораторный с погрешностью поддержания температуры не более 5 °С (или сушилка и шкаф аналогичных марок).

Мезгообразователь МЛ-1 или аналогичных марок.

Соковыжималка.

Терка пластмассовая.

Мясорубка бытовая или электрическая, или механическая с диаметром отверстий 3 мм.

Весы лабораторные по ГОСТ 24104* 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и 3-го класса точности с пределом взвешивания 500 г или другие весы того же класса точности.

Иономер, pH-метр, милливольтметр, нитратомер или приборы с микропроцессорами, или другие аналогичные приборы с погрешностью измерения ЭДС не более 5 мВ.

Электрод ионоселективный нитратный с линейной функцией в диапазоне CNO =

= 10-1 — 10-4 (pCN0 = 1—4) с наклоном (56±3) мВ на единицу pCN0 .    3

з-    з-

Электрод вспомогательный хлорсеребряный или насыщенный каломельный с нестабильностью потенциала за 8 ч не более 0,5 мВ и скоростью истечения раствора через электролитический ключ 0,3—3,5 см3 в сутки при температуре (25±5) °С. Электрическое сопротивление электрода не более 2 • 104 Ом.

Баня водяная.

Мешалка лабораторная электромеханическая или магнитная.

Встряхиватель или ротатор.

Гомогенизатор, измельчители различного типа.

Колбы мерные вместимостью 50, 100, 1000 см3 по ГОСТ 1770.

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228—2008 (здесь и далее).

Издание официальное

Стаканы химические вместимостью 50, 500 и 1000 см3 по ГОСТ 25336.

Дозатор вместимостью 50 см3 с погрешностью дозирования не более 0,5 см3 или мерный цилиндр вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770.

Пипетки градуированные 1(2,4,5,6)—2—(2,5,10).

Квасцы алюмокалиевые по ГОСТ 4329, ч. д. а.

Калий хлористый по ГОСТ 4234, х. ч.

Калий азотнокислый по ГОСТ 4217, х. ч.

Кислота серная по ГОСТ 4204, ч. д. а.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, х. ч.

Перекись водорода водный раствор с массовой концентрацией 33 % по ГОСТ 10929, х. ч., ч. д. а.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага масштабная координатная Д2 по ГОСТ 334.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду и другие средства измерений, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

2.2    Подготовка к испытанию

2.2.1    Подготовка проб

2.2.1    Л Среднюю пробу сена, силоса, сенажа, зеленых кормов и т. и. измельчают на измельчителе проб растений, соломорезке или ножницами на отрезки длиной 1—3 см. Методом квартования выделяют часть пробы, масса которой после высушивания должна быть не менее 50 г. Высушивание проб проводят до воздушно-сухого состояния при температуре 60—65 °С. Воздушно-сухую пробу размалывают на лабораторной мельнице и просеивают через сито. Остаток на сите измельчают ножницами и добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

При анализе проб зеленых кормов, силоса и сенажа в натуральном виде выделенную часть измельченной средней пробы используют непосредственно для анализа или после размалывания на мельнице в течение 2—4 мин.

2.2.1.2    Из средней пробы комбикормов или комбикормового сырья методом квартования выделяют около 50 г материала, размалывают без предварительного подсушивания и просеивают через сито. Остаток на сите с массовой долей не более 4 % измельчают ножницами, добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

2.2.1.3    Пробы корнеклубнеплодов анализируют в свежем виде. Корнеклубнеплоды предварительно моют водой, вытирают чистой тканью или фильтровальной бумагой и выделяют часть средней пробы. Для этого корнеплод разрезают вдоль оси крестообразно на четыре равные части и отбирают одну четвертую часть. Выделенную часть средней пробы измельчают, используя терку, мезгообразователь или мясорубку и тщательно перемешивают.

2.2.1.4    Пробы жидких кормов анализируют без предварительной подготовки.

2.2.1.5    При анализе проб кормов с высоким содержанием влаги и легкоотдающим сок возможно использование сока для анализа. В этом случае отобранную и измельченную часть средней пробы пропускают через соковыжималку. Полученный сок собирают в одну емкость и перемешивают. Если результат, полученный при анализе сока, превышает ПДК, то анализ повторяют с использованием навески.

2.2.2    Приготовление раствора алюмокалиевых квасцов с массовой долей 1 % (экстрагирующий раствор)

10 г алюмокалиевых квасцов взвешивают с погрешностью не более 0,1 г, переносят в химический стакан вместимостью 1000 см3 и растворяют в 990 см3 дистиллированной воды.

Раствор хранят в склянке с притертой пробкой не более 1 года. При появлении мути или осадка раствор заменяют свежеприготовленным.

2.2.3    Приготовление экстрагирующего раствора для определения нитратов в культурах семейства капустных

10 г алюмокалиевых квасцов переносят в химический стакан вместимостью 1000 см3, растворяют в 990 см3 дистиллированной воды. Затем (1,0±0,001) г марганцовокислого калия помещают в ту же колбу и добавляют 0,6 см3 концентрированной серной кислоты. Полученную смесь взбалтывают до растворения всех градиентов, доводят раствор до метки дистиллированной водой и хранят в склянке с притертой пробкой.

2.2.4    Приготовление основного раствора азотнокислого калия концентрации с (KNO3/ = = 0,1 молъ/дм3 (pCN0 = — log CN0 = 1)

3    3

10,11 г азотнокислого калия, высушенного при температуре 100—105 °С до постоянной массы, взвешивают с погрешностью не более 0,001 г, растворяют в экстрагирующем растворе в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доводят объем раствора до метки тем же раствором.

Раствор хранят в склянке с притертой пробкой не более 1 года. При появлении мути или осадка раствор заменяют свежеприготовленным.

2.2.5    Приготовление растворов сравнения

Растворы сравнения готовят из основного раствора азотнокислого калия (и. 2.2.4) в день проведения анализа, используя для разбавления раствор алюмокалиевых квасцов.

2.2.5.1    Раствор сравнения концентрации с (N03_) = 0,01 моль/дм3 (pCNO =-logCNO =2) готовят следующим образом: основной раствор азотнокислого калия разбавляют в 10 раз раствором алюмокалиевых квасцов с массовой долей 1 %. Для этого в мерную колбу вместимостью 100 см3 отбирают пипеткой 10 см3 основного раствора концентрации с (KN03) = 0,1 моль/дм3 и доводят до метки раствором алюмокалиевых квасцов и перемешивают.

2.2.5.2    Раствор сравнения концентрации с (N03-) = 0,001 моль/дм3 (pCNO готовят по п. 2.2.5.1 и разбавляют в 10 раз раствором алюмокалиевых квасцов.

2.2.5.3    Раствор сравнения концентрации с (N03-) = 0,0001 моль/дм3 (pCNO готовят по п. 2.2.5.2 и разбавляют в 10 раз раствором алюмокалиевых квасцов.

Полученные растворы сравнения используют для градуировки иономеров, проверки электродов и построения градуировочного графика. Активность иона нитрата в растворе сравнения указанной концентрации азотнокислого калия соответственно равна 2, 3, 4.

2.2.6    Подготовка электродов к работе

2.2.6.1    Подготовка нитратного и о н о с е л е к т и в н о г о электрода и вспомогательного электрода к работе

Мембранный ионоселективный нитратный электрод и вспомогательный электрод сравнения готовят к работе в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к ним.

В промежутках между исследованиями мембранный нитратный электрод погружают в раствор концентрации с (N03-) = 0,0001 моль/дм3 (pCN0 _ = 4), если перерывы в работе составляют сутки и более, его хранят в растворе азотнокислого калия концентрации с (N03-) = 0,001 моль/дм3. При длительных перерывах между исследованиями (более 5 дней) электрод хранят на воздухе, а перед началом работы вымачивают 1—2 ч в растворе азотнокислого калия концентрации с (N03-) = 0,1 моль/дм3. В обоих случаях перед началом измерений электрод промывают водой не менее трех раз.

Вспомогательный электрод сравнения в перерывах между исследованиями погружают в стакан с дистиллированной водой.

2.2.6.2    Проверка правильности работы электродной пары

Проверку правильности работы электродной пары следует начать с подбора нитратного ионосе-

лекгивного электрода, который обеспечивает линейность характеристики электрода в диапазоне pCNo _ = 1—4, с наклоном (56+3) мВ. Проверку правильности работы электродной пары (нитратного ионоселективного электрода в паре со вспомогательным электродом) можно проводить с помощью стандартного образца корма, аттестованного на содержание нитратов. Допустимое отклонение полученного результата от аттестованного значения рассчитывают по 3.4.4. В случае превышения допустимого отклонения от аттестованного значения необходимо подбирать другие пары электродов.

2.3    Проведение испытания

2.3.1    Приготовление экстрактов

2.3.1.1    Приготовление экстрактов сухих проб

Масса анализируемой навески зависит от предполагаемого содержания нитратов. Навеска для проб кормов со сравнительно высоким содержанием нитратов (кормовые травы, силос, сенаж, жмыхи, шроты и премиксы) составляет 1 г, которую взвешивают с погрешностью не более 0,01 г; навеска для проб кормов со средним и низким содержанием нитратов (силос, сенаж, сено злаковых, комбикорма) — 5 г, которую взвешивают с погрешностью не более 0,01 г.

Навески помещают в технологические емкости вместимостью 100 или 200 см3, приливают 50 см3 раствора алюмокалиевых квасцов, приготовленных по 2.2.2, закрывают пробкой или крыш

— — log С no — 3)

3

= -logCN0^_ =4)

кой и перемешивают 3 мин с помощью электромеханической мешалки или ротатора. В полученной суспензии измеряют концентрацию нитрат-ионов.

Для жмыхов и шротов возможно взятие навески 5 г, но при этом необходимо дополнительное разбавление в 5 раз раствором алюмокалиевых квасцов по 2.2.2 или измерение с помощью ионоселективного электрода, на мембрану которого надевается гидратцеллюлозная пленка (такие электроды с пленкой прилагаются к прибору «Микон» = Мин-100).

При анализе комбикормов с использованием нитратомеров 5 г навески разбавляют 45 см3 алюмокалиевых квасцов.

2.3.1.2    Приготовление экстрактов свежих проб

Из предварительно измельченной на терке или мезгообразователе пробы корнеклубнеплодов берут навеску массой 10 г, взвешенную с погрешностью не более ОД г. Навеску помещают в технологическую емкость вместимостью 100 или 200 см3, приливают 50 см3 раствора алюмокалиевых квасцов и перемешивают с помощью мешалки в течение 3 мин. Перемешивание можно заменить гомогенизацией в течение 1 мин.

Из предварительно измельченной ножницами пробы травянистых кормов берут навеску массой 10 г, взвешенную с погрешностью не более 0,1 г. Навеску помещают в стакан гомогенизатора, приливают 50 см3 раствора алюмокалиевых квасцов и гомогенизируют в течение 1—2 мин. При отсутствии гомогенизатора возможно измельченную массу с экстрагирующим раствором нагревать в кипящей водяной бане в течение 15 мин с последующим охлаждением и доведением до первоначального объема.

При анализе трав семейства капустных (рапс, редька, горчица, свербига и т. д.) или кормов, в которые одним из компонентов входят эти травы, (10+0,1) г измельченного материала помещают в технологическую емкость вместимостью 100—200 см3, добавляют 50 см3 экстрагирующего раствора, приготовленного по 2.2.3, перемешивают с помощью мешалки в течение 3 мин. Затем при помешивании добавляют по каплям (1,0—0,5 см3) 33 %-ного раствора перекиси водорода до обесцвечивания раствора. В полученной суспензии измеряют концентрацию нитрат-ионов.

Для сочных кормов с целью ускорения и снижения трудоемкости анализа возможно использование сока для анализа. Пробу, подготовленную для анализа, пропускают через соковыжималку. Полученный сок собирают в одну емкость и перемешивают. При анализе всех культур, кроме семейства капустных, отбирают пипеткой 10 см3 сока с погрешностью не более 0,1 см3, помещают в технологическую емкость вместимостью 100—200 см3, прибавляют 50 см3 раствора алюмокалиевых квасцов (2.2.2), перемешивают и в полученном растворе измеряют концентрацию нитрат-ионов.

При анализе трав семейства капустных к (10+0,1) см3 сока, помещенного в технологическую емкость вместимостью 100—200 см3, добавляют 50 см3 раствора алюмокалиевых квасцов (по 2.2.3). Раствор перемешивают и измеряют концентрацию нитрат-ионов.

2.3.2    Концентрацию нитрат-ионов измеряют непосредственно в логарифмических единицах pCNo _ (pCNO _ =- logCNO ) по шкале иономера, предварительно отградуированного по растворам сравнения3, или в милливольтах с последующим определением значения единиц pCN0 по градуировочному графику, построенному по результатам измерения ЭДС электродной пары ^ растворах сравнения, или на приборах, имеющих преобразователи значений концентрации нитрат-ионов в растворе в значения их концентрации в исследуемой продукции.

Перед измерениями и после градуировки прибора электроды тщательно ополаскивают дистиллированной водой, промокают фильтровальной бумагой и погружают в испытуемые пробы. Показания прибора считают не менее чем через 1 мин после прекращения заметного дрейфа показаний прибора. При переходе от одной пробы к другой электроды ополаскивают дистиллированной водой и промокают фильтровальной бумагой. Температура анализируемых проб и растворов сравнения должна быть одинаковой. Настройку прибора проверяют по растворам сравнения не менее трех раз в течение рабочего дня, используя каждый раз свежие порции раствора сравнения. Перед каждой проверкой настройки иономера нитратный ионоселективный электрод выдерживают в растворе сравнения концентрации с (N03_) = 0,0001 моль/дм3 в течение 3—4 мин.

2.3.2.1 При непосредственном измерении концентрации нитрат-ионов в единицах pCNO прибор ежедневно настраивают в режиме «рХ» по растворам сравнения концентрации с (N03_) = = 0,0001 моль/дм3 (pCNO _ = 4) и с (N03_) = 0,01 моль/дм3 (pCNO =2), используя раствор с (N03_) = 0,001 моль/дмз3для контроля. Отклонения значений pCNO 3от номинального значения не должны превышать 0,02 единицы pCN0 _ *    3

Массовую долю нитрат-ионов определяют по значениям pCNO растворов сравнения с помощью вспомогательных таблиц (см. приложение 1, таблицы 2—8). 3

2.3.2.2    При измерении концентрации нитрат-ионов в режиме «мВ» определение проводят, используя калибровочный график и снимая показания ЭДС в милливольтах.

Содержание нитратов в пробах находят, используя калибровочный график, построенный на миллиметровой бумаге. По оси абсцисс откладывают значения pCNO , соответствующие растворам сравнения азотнокислого калия в молях:    3

концентрации с (N03_) = 0,1 моль/дм3 (pCNO _ = 1);

с (N03_) = 0,01 моль/дм3 (pCNQ _ = 2); с (N03-) = 0,001 моль/дм3 (pCNQ = 3); с (N03-) = 0,0001 моль/дм3 (pCNo _ = 4),

по оси ординат — ЭДС, милливольт. По калибровочному графику находят значения pCNO и с помощью формул (3.4.1) или таблицы 2—8 приложение 1 определяют содержание нитрат-ионов (миллиграмм на килограмм) в исследуемом объекте.

2.3.2.3    При работе с приборами, имеющими преобразователи значения pCNO или моль/дм3

о    ^    з-

в значения концентрации нитрат-ионов в исследуемой продукции, настройку проводят непосредственно в единицах массовой доли нитрата в миллионных долях (мг/кг) по раствору известной концентрации с учетом разведения.

Примечания

1    При анализе кормов с очень низким содержанием нитратов необходимо дополнительно для построения калибровочного графика готовить раствор сравнения концентрации с (Т40з) = 0,00001 моль/дм(рСмо = 5), при этом градуировочная кривая может отклоняться от прямой на 30—60°.

3“

2    При определении нитратов в комбикормах с добавками соли (хлористого натрия) следует в растворы сравнения ввести соответствующее количество хлористого натрия. При добавке соли в комбикорма в количестве 1 % берут 1 г; 0,5 % — 0,5 г; 0,2 % — 0,2 г хлористого натрия. Навеску хлористого натрия помещают в мерную колбу вместимостью 1 дм3, добавляют 10 г алюмокалиевых квасцов и растворяют в дистиллированной воде, доводя раствор до метки.

Эти растворы используют вместо экстрагирующего при приготовлении растворов сравнения азотнокислого калия (2.2.5) для построения калибровочного графика.

2.4 Обработка результатов

2.4.1 При анализе проб, высушенных до воздушно-сухого состояния, массовую долю нитратов в испытуемом материале в миллионных долях (X), млн-1 (мг/кг), вычисляют по формуле

PCNO    ,

Г-10    3 -62-106

1000 - т

где V— объем экстрагирующего раствора, см3;

Ю pcno3_— (—) log концентрации нитрата в вытяжке, моль/дм3;

62 — молярная масса иона ]ЧГОз, г;

106 — коэффициент перевода долей единицы в миллионные доли;

1000 — коэффициент перевода дм3 в см3;

т — масса пробы, используемая для анализа, г.

При разбавлении вытяжки результат анализа увеличивают во столько, во сколько раз была разбавлена вытяжка.

2.4.2 При анализе проб с естественной влажностью массовую долю нитратов в испытуемом материале в миллионных долях (X), млн-1 (мг/кг), вычисляют по формуле

V +

V

W - т

100*1,

•10

PcNO

3"

1000 • т

• 62 • 10 6

где W— массовая доля воды в пробе, %;

100 — коэффициент перевода процента в доли единиц; 1 — плотность воды, г/см3.

2.4.3    Расчеты по приведенным уравнениям можно исключить, используя табл. 2—8 приложения 1 для перевода значений pCNO в массовую долю нитрата в анализируемой пробе. Данные таб-лиц (4—8) приложения 1 составлены с учетом массовой доли влаги в различных кормах.

2.4.4    За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений. Результаты вычисляют до первого десятичного знака и округляют до целого числа.

Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений (d) и между двумя результатами, полученными в разных условиях (О), мг/кг, при доверительной вероятности Р = 0,95 при анализе воздушно-сухих проб не должны превышать следующих значений:

d= 8,3 + 0,066?,

D = 4,3 + 0,21-?,

где X— среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений;

X — среднеарифметическое значение результатов двух определений, выполненных в разных условиях.

Предельную погрешность результата анализа (Д2), мг/кг, при односторонней доверительной вероятности Р = 0,95 вычисляют по формуле

ДЕ = 2,60 + 0,13?.

Предельную погрешность результата анализа используют при оценке качества кормов.

Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии исследуемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае (при обязательном проведении выборочного статистического контроля сходимости параллельных определений) за результат испытания принимают результат единичного определения, если разница между воспроизведенной и аттестованной в СО массовой долей нитратов (О), мг/кг, не превышает следующего значения

Ъ = 3,11+0,152Га,

где Ха — аттестованное значение содержания нитратов в СО, взятое из свидетельства.

Контрольные анализы образцов исследуемой партии и анализы СО проводят в двух параллельных определениях в соответствии с утвержденной нормативно-технической документацией.

При анализе свежих проб d = 13,8 + 0,08 X; D = 0,354 X.

3 Фотометрический метод определения нитритов и нитратов после восстановления кадмием

Сущность метода заключается в извлечении нитратов и нитритов раствором хлористого кадмия и бария, осветлении экстракта в щелочной среде и фотометрическом определении нитритов в виде окрашенного соединения, образующегося при их взаимодействии с сульфаниламидом и N-1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлоридом. Сумму нитратов и нитритов определяют после восстановления нитратов до нитритов на кадмиевой колонке. Содержание нитратов получают путем вычитания из суммы нитратов и нитритов содержание нитритов в продукте.

Кадмий и его соли ядовиты, все процедуры с их использованием должны проводиться в вытяжном шкафу.

3.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные 2-го класса точности с пределом взвешивания 200 г и 3-го и 4-го классов точности с пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104.

Г омогенизатор.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр.

pH метр.

Колбы мерные вместимостью 100, 500 и 1000 см3 по ГОСТ 1770.

Цилиндры мерные вместимостью 25, 100, 500 см3 по ГОСТ 1770.

Пипетки градуированные вместимостью 5, 10 см3.

Колонка редуцирующая (см. рисунок 1).

Стаканы химические вместимостью 250 см3 по ГОСТ 1770.

Колбы конические с широким горлом вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336.

Воронки стеклянные диаметром 36—56 мм по ГОСТ 25336.

Пробки стеклянные или резиновые.

Микробюретка вместимостью 2 и 10 см3.

Палочка стеклянная с тефлоновой или такой же по качеству другой пластмассовой трубкой на конце.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х. ч.

Кадмий сернокислый по ГОСТ 4456, х. ч.

Кадмий хлористый по ГОСТ 4330, х. ч.

Медь сернокислая по ГОСТ 4165, х. ч.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773, х. ч.

Барий хлористый по ГОСТ 4108, х. ч.

Аммония гидроокись по ГОСТ 3760, х. ч.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х. ч.

Соль динатриевая этилендиамин-N', N', N', N'-тетрауксусной кислоты по ГОСТ 10652, х. ч.

Сульфаниламид (белый стрептоцид, не растворимый в воде).

N-1 -нафтилэтилендиамин-дигидрохлорид, ч.

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, х. ч.

Калий азотнокислый по ГОСТ 4217, х. ч.

Цинк В форме палочек ДЛИНОЙ ОКОЛО 150 мм И диаметром 2 — колонка с кадмием; 3 стекло-5-7 ММ.    вата; 4 — кран

Вата стеклянная.    Рисунок 1

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

3.2. Подготовка к испытанию

3.2.1    Подготовка проб к испытанию — по п. 2.2.

3.2.2    Приготовление экстрагирующего раствора

50 г кадмия хлористого и 50 г бария хлористого растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 в дистиллированной воде и доливают водой до метки. Устанавливают рН-1 соляной кислотой.

3.2.3    Приготовление буферного раствора с pH 9,6—9,7

50 г аммония хлористого растворяют в 500 см3 дистиллированной воды. Устанавливают pH раствора гидроокисью аммония и объем раствора доводят до 1000 см3 дистиллированной водой.

3.2.4    Приготовление раствора гидроокиси натрия концентрации 2,5 моль/дм3

100 г гидроокиси натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 в дистиллированной воде и доливают до метки водой.

3.2.5    Приготовление раствора соляной кислоты с (ПС1) = 2 моль/дм3 и с (НС1) = 0,1 моль/дм3

172 см3 концентрированной соляной кислоты разбавляют дистиллированной водой до 1000 см3.

8.6    см3 концентрированной соляной кислоты разбавляют дистиллированной водой до 1000 см3.

3.2.6    Приготовление раствора динатриевой соли этилендиамин-N', N', Nr, N' — тетрауксусной кислоты (трилона Б)

33,5 г трилона Б растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1000 сми доливают водой до метки.

3.2.7    Приготовление раствора сульфаниламида

1,25 г сульфаниламида растворяют в 250 см3 соляной кислоты, разбавленной дистиллированной водой 1:1. Раствор устойчив в течение 1—2 мес.

3.2.8    Приготовление раствора N-1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлорида

0,1 г N-1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлорида растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 100 см3 и доливают до метки водой. Раствор хранят в плотно закрывающейся склянке из темного стекла в холодильнике. Устойчив в течение 1—2 недель.

3.2.9    Приготовление раствора азотистокислого натрия

0,15 г азотистокислого натрия, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 110—120 °С, растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доводят до метки водой.

1 — резервуар вместимостью 50 см3;

Получают основной раствор. Для приготовления рабочего раствора, содержащего 1 мкг N02 в 1 см3, к 10 см3 основного раствора добавляют 20 см3 буферного раствора, приготовленного по 3.2.3, и доводят объем раствора в мерной колбе вместимостью 1000 см3 водой до метки.

3.2.10    Приготовление раствора азотнокислого калия

0,734 г азотнокислого калия, предварительно высушенного при температуре 110—120 °С до постоянной массы, растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 500 см3 и доводят до метки водой. Получают основной раствор. Для приготовления рабочего раствора к 5 см3 основного раствора добавляют 20 см3 буферного раствора, приготовленного по п. 3.2.3, и доводят объем водой до метки в мерной колбе вместимостью 1000 см3. Раствор содержит 4,5 мкг N03_ в 1 см3.

3.2.11    Приготовление раствора сернокислого кадмия массовой концентрации 20 %

200 г сернокислого кадмия растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доливают до метки водой.

3.2.12    Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 100 см3 приливают из пипетки (или бюретки) 0; 2; 12; 20; 30; 40 см3 рабочего раствора азотистокислого натрия, доводят объем до 60 см3 водой. Окрашивают и измеряют оптическую плотность окрашенных растворов, как указано в 3.3.3. По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс значения массовой концентрации нитритов в микрограммах 100 см3 фотометрируемого раствора, а на оси ординат — соответствующие им значения оптической плотности.

3.2.13    Приготовление кадмиевой колонки

3.2.13.1    Приготовление гранулированного кадмия диаметром гранул 0,3—0,8 мм

В химический стакан вместимостью 250 см3 наливают 200 см3 20 %-ного раствора сернокислого кадмия, опускают в него палочки цинка и выдерживают в течение 24 ч, периодически снимая выделяющую кадмиевую губку стеклянной палочкой с тефлоновой трубкой. После того, как выделение кадмия прекратится, вынимают палочки и сливают жидкость с кадмиевой губки настолько, чтобы она лишь покрывала кадмий. Кадмий в стакане два-три раза промывают декантацией дистиллированной водой, затем переносят при помощи 400 см3 раствора соляной кислоты с (НС1) = = 0,1 моль/дм3 в гомогенизатор и измельчают в течение 10 с. После этого снова переносят в химический стакан и оставляют на несколько часов, периодически перемешивая стеклянной палочкой, чтобы удалить пузырьки воздуха. Затем кадмий переносят в коническую колбу вместимостью 250 см3, жидкость декантируют и добавляют такое количество раствора соляной кислоты с (НС1) = = 2 моль/дм3, чтобы она покрыла гранулят, круговым движением несколько раз поворачивают колбу, дают кадмию осесть и промывают его дистиллированной водой до исчезновения следов хлорида. Добавляют раствор сернокислой меди из расчета 2,5 см3 на 1 г кадмия, вращая колбу в течение 1 мин кругообразным движением. Затем сливают раствор и немедленно начинают промывание кадмия декантацией дистиллированной водой. Промывание повторяют, следя за тем, чтобы кадмий все время был покрыт водой.

3.2.13.2    Приготовление кадмиевой колонки

На дно редуцирующей колонки помещают стеклянную вату слоем около 2 см, заполняют ее водой и затем переносят кадмий, следя за тем, чтобы он как можно меньше соприкасался с воздухом. Высота заряда должна достигать 15—20 см. Необходимо следить за тем, чтобы в слое стеклянной ваты и между частицами кадмия не оставались пузырьки воздуха и столбик кадмия был постоянно покрыт жидкостью.

Через свежезаправленный кадмиевый столбик пропускают смесь, состоящую из 750 см3 дистиллированной воды, 225 см3 рабочего раствора азотнокислого калия, 20 см3 буферного раствора и 20 см3 раствора трилона Б со скоростью 6 см3/мин, после чего промывают водой до полного удаления нитритов.

3.2.13.3    Проверка редуцирующей способности кадмиевой колонки

Редуцирующую способность колонки проверяют до и после проведения серии анализов. Для

этого в приемник колонки вводят 20 см3 рабочего раствора азотнокислого калия и добавляют 5 см3 буферного раствора. Скорость прохождения раствора через столбик должна быть 6 см3/мин. Элюат собирают в мерную колбу вместимостью 100 см3. Как только приемник опорожнится, дважды смывают стенки 15 см3 дистиллированной воды и наполняют его водой.

Элюат в мерной колбе вместимостью 100 см3 доливают до метки водой и взбалтывают.

Отбирают 20 см3 элюата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доливают до 60 см3 водой, окрашивают и измеряют оптическую плотность, как указано в 3.3.3.

По градуировочному графику находят массовую концентрацию нитритов в разбавленном элю-ате и определяют редуцирующую способность колонки. Если она ниже 90 %, колонку следует регенерировать.

3.2.13.4 Регенерирующие колонки

5 см3 раствора трилона Б и 2 см3 раствора с (НС1) = 0,1 моль/дм3 разбавляют водой до 100 см3 и пропускают через колонку, затем промывают колонку водой.

3.3 Проведение испытания

3.3.1    Приготовление экстрактов

3.3.1    Л Навеску сухих проб массой 1—2 г, взвешенную с погрешностью не более 0,001 г, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют 40 см3 экстрагирующего раствора, 40 смводы, взбалтывают и оставляют на 1 ч, периодически перемешивая. При использовании ротатора или электромеханической мешалки достаточно перемешивание в течение 3—5 мин.

К суспензии пробы добавляют 8 см3 раствора с (NaOH) = 2,5 моль/дм3, доливают до метки водой и немедленно фильтруют через быстрофильтрующую бумагу.

3.3.1.2    Из предварительно измельченной на терке или мезгообразователе пробы корнеклубнеплодов берут навеску массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,01 г, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и обрабатывают, как указано в 3.3.1.1.

Из предварительно измельченной ножницами пробы травянистых кормов берут навеску массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,01 г, измельчают на гомогенизаторе. При отсутствии гомогенизатора навеску пробы с экстрагирующим раствором помещают на кипящую водяную баню на 15 мин и далее обрабатывают, как указано в 3.3.1.1.

3.3.2    Восстановление нитрата в нитрит

Перед началом работы и после каждого анализа кадмиевую колонку промывают 25 см3 с (НС1) = 0,1 моль/дм3, затем 50 см3 дистиллированной воды и 25 см3 буферного раствора, разбавленного водой 1:9 и 50 см3 воды. Для восстановления нитратов в нитриты переносят в приемник колонки 25 см3 фильтрата и одновременно 5 см3 буферного раствора и пропускают через колонку со скоростью 6 см3/мин. Необходимо обеспечить воспроизводимость скорости протекания жидкости через колонку. Скорость должна быть постоянной (±0,1 см3) для образцов и стандартных растворов. Элюат собирают в мерную колбу вместимостью 100 см3. Для каждой серии определений проводят контрольный опыт, применяя вместо фильтрата раствор, при приготовлении которого использованы все реактивы в применяемой концентрации, но без испытуемой пробы.

Когда приемник колонки почти опорожнится, дважды смывают его стенки круговым движением воды по 15 см3 и заливают его водой. Когда соберется около 100 см3 элюата, колбу удаляют из-под колонки, доливают до метки водой и взбалтывают.

3.3.3    Окрашивание растворов и измерение оптической плотности окрашенных растворов

В зависимости от ожидаемого содержания нитритов и нитратов переносят от 1 до 60 см3 фильтрата или элюата в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем до 60 см3 водой. Затем в колбу вносят 10 см3 раствора сульфаниламида, тщательно перемешивают и оставляют стоять на 5 мин при комнатной температуре, защитив от прямого солнечного света. Добавляют 2 см3 раствора N-1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлорида, тщательно перемешивают и оставляют на 10—20 мин при комнатной температуре в темном месте. Доливают дистиллированной водой до метки, перемешивают и измеряют оптическую плотность по отношению к контрольному раствору в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см при длине волны, дающей максимальное поглощение на данном приборе (около 530 нм).

Примечание — Поскольку фильтрат испытуемого раствора не бывает абсолютно бесцветным, измеряют оптическую плотность фильтрата и элюата с эквивалентным разбавлением без добавления окрашивающих растворов и вносят поправку на полученное значение оптической плотности.

Допускается окрашивание растворов по методу, указанному в приложении 2, при анализе свежих проб.

3.4 Обработка результатов

3.4.1 Массовую долю нитритов в испытуемой пробе в миллионных долях (й/), млн-1 (мг/кг), вычисляют по формуле

Xi

т\ - У\

V2-m’

где m1 — масса N02“ в 100 см3 фотометрируемого раствора, найденная по градуировочному графи-

ку, мкг;

Vt — общий объем экстракта, см3;

V2 — объем экстракта, используемый для окрашивания, см3; т — масса пробы, г.

3.4.2 Массовую долю нитратов в испытуемой пробе в миллионных долях (ЙГ2), млн-1 (мг/кг), вычисляют по формуле

Х2 = 1,3478

Ч -Vl-V4

Km-V2-V5

\

-^1 ,

J

где т2 — масса N02 в 100 см3 фотометрируемого раствора, найденная по градуировочному графику, мкг;

общий объем экстракта, см3;

объем элюата, используемый для окрашивания, см3; объем экстракта, используемый для восстановления на колонке, см3; объем элюата после восстановления, см3; масса пробы, г;

массовая доля нитритов в пробе, мг/кг;

1,3478 — коэффициент пересчета нитритов в нитраты.

3.4.3 За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений. Результаты вычисляют до первого десятичного знака и округляют до целого числа.

Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений и между двумя результатами, полученными в разных условиях, не должны превышать 10 и 30 % относительно среднеарифметического результата соответственно.

г-г-г-г-

т — *1-

4 Фотометрический метод определения содержания нитритов

Сущность метода заключается в извлечении нитритов раствором хлористого калия с (КС1) = = 1 моль/дм3 при соотношении пробы и экстрагента 1:50 для сухих и 1:10 для влажных проб и последующем фотометрическом определении нитритов в виде окрашенного соединения, образующегося при взаимодействии с сульфаниламидом и N-1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлоридом.

4.1 Аппаратура, реактивы и материалы

Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104. Фотоэлектроколориметр.

Центрифуги лабораторные марки ЦЛС-8 или ЦЛН-2.

Встряхиватель, ротатор.

Дозаторы (шприцы медицинские) вместимостью 1, 4 и 50 см3.

Цилиндры мерные вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770.

Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 см3 по ГОСТ 1770.

Колбы плоскодонные вместимостью 250 см3.

Пробирки вместимостью 20 см3 по ГОСТ 10515.

Пипетки вместимостью 10 см3.

Микропипетки.

Воронки стеклянные по ГОСТ 8613.

Калий хлористый по ГОСТ 4234, х. ч.

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, х. ч.

Цинк сернокислый по ГОСТ 4174, ч. д. а.

Калий железистосинеродистый (желтая кровяная соль) по ГОСТ 4207, ч. д. а.

Свинец уксуснокислый по ГОСТ 1027, х. ч.

Уголь активный, осветляющий марки ОУ-Б по ГОСТ 4453.

Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, х.

М-этил-1-нафтиламин гидрохлорид, ч., или

Нафтиламин-альфа по ГОСТ 8827, ч. д. а., или

N- 1-нафтилэтилендиамин-дигидрохлорид, ч.

Сульфаниламид (белый стрептоцид, не растворимый в воде).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

4.2 Подготовка к испытанию

4.2.1    Подготовка проб к испытанию — по 2.2.1.

4.2.2    Приготовление стандартного раствора азотистокислого натрия (основной раствор)

0,150 г азотистокислого натрия, высушенного до постоянной массы при температуре

100—105 °С, растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 дистиллированной водой и доводят объем раствора водой до метки. 1 см3 полученного раствора содержит 0,1 мг нитрита.

4.2.3    Построение калибровочного графика

Рабочий стандартный раствор (0,01 мг N02/см3), готовят десятикратным разбавлением основного стандартного раствора раствором хлористого калия с (КС1) =1,0 моль/дм3. Получают раствор, содержащий 10 мкг нитрита в 1 см3.

Для построения калибровочного графика готовят серию растворов сравнения из рабочего стандартного раствора. Для этого в мерные колбы вместимостью 100 см3 приливают из микропипетки объемы рабочего стандартного раствора, указанные в таблице 1.

Объемы растворов в каждой колбе доводят до метки раствором хлористого калия с (КС1) = = 1,0 моль/дм3 и перемешивают.

Затем из каждой колбы отбирают в пробирки по 4 см3 растворов сравнения, прибавляют по 1 см3 окрашивающего реактива, перемешивают и выдерживают 10 мин.

По истечении указанного времени измеряют оптическую плотность окрашенных растворов при зеленом светофильтре с длиной волны 520 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см.

По полученным данным строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс значения содержания нитритов, мг/кг, по оси ординат — соответствующие им показатели оптических плотностей.

Таблица 1

Номер колбы

Объем рабочего стандартного раствора, см3

Массовая доля нитритов, мг/кг

при соотношении пробы и экстрагента 1:50

при соотношении пробы и экстрагента 1:40 (для комбикормов)

при соотношении пробы и экстрагента 1:10

1

0

0

0

0

2

0,5

2,5

2

0,5

3

1

5

4

1

4

2

10

8

2

5

4

20

16

4

6

8

40

32

8

7

10

50

40

10

8

15

75

60

15

4.2.4    Приготовление раствора хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3

75 г хлористого калия взвешивают с погрешностью не более 0,01 г и растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 дистиллированной водой и доливают до метки водой. pH раствора доводят до 5,6—6,0, используя 10 %-ные растворы соляной кислоты или гидроокиси калия.

4.2.5    Приготовление раствора уксуснокислого свинца

100 г уксуснокислого свинца взвешивают с погрешностью не более 0,01 г и растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 дистиллированной водой и доливают до метки водой.

4.2.6    Приготовление раствора железистосинеродистого калия

150 г соли растворяют в 850 см3 дистиллированной воды.

4.2.7    Приготовление раствора сернокислого цинка

300 г соли растворяют в 700 см3 дистиллированной воды.

4.2.8 Приготовление окрашивающего раствора

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 250 см3 дистиллированной воды, прибавляют 100 см3 ортофосфорной кислоты, перемешивают, добавляют 5 г хорошо растертого порошка сульфаниламида, и 1 г N-этил-1 -нафтиламин гидрохлорида или альфанафтиламина, взбалтывают на встряхивателе до полного растворения и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят в посуде из темного стекла в холодильнике в течение не более 1 мес.

4.3    Проведение испытания

4.3.1    Приготовление экстракта

Навеску сухих проб растительных кормов массой 1 г взвешивают с погрешностью не более 0,01 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, приливают 49 см3 раствора хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3, 1 см3 раствора уксуснокислого свинца и добавляют 0,4 г угля, закрывают пробкой и взбалтывают на ротаторе в течение 3 мин. Затем суспензию фильтруют через плотный бумажный или двойной простой фильтр.

При анализе свежих проб корнеклубнеплодов, силоса и сенажа предварительно измельченную навеску массой 10 г, взвешенную с погрешностью не более 0,1 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, приливают 50 см3 раствора хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3, добавляют 1 см3 раствора уксуснокислого свинца, 0,4 г угля и взбалтывают в течение 10 мин. Затем колбу доливают до метки раствором хлористого калия, перемешивают и фильтруют.

При анализе свежих проб кормовых трав навеску массой 10 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, приливают 50 см3 раствора хлористого калия и помещают на кипящую водяную баню на 15 мин. После охлаждения раствора добавляют 1 см3 раствора уксуснокислого свинца, 0,4 г угля, доливают до метки раствором хлористого калия, тщательно перемешивают и фильтруют.

При анализе комбикормов и комбикормового сырья навеску массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,01 г, переносят в плоскодонную колбу вместимостью 250 см3. Приливают 70 см3 раствора хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3 и встряхивают в течение 3 мин, содержимое переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют при 5000 мин-1 — 7 мин. Центрифугат фильтруют в мерные колбы вместимостью 100 см3. Осадок в пробирке промывают 15—20 см3 раствора хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3 и переносят на фильтр. Фильтрат в мерных колбах доводят до метки раствором хлористого калия с (КС1) = 1,0 моль/дм3. 50 см3 фильтрата переносят в центрифужную пробирку и добавляют 25 см3 раствора железистосинеродистого калия и 25 см3 раствора сернокислого цинка. Тщательно перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 7 мин при 5000 мин-1. Центрифугат фильтруют и используют для определения нитритов. Если фильтрат получается окрашенным, к нему прибавляют 0,4 г активированного угля, взбалтывают и фильтруют через плотный фильтр.

4.3.2    Окрашивание растворов и измерение оптической плотности

В пробирку шприц-дозатором или пипеткой отбирают 4 см3 фильтрата и добавляют 1 см3 окрашивающего раствора. Через 10 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора по 4.2.3.

При анализе свежих проб допускается окрашивание растворов по методу, указанному в приложении 2.

4.4    Обработка результатов

Массовую долю нитритов в испытуемой пробе, млн-1 или мг/кг, находят по калибровочному графику (см. 4.2.3).

За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое двух параллельных определений. Результаты вычисляют до первого десятичного знака и округляют до целого числа.

Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений (d) и между двумя результатами, полученными в разных условиях (Л), мг/кг, при доверительной вероятности Р = 0,95 не должны превышать следующих значений:

d= 0,34 + 0,183 X;

D = 0,52 + 0,209

где X— среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений;

X— среднеарифметическое значение результатов двух определений, выполненных в разных условиях.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

(обязательное)

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:50), воздушно-сухие корма

рСж>з_

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

2,0

30900

30200

29510

28840

28180

27540

26920

26300

25700

25120

24550

23990

23440

22910

22390

21880

21380

20890

20420

19950

2,2

19500

19050

18620

18200

17780

17380

16980

16600

16220

15850

2,3

15490

15140

14790

14450

14130

13800

13490

13180

12880

12590

2,4

12300

12020

11750

11480

11220

10960

10720

10470

10230

10000

2,5

9772

9550

9333

9120

8913

8710

8511

8318

8128

7943

2,6

7762

7586

7413

7244

7079

6918

6761

6607

6457

6310

2,7

6166

6026

5888

5754

5623

5495

5370

5248

5129

5012

2,8

4898

4786

4677

4571

4467

4365

4266

4169

4074

3981

2,9

3890

3802

3715

3631

3548

3467

3388

3311

3236

3162

3,0

3090

3020

2951

2884

2818

2754

2692

2630

2570

2512

3,1

2455

2399

2344

2291

2239

2188

2138

2089

2042

1995

3,2

1950

1905

1862

1820

1778

1738

1698

1660

1622

1585

3,3

1549

1514

1479

1445

1413

1380

1349

1318

1288

1259

3,4

1230

1202

1175

1148

1122

1096

1072

1047

1023

1000

3,5

977

955

933

912

891

871

851

832

813

794

3,6

776

759

741

724

708

692

676

66i

646

631

3,7

617

603

589

575

562

549

537

525

513

501

3,8

490

479

468

457

447

437

427

417

407

398

3,9

389

380

371

363

355

347

339

331

324

316

4,0

309

302

295

288

282

275

269

263

257

251

Таблица 3 — Вспомогательная таблица для пересчета pCNo в массовую долю нитратов в испытуемом

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:10), воздушно-сухие корма

рСж>3_

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли pCN0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

2,0

6166

6026

5888

5754

5623

5495

5370

5248

5129

5012

2,1

4898

4786

4677

4571

4467

4365

4266

4169

4074

3981

2,2

3890

3802

3715

3631

3548

3467

3388

3311

3236

3162

2,3

3090

3020

2951

2884

2818

2754

2692

2630

2570

2512

2,4

2455

2399

2344

2291

2239

2188

2138

2089

2042

1995

2,5

1950

1905

1862

1820

1778

1738

1698

1660

1622

1585

2,6

1549

1514

1479

1445

1413

1380

1349

1318

1288

1259

2,7

1230

1202

1175

1148

1122

1096

1072

1047

1023

1000

2,8

977,2

955,0

933,3

912,0

891,3

871,0

851,1

831,8

812,8

794,3

2,9

776,2

758,6

741,3

724,4

707,9

691,8

676,1

660,7

645,7

631,0

3,0

616,6

602,6

588,8

575,4

562,3

549,5

537,0

524,8

512,9

501,2

3,1

489,8

478,6

467,7

457,1

446,7

436,5

426,6

416,9

407,4

398,1

3,2

389,0

380,2

371,5

363,1

354,8

346,7

338,8

331,1

323,6

316,2

3,3

309,0

302,0

295,1

288,4

281,8

275,4

269,2

263,0

257,0

251,2

Окончание таблицы 3

P^no

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

3,4

245,5

239,9

234,4

229,1

223,9

218,8

213,8

208,9

204,2

199,5

3,5

195,0

190,5

186,2

182,0

177,8

173,8

169,8

166,0

162,2

158,5

3,6

154,9

151,4

147,9

144,5

141,3

138,0

134,9

131,8

128,8

125,9

3,7

123,0

120,2

117,5

114,8

112,2

109,6

107,2

104,7

102,3

100,0

3,8

97,7

95,5

93,3

91,2

89,1

87,1

85,1

83,1

81,2

79,4

3,9

77,6

75,8

74,1

72,4

70,7

69,1

67,6

66,0

64,5

63,1

4,0

61,6

60,2

58,8

57,5

56,2

54,9

53,7

52,4

51,2

50,1

4,1

48,9

47,8

46,7

45,7

44,6

43,6

42,6

41,6

40,7

39,8

4,2

38,9

38,0

37,1

36,3

35,4

34,6

33,8

33,1

32,3

31,6

4,3

30,9

30,2

29,5

28,8

28,1

27,5

26,9

26,3

25,7

25,1

4,4

24,5

23,9

23,4

22,9

22,3

21,8

21,3

20,8

20,4

19,9

4,5

19,5

19,0

18,6

18,2

17,7

17,3

16,9

16,6

16,2

Таблица 4 — Вспомогательная таблица для пересчета pCNO в массовую долю нитратов в испытуемом

3“

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:5), влажность корма 50 %

P^NO

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

2,0

3412

3334

3258

3184

3112

3041

2972

2904

2838

2773

2,1

2710

2649

2588

2529

2472

2415

2360

2307

2254

2203

2,2

2153

2104

2056

2009

1963

1919

1875

1832

1791

1750

2,3

1710

1671

1633

1596

1560

1524

1489

1455

1422

1390

2,4

1358

1327

1297

1268

1239

1211

1183

1156

ИЗО

1104

2,5

1079

1054

1030

1007

984

962

940

918

897

877

2,6

857

837

818

800

782

764

746

729

713

697

2,7

681

665

650

635

621

607

593

579

566

553

2,8

541

528

516

505

493

482

471

460

450

439

2,9

429

420

410

401

392

383

374

366

357

349

3,0

341

333

326

318

311

304

297

290

284

277

3,1

271

265

259

253

247

241

236

231

225

220

3,2

215

210

206

201

196

192

187

183

179

173

3,3

171

167

163

160

156

152

149

145

142

139

3,4

136

133

130

127

124

121

118

116

113

110

3,5

108

105

103

101

98,4

96,2

94,0

91,8

89,7

87,7

3,6

85,7

83,7

81,8

80,0

78,2

76,4

74,6

72,9

71,3

69,7

3,7

68,1

66,5

65,0

63,5

62,1

60,7

59,3

57,9

56,6

53,3

3,8

54,1

52,8

51,6

50,5

49,3

48,2

47,1

46,0

45,0

43,9

3,9

42,9

42,0

41,0

40,1

39,2

38,3

37,4

36,5

35,7

34,9

4,0

34,1

33,3

32,6

31,8

31,1

30,4

29,7

29,0

28,4

27,7

4,1

27,1

26,5

25,9

25,3

24,7

24,1

23,6

23,1

22,5

22,0

4,2

21,5

21,0

20,6

20,1

19,6

19,2

18,7

18,3

17,9

17,5

4,3

17,1

16,7

16,3

16,0

15,6

15,2

14,9

14,5

14,2

13,9

4,4

13,6

13,3

13,0

12,7

12,4

12,1

11,8

п,б

11,3

11,0

4,5

10,8

10,5

10,3

10,1

10,0

9,9

9,9

9,8

9,8

9,7

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:5), влажность корма 70 %

P^no

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

2,0

3548

3467

3388

3311

3236

3162

3090

3020

2951

2884

2818

2754

2692

2630

2570

2512

2455

2399

2344

2291

2,2

2239

2188

2138

2089

2041

1995

1950

1905

1862

1820

2,3

1778

1738

1698

1660

1622

1585

1549

1514

1479

1445

2,4

1413

1380

1349

1318

1288

1259

1230

1202

1175

1148

2,5

1122

1096

1072

1047

1023

1000

977

955

933

912

2,6

891

871

851

831

813

794

776

759

741

724

2,7

708

692

676

66i

646

631

617

605

589

575

2,8

562

549

537

525

513

501

490

479

468

457

2,9

447

436

427

417

407

398

389

380

371

363

3,0

355

347

339

331

324

316

309

302

295

288

3,1

282

275

269

263

257

251

246

240

237

229

3,2

224

219

214

209

204

200

195

190

186

182

3,3

178

174

170

166

162

158

155

151

148

144

3,4

141

138

135

132

129

126

123

120

117

115

3,5

112

110

107

105

102

100

98

95,5

93,3

91,2

3,6

89,1

87,1

85,1

83,1

81,3

79,4

77,6

75,9

74,1

73,4

3,7

70,8

69,2

67,6

66,1

64,6

63,1

61,7

60,3

58,9

57,5

3,8

56,2

54,9

53,7

52,5

51,3

50,1

49,0

47,9

46,8

45,7

3,9

44,7

43,6

42,7

41,7

40,7

39,8

38,9

38,0

37,1

36,3

4,0

35,5

34,7

33,9

33,1

32,4

31,6

30,9

30,2

20,3

28,8

4,1

28,2

27,5

26,9

26,3

25,7

25,1

24,6

24,0

23,4

22,9

4,2

22,4

21,9

21,4

20,9

20,4

20,0

19,5

19,0

18,6

18,2

4,3

17,8

17,4

17,0

16,6

16,2

15,8

15,5

15,1

14,8

14,4

4,4

14,1

13,8

13,5

13,2

12,9

12,6

12,3

12,0

П,7

11,5

4,5

П,2

11,0

10,7

10,5

10,2

10,0

9,8

9,5

9,3

9,1

Таблица 6 — Вспомогательная таблица для пересчета pCNO в массовую долю нитратов в испытуемом

3“

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:5), влажность корма 80 %

P^no

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли pCN0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

1,6

9033

8827

8626

8430

8238

8050

7867

7688

7513

7342

1,7

7175

7012

6852

6696

6544

6375

6249

6107

5968

5832

1,8

5699

5570

5443

5319

5198

5079

4964

4851

4740

4633

1,9

4527

4424

4323

4225

4129

4035

3943

3853

3765

3680

2,0

3596

3514

3434

3356

3280

3205

3132

3061

2991

2923

2,1

2856

2791

2728

2666

2605

2546

2488

2431

2376

2322

2,2

2269

2217

2167

2117

2069

2022

1976

1931

1887

1844

2,3

1802

1761

1721

1682

1644

1606

1570

1534

1499

1465

2,4

1432

1399

1367

1336

1306

1276

1247

1218

1191

1164

2,5

1137

1111

1086

1061

1037

1013

990

968

946

934

2,6

903

883

863

843

824

805

787

769

751

734

2,7

717

701

685

670

654

639

625

611

597

583

Окончание таблицы 6

P^no

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

2,8

570

557

544

532

520

508

496

485

474

463

2,9

453

442

432

422

413

403

394

385

377

368

3,0

360

351

343

336

328

320

313

306

299

292

3,1

286

279

273

267

261

256

249

243

238

232

3,2

227

222

217

212

207

202

198

193

189

184

3,3

180

176

172

168

164

161

157

153

150

146

3,4

143

140

137

134

131

128

125

122

119

116

3,5

114

111

109

106

104

101

99

97

95

92

3,6

90,3

88,3

86,3

84,3

82,4

80,5

78,7

76,9

75,1

73,4

3,7

70,7

70,1

68,5

67,0

65,4

63,9

62,5

61,1

59,7

58,3

3,8

57,0

55,7

54,4

53,2

52,0

50,8

49,6

48,5

47,4

46,3

3,9

45,4

44,2

43,2

42,2

41,3

40,3

39,4

38,5

37,7

36,8

4,0

36,0

35,1

34,3

33,6

32,8

32,0

31,3

30,6

29,9

29,2

Таблица 7 — Вспомогательная таблица для пересчета рС No _ в массовую долю нитрата в испытуемом

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:5), влажность корма 90 %

Р^ж>3_

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

1,6

9188

8979

8775

8575

8380

8189

8003

7821

7643

7469

1,7

7299

7133

6970

6812

6656

6505

6357

6212

6071

5933

1,8

5798

5666

5537

5411

5287

5167

5049

4935

4822

4712

1,9

4603

4500

4398

4298

4200

4104

4011

3920

3830

3743

2,0

3658

3575

3493

3414

3336

3260

3186

3113

3043

2973

2,1

2906

2840

2775

2712

2650

2590

2531

2473

2417

2362

2,2

2308

2256

22

2154

2105

2057

2010

1964

1920

1876

2,3

1833

1792

17

1711

1672

1634

1597

1560

1525

1490

2,4

1456

1423

13

1359

1328

1298

1268

1239

1211

1184

2,5

1157

ИЗО

1105

1080

1055

1031

1007

985

962

940

2,6

919

898

877

858

838

819

800

782

764

747

2,7

730

713

697

681

666

650

636

621

607

593

2,8

580

567

554

541

529

517

505

493

482

471

2,9

461

450

440

430

420

410

401

392

383

374

3,0

366

357

349

341

334

326

319

311

304

297

3,1

291

284

277

271

265

259

253

247

242

236

3,2

231

226

220

215

210

206

201

196

192

188

3,3

183

179

175

171

167

163

166

156

152

149

3,4

146

142

139

136

130

130

127

124

121

118

3,5

116

ИЗ

110

108

105

103

101

98

96

94

3,6

91,9

89,8

87,7

85,8

83,8

81,9

80,0

78,2

76,4

74,7

3,7

73,0

71,3

69,7

68,1

66,6

65,0

63,6

62,1

60,7

59,3

3,8

58,0

56,7

55,4

54,1

52,9

51,7

50,5

49,3

48,2

47,0

3,9

46,1

45,0

44,0

43,0

42,0

41,0

40,1

39,1

39,7

37,4

4,0

36,6

35,7

34,9

34,1

33,4

32,6

31,9

31,1

30,4

29,7

материале (соотношение массы пробы и объема экстрагирующего раствора 1:5), при анализе сока

P^no

Массовая доля нитрата, млн-1 (мг/кг)

Сотые доли рС N0

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

1,6

8877

8675

8477

8285

8096

7912

7732

7556

7384

7216

1,7

7051

6891

6734

6581

6431

6284

6141

6002

5865

5731

1,8

5601

5474

5349

5227

5108

4992

4878

4767

4659

4553

1,9

4449

4348

4249

4152

4058

3965

3875

3787

3701

3616

2,0

3534

3454

3375

3298

3223

3150

3078

3008

2939

2873

2,1

2807

2743

2681

2620

2560

2502

2445

2389

2335

2282

2,2

2230

2179

2129

2081

2034

1987

1942

1898

1855

1812

2,3

1771

1731

1691

1653

1615

1579

1543

1508

1473

1440

2,4

1407

1375

1344

1313

1283

1254

1225

1197

1170

1144

2,5

1118

1092

1067

1043

1019

996

973

951

930

908

2,6

888

867

848

828

810

791

773

756

738

722

2,7

705

689

673

658

643

628

614

600

586

573

2,8

560

547

535

523

511

499

488

477

466

455

2,9

445

435

425

415

406

397

387

379

370

362

3,0

353

345

337

330

322

315

308

301

294

287

3,1

281

274

268

262

256

250

244

239

233

228

3,2

223

218

213

208

203

199

194

190

185

181

3,3

177

173

169

165

162

158

154

151

147

144

3,4

141

137

134

131

128

125

123

120

117

114

3,5

112

109

107

104

102

100

97

95

93

91

3,6

89

87

85

83

81

79

77

76

74

72

3,7

71

69

67

66

64

63

6i

60

59

57

3,8

56

55

53

52

51

50

49

48

47

46

3,9

44

43

42

42

41

40

39

38

37

36

4,0

35

35

34

33

32

31

31

30

29

29

ПРИЛОЖЕНИЕ 2

(обязательное)

Метод окрашивания растворов, содержащих нитриты, с помощью этакридин — лактата (риванола)

Метод может быть использован для окрашивания растворов, содержащих нитриты, и последующего фотометрического анализа.

Метод основан на использовании для окрашивания вместо токсичных реагентов нафтиламинной группы риванола.

1 Подготовка к анализу

1.1 Приготовление раствора риванола массовой концентрации 0,02 %

5 таблеток риванола растирают в фарфоровой ступке до однородного порошка. Переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3 дистиллированной водой и доливают до метки. Реактив хранится в темной склянке длительное время.

1.2    Приготовление окрашивающего раствора риванола

Раствор риванола массовой концентрации 0,02 %, приготовленный по 1.1, разбавляют 1:1 раствором соляной кислоты концентрации 5,2 моль/дм3.

1.3    Приготовление растворов сравнения

В мерные колбы вместимостью 50 см3 переносят 0; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 10,0 см3 основного раствора азотистокислого натрия, содержащего 0,1 мг/см3 N02_, приготовленного по и. 4.2.2. Колбы доливают до метки дистиллированной водой или экстрагирующим раствором. Содержание нитритов в 1 см3 растворов сравнения составляет: 0; 1; 2; 4; 8; 12 и 20 мкг соответственно.

2 Окрашивание растворов и измерение оптической плотности

К 4 см3 окрашивающего раствора риванола приливают по 10 см3 растворов сравнения и испытуемых растворов, перемешивают и через 5 мин измеряют оптическую плотность окрашенных растворов, используя зеленый светофильтр с максимумом пропускания 520 нм.

3 Обработка результатов

По результатам фотометрирования растворов сравнения строят калибровочный график и по нему находят содержание нитритов в испытуемом растворе в мкг/см3.

Массовую долю нитритов в испытуемой пробе (.X), мг/кг, вычисляют по формуле

X- Щ-Vj- Уз V2-m

где т2 — масса N02“ в 1 см3 фотометрируемого раствора, найденная по калибровочному графику, мкг;

V\ — общий объем экстракта, см3;

V2 — объем экстракта, используемый для окрашивания, см3;

Кз — объем фотометрируемого раствора, см3; т — масса пробы, г.

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД, на который дана ссылка

Номер раздела, пункта

Обозначение НТД, на который дана ссылка

Номер раздела, пункта

ГОСТ 334-73

3.1

ГОСТ 4453-74

4.1

ГОСТ 1770-74

4.1

ГОСТ 4456-75

4.1

ГОСТ 3118-77

4.1

ГОСТ 6552-80

4.1

ГОСТ 3760-79

4.1

ГОСТ 6709-72

3.1; 4.1

ГОСТ 3773-72

4.1

ГОСТ 10652-73

4.1

ГОСТ 4108-72

4.1

ГОСТ 10929-76

3.1

ГОСТ 4165-78

4.1

ГОСТ 12026-76

4.1

ГОСТ 4197-74

4.1

ГОСТ 13496.0-80

1

ГОСТ 4204-77

3.1

ГОСТ 13979.0-86

1

ГОСТ 4217-77

3.1; 4.1

ГОСТ 20490-75

3.1

ГОСТ 4234-77

3.1; 1

ГОСТ 24104-88

2.1; 3.1; 4.1

ГОСТ 4328-77

4.1

ГОСТ 25336-82

4.1

ГОСТ 4329-77

3.1

ГОСТ 27262-87

1

ГОСТ 4330-76

4.1