База ГОСТовallgosts.ru » 11. ЗДРАВООХРАНЕНИЕ » 11.220. Ветеринария

ГОСТ 28424-2014 Средства воспроизводства. Эмбрионы крупного рогатого скота. Технические условия

Обозначение: ГОСТ 28424-2014
Наименование: Средства воспроизводства. Эмбрионы крупного рогатого скота. Технические условия
Статус: Действует
Дата введения: 07/01/2015
Дата отмены: -
Заменен на: -
Код ОКС: 11.220
Скачать PDF: ГОСТ 28424-2014 Средства воспроизводства. Эмбрионы крупного рогатого скота. Технические условия.pdf
Скачать Word:ГОСТ 28424-2014 Средства воспроизводства. Эмбрионы крупного рогатого скота. Технические условия.doc

Текст ГОСТ 28424-2014 Средства воспроизводства. Эмбрионы крупного рогатого скота. Технические условия



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

ГОСТ

28424—

2014


МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

Средства воспроизводства ЭМБРИОНЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Технические условия

Издание официальное

Москва

Стаидартмнформ

2015


Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Всероссийским научноисследовательским институтом животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии)

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 июня 2014 г. № 45-2014)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК <ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166)004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Киргизия

KG

Кыргызсгандарт

Молдова

MD

Молдова-Стана ар т

Россия

RU

Росстандарт

Таджикистан

TJ

T аджике т а ндарт

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 19 августа 2014 г. No 890-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 28424-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2015 г.

5    ВЗАМЕН ГОСТ 28424-90

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе *Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе к Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в селю Интернет

© Стандартинформ. 2015

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Средства воспроизводства

ЭМБРИОНЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Технические условия

Product (or reproduction.

Bovine embryos.

Specifications

Дата введения - 2015-07-01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на свежелолученные и замороженные эмбрионы крупного рогатого скота (далее - эмбрионы), предназначенные для пересадки животным-реципиентам.

Требования к качеству и безопасности эмбрионов изложены в 4.1 - 4.4. к маркировке - в 4.5.

2    Нормативные ссылки

6 настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.008-76 Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.2.003-91 Система стандартов безопасности труда. Оборудование производственное. Общие требования безопасности

ГОСТ 12.3.002-75 Система стандартов безопасности труда. Процессы производственные. Общие требования безопасности

ГОСТ 6259-75 Реактивы. Глицерин. Технические условия

ГОСТ 9293-74 Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 10164-75 Реактивы. Этиленгликоль. Технические условия

ГОСТ 19710-83 Этиленгликоль. Технические условия

ГОСТ 26030-83 Сперма быков замороженная. Технические условия

ГОСТ 27775-88 Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. Термины и определения

ГОСТ 28085-89 Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности Примечание — При пользовании настоящим стандартом цепе сообразно лроверигъ действие ссылочных стандартов по указателю «Национальные стандарты», составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным учазатепям. опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом, следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3    Термины и определения

8 настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 27775.

4    Технические требования

4.1    Общие требования

4.1.1    Эмбрионы должны соответствовать требованиям настоящего стандарта и (1), быть получены в центрах и пунктах трансплантации эмбрионов в соответствии с требованиями (2). правилами по трансплантации эмбрионов и ветеринарно-санитарными требованиями, действующими на территории государства, принявшего стандарт.

4.1.2    Все манипуляции по получению, обработке, использованию и хранению эмбрионов проводят в соответствии с 4.1.1 с использованием стерильных инструментов, материалов и сред, безопасных для эмбрионов.

4.2    Требования к донорам яйцеклеток (в последующем - эмбрионов) и спермы

4.2.1    Эмбрионы получают от клинически здоровых самок крупного рогатого скота, осемененных спермой быков по ГОСТ 26030.

4.2.2    Доноров яйцеклеток (в последующем - эмбрионов) отбирают из поголовья, на которое не наложены ветеринарные ограничения по причине наличия болезни или возбудителя болезни, которые не входят в категорию 1 в соответствии с приложением А.

4.2.3    Доноры яйцеклеток (в последующем - эмбрионов) должны подбираться с учетом комплекса селекционно-генетических признаков, иметь продуктивность (молочную, мясную, мясомолочную), превышающую стандарт породы.

4.2.4    Самок крупного рогатого скота перед отбором в качестве доноров яйцеклеток (в последующем - эмбрионов) подвергают клиническому осмотру. На каждое животное оформляют документ с указанием клинического состояния здоровья, благополучия по инфекционным заболеваниям с указанием даты проведения последних диагностических исследований и обработок.

4.2.5    Быки-производители, сперму которых используют для осеменения самок-доноров, должны находиться на племенных предприятиях, отвечающих требованиям по ветеринарному благополучию и здоровью животных, а также по соблюдению санитарно-гигиенических условий отбора, замораживания, хранения и отправки спермы, действующих на территории государства, принявшего стандарт.

4.2.6    Племенные животные должны иметь подтверждение достоверности происхождения и отсутствия генетических аномалий.

4.3    Требования к процедурам предотвращения распространения инфекционных заболеваний через эмбрионы, отобранные /л vivo

4.3.1    По отношению к болезням, не входящим в категорию 1 (см. приложение А), учитывают ветеринарно-санитарное положение страны или зоны, экспортирующей эмбрионы, ветеринарносанитарное состояние поголовья и доноров эмбрионов, а также патогенность возбудителей, от которых стремится защититься страна, импортирующая эмбрионы.

4.3.2    Для предотвращения заражения инфекционными заболеваниями, которые не входят в категорию 1 (см. приложение А), проводят надзор за животными - донорами яйцеклеток (в последующем - эмбрионов) и поголовьем их происхождения в течение средней длительности инкубационного периода болезней, а также лабораторные исследования жидкостей после отбора и отмывки эмбрионов или других биологических материалов (например, крови) на предмет определенных патогенных возбудителей болезней.

4.4    Характеристики эмбрионов

4.4.1 Полученные на седьмой день после искусственного осеменения самок-доноров эмбрионы должны быть на стадии развития ранней морулы (Mo I). поздней морулы (Mo II). ранней бластоцисты (Бл I), экс л аудирован ной бластоцисты (Бп II). полностью экспандированной бластоцисты (Бл III) с показателями в соответствии с таблицей 1.

Таблица 1- Характеристика стадий развития эмбрионов

Стадия развития эмбриона

Показатели

Морфология

Время с момента оплодотворен ия. ч

Размер, мм

Число

бластомерсв

Ранняя морула

90-125

0.13

16-32

Окончание таблицы 1

Стадия развития эмбриона

Показатели

Морфология

Время с момента оплодотворен ия. ч

Размер, мм

Число

бластомерое

Поздняя морула

120 - 145

0.13

32-64

ж

Ранняя бластоциста

140- 175

0.13-0.15

Более 64

т.

Щл

Экспандирова иная бластоциста

160-210

0.14 - 0,20

64- 130

lii-

Полностью

экспамдированная

бластоциста

160-210

0.14 - 0.20

130-200

V •. • ■$. <

4.4.2 В зависимости от оценки морфологических показателей, указанных в таблице 2. полученным эмбрионам присваивают кед качества от 1 до 4 в соответствии с приложением Б.

Таблица 2 - Оценка морфологических поюзателей эмбриона в зависимости от стадии развития

Стадия развития эмбриона

Оценка морфологических показателей эмбриона

Отличные

Хорошие

Удовлетворительные

Условно годные

Непригодные

Морула ранняя (Mo I), код стадии развития: 3;

Морула поздняя (Mo II), код стадии развития: 4

Эмбрион сферической формы, симметричный. Бластомеры четкие, одинаковы по размеру и плотности, окраске. Зона леплюцида округлая без трещин и сколов: перивите плиновое пространство без посторонних включений

Нарушения относил менее 85 % интактны; Это решение основ отношении эмб выделенных в пространство. Зона формы, гладкая 6с участков, которые удерживания эмбрио пайете

Эмбрион сферической формы, симметричный. Клеточный комплекс несколько сжат. Бластомеры четкие, расположены ассиметрично. неодинаковы по размеру. Зона леплюцида округлая без трещин и сколов; наличие включений в перивите лли новом пространстве

эль но минимальны. Не к жизнеспособных клеток, ывается на процентном риональных клеток, лерив итеплиновое леплюцида сферической \з плоских и вогнутых могут быть причиной •на в чашке Петри или

Эмбрион сферической формы или незначительно деформирован. Клеточный комплекс окат. смещен относительно центра. Бластомеры расположены ассиметрично. некоторые темнее; грануляция отдельных клеток. Связь между отдельными бластомерами отсутствует. Зона леплюцида с незначительным сколом или трещиной: наличие включений в перивите пликоеом пространстве Умеренные нарушения общей формы клеточной массы или размера, цвета, плотности отдельных клеток. Не менее 50 % интактных и

жизнеспособных клеток

Эгёрион сферической формы или деформирован; клеточный комплекс окат, смещен; нарушена связь цитоплазмы с перивите пли новым пространством; выделено значительное юличество бластомеров; связь между отдельными бластомерами отсутствует; потемнение или пикноз большей части бластомеров

Значительные нарушения формы клеточной массы, цвета и плотности отдельных бластомеров. Не менее 25% интактных и жизнеспособных клеток

Эмбрион

сферической формы

или деформирован;

бластомеры

разрушены. не

связаны между

собой; значительная

часть бластомеров за

пределами

клеточного

комплекса;

пер и в ите л пин овое

пространство

заполнено

отдельными

клетками и

фрагментами; зона

леплюцида

деформирована.

имеет разрывы

ГОСТ 28424-2014

Стадия развития эмбриона

Оценка морфологических поюзателей эмбриона

Отличные

Хорошие

Удовлетворительные

Условно годные

Непригодные

Блэстоциста ранняя (Бл I).

Эмбрион сферической формы; видна

Эмбрион сферической

Эмбрион сферической

Эмбрион сферической

код стадии развития: 5

небольшая полость; б ластом еры

формы; видна небольшая

формы; видна

формы или

равномерные; троф облает более

полость; трофобласт

небольшая полость;

деформирован; зона

светлый, чем эмбриобласт.

смещен относительно

клеточный комплекс

пеллюцида

Не менее 85 % интактных

центра.

деформирован;

повреждена, большая

жизнеспособных клеток

Не менее 50 % интактных и жизнеспособных клеток

трофобласт трудно различим.

Не менее 25 % интактных и жизнеспособных клеток

часть бластомеров разрушена

Бластоциста

Эмбрион

Эмбрион

Эмбрион сферической

Эмбрион сферической

Эмбрион сферической

экслакдироеаикая (Бл II).

сферической

сферической

формы; перивител ли новое

формы;

формы или

код стадии развития: 6

формы;

формы;

пространство отсутствует;

перивителлиновое

деформирован;

леривите плиново

пер и вите л лин овое

бластополость большая,

пространство

перив итеплиновое

е пространство

пространство

прозрачная; трофобласт и

отсутствует;

пространство

отсутствует;

отсутствует;

эмбриобласт четко

бластополость большая

отсутствует;

бластополость

бластополость

выражены, эмбриобласт

с незначительными

бластополость

большая

большая

деформирован, имеет

включениями;

большая или сжата.

прозрачная;

прозрачная;

не скол ыю выделенных

трофобласт и

затемнена, имеет

трофобласт и

трофобласт и

бластомеров; зона

эмбриобласт четко

включения;

эмбриобласт

эмбриобласт четко

пеллюцида прозрачная с

выражены, но связь

трофобласт и

четто выражены,

выражены.

незначительным сколом

между отдельными

эмбриобласт

эмбриобласт юмпактный; зона пеллюцида гладкая, прозрачная, без повреждений

Не менее в жизнеспособных кл

эмбриобласт имеет один-два выделенных 6 ластом ера; зона пеллюцида гладкая, прозрачная, без повреждений

5 % интактных

в ток

или трещиной

Не менее 50 % интактных и жизнеспособных клеток

клетками нарушена, эмбриобласт деформирован, имеет несколько выделенных блз стомеро в; зона пеллюцида

деформирована, имеет значительные сколы или трещины Не менее 25 % интактных и жизнеспособных клеток

деформированы, связь между клетками отсутствует, большинство клеток разрушены; зона пеллюцида деформирована, имеет значительные сколы или трещины

ся


ГОСТ 28424-2014


Окончание таблицы 2

Стадия развития эмбриона

Оценка морфологических показателей эмбриона

Отличные | Хорошие

Уд ое летво рител ьн ые

Условно годные

Непригодные

Бпастоциста полностью эксландированная (Бл III). код стадии развития: 7

Эмбрион сферической формы; пе ривител липовое пространство отсутствует; эмбриоблэст отчетливо ограничен; троф облает правильной формы, упорядочен; полость большая прозрачная; зона пеллюцида несколько растянута, гладкая

Эмбрион сферичесюй формы; перивителлиповое пространство отсутствует; эмбриобласт отчетливо ограничен; трофобласт правильной формы, упорядочен; полость сжата; зона пеллюцида гладкая

Эмбрион сферичесюй формы:

пери вителл ииово е пространство отсутствует; эмбриобласт и трофобласт нечетко выражены; полость сжата; зона пеллюцида незначительно повреждена

Эмбрион деформирован; эмбриобласт и трофобласт нечет ю выражены, сжаты или рыхлые; связь между клетками отсутствует; полость сжата; зона пеллюцида значительно повреждена

К непригодным также относят эмбрионы до 1 в-клеточной стадии и неоллодотворенные ооциты (см. таблицу 1).


ГОСТ 28424-2014


4.4.3    В коммерческих цепях могут быть использованы только эмбрионы, которым присвоен код качества 1.

4.4.4    Свежеполучемные эмбрионы не должны быть коигамииировамы патогенными и условно патогенными микроорганизмами, грибами, вирусами и другими микроорганизмами.

4.5    Упаковка

4.5.1    Каждую партию сеежелолученных эмбрионов после определения морфологических показателей помещают и укупоривают в пайеты со средой для хранения эмбрионов, представляющую собой стерильный фосфатно-буферный раствор, содержащий альбумин сыворотки крови крупного рогатого скота (BSA) концентрацией 4 г/дм3 или фетальную сыворотку крови крупного рогатого скота (FCS) концентрацией 20 см3/дм3 и антимикробный препарат (гентамицин концентрацией 0.05 г/дм3 или полиген концентрацией 0.3 г/дм3).

4.5.2    Эмбрионы, предназначенные для замораживания, после промывки и экспозиции в криопротекгоре (глицерин концентрацией 1.0 моль/дм3 или 1.4 моль/дм3 по ГОСТ 6259 или этиленгликоль концентрацией 1.5 моль/дм3 по ГОСТ 10164 или ГОСТ 19710. помещают в пайеты. укупоривают и замораживают в предусмотренных для этих целей программных замораживателях в соответствии с правилами, действующими на территории государства, принявшего стандарт.

4.5.3    Пайеты с замороженными эмбрионами помещают в контейнеры (поблеты. канистры, тубы), которые переносят в сосуд Дьюара с жидким азотом по ГОСТ 9293.

4.5.4    Упаковочные и укупорочные материалы должны соответствовать требованиям документов, в соответствии с которыми они изготовлены, и обеспечивать сохранность качества и безопасность эмбрионов при перевозках, хранении и реализации.

4.6    Маркировка

Каждую пайету маркируют, нанося маркером номер партии и дату получения эмбрионов.

5    Требования безопасности

5.1    Производственный процесс и оборудование должны соответствовать требованиям ГОСТ

12.2.003 и ГОСТ 12.3.002.

5.2    Требования безопасности, производственной санитарии и санитарнопротивоэпидемического режима должны соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008 и требованиям, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

5.3    Утилизацию эмбрионов проводят кипячением в течение 20 мин.

6    Правила приемки

6.1    Сеежеполученные и замороженные эмбрионы принимают партиями.

Под партией понимают любое количество эмбрионов, полученное от одного донора эмбрионов за один технологический цикл и оформленное одним документом, удостоверяющим качество и безопасность эмбрионов.

6.2    Каждая партия сеежелолученных и замороженных эмбрионов должна быть проверена и принята соответствующим специалистом предприятия-изготовителя.

6.3    Экспортируемые эмбрионы должны сопровождаться документом, подтверждающим благополучие животных, от которых они получены, а также соответствие условий получения и замораживания эмбрионов международным требованиям (3| (см. приложение В).

6.4    Каждая партия замороженных эмбрионов, предназначенных для пересадки, должна быть принята специалистом по пересадке эмбрионов предприятия-изготовителя или предприятия-получателя.

7    Методы контроля

7.1    Определение качества эмбрионов по морфологическим показателям

Качество эмбрионов по морфологическим показателям определяют у всех свежело л ученных эмбрионов. Качество замороженных эмбрионов после оттаивания определяют в случае использования многоступенчатого насыщения эмбриона криопротектором или. при необходимости, в случае одноступенчатого насыщения (при использовании этиленгликоля).

7.1.1    Оборудование, материалы и среды

7.1.1.1    Термостат, обеспечивающий поддержание температуры (37 ± 1) °С.

7.1.1.2    Микроскоп инвертированный.

7.1.1.3    Лупа бинокулярная.

7.1.1.4    Столик нагревательный.

7.1.1.5    Сифон или фильтр для отбора промывной среды.

7.1.1.6    Чашки Петри диаметром 90 и 35 мм для поиска и сбора эмбрионов.

7.1.1.7    Флаконы вместимостью 450 - 500 см3.

7.1.1.8    Пипетки для отлова эмбрионов.

7.1.1.9    Среда фосфатно-буферная, содержащая альбумин сыворотки крови крупного рогатого скота (BSA) концентрацией 4 г/дм3 или фетальную сыворотку крови крупного рогатого скота (FCS) концентрацией 20 см3/дм3 и антимикробный препарат (гентамицин концентрацией 0.05 г/дм* или полиген концентрацией 0.3 г/дм3).

7.1.1.10    Трипсин, раствор массовой долей 0.25 %.

Допускается использование другого оборудования с техническими характеристиками, а также материалов и сред по качеству не ниже вышеуказанных.

7.1.2    Подготовка к испытанию

Раствор, полученный с соблюдением правил асептики е отдельный флакон после вымывания эмбрионов из каждого рога матки самки-донора, выдерживают при температуре от 18 9С до 25 вС в течение 20 мин или в термостате при температуре 37 *С в течение 20 мин для осаждения эмбрионов. Верхнюю часть раствора удаляют с помощью сифона, оставляя 80 - 100 см3 раствора. Оставшийся раствор переносят в две-три чашки Петри диаметром 90 мм.

При использовании промывочной системы с фильтром отфильтрованный раствор просматривают непосредственно в прилагаемой к системе емкости для сбора эмбрионов.

7.1.3    Проведение испытания

Эмбрионы просматривают под бинокулярной лупой при увеличении 20х - 28х.

Эмбрионы с оценкой «непригодные»* удаляют.

Эмбрионы, пригодные к пересадке и замораживанию и отобранные е чашки Петри диаметром 35 мм со средой по 7.1.1.9. не менее десяти раз переносят для промывки в чистую фосфатнобуферную среду, используя при каждом переносе эмбрионов новую пипетку. Допускается групповая промывка эмбрионов, взятых у одной самки-донора, но их число не должно превышать десяти в каждой промывке.

В случае, когда требуется проведение операций по инактивации или удалению вирусов (например, герпесвирус-1 крупного рогатого скота, вирус болезни Ауески). проводят дополнительную промывку 0,25 %-ным раствором трипсина.

После промывки зону леплюцида каждого эмбриона исследуют по всей поверхности при увеличении 50х - 100х для признания ее неповрежденной и не имеющей никаких посторонних включений.

7.1.4    Обработка результатов

Оценку качества эмбрионов по морфологическим показателям проводят на соответствие требованиям, указанным в 4.4.

Свежеполученные эмбрионы с оценкой «отличные и хорошие» подлежат прямой пересадке животным-реципиентам или замораживанию.

Свежеполученные эмбрионы с оценкой «удовлетворительные», «условно пригодные» пересаживают животным-реципиентам.

Замороженные эмбрионы, получившие после оттаивания оценку «отличные и хорошие», «удовлетворительные» и «условно пригодные», пересаживают животным-реципиентам.

Эмбрионы с оценкой «непригодные» выбраковывают.

7.2 Определение санитарного состояния эмбрионов

7.2.1    Санитарное состояние определяют у свежвполученных эмбрионов, подлежащих пересадке или замораживанию.

7.2.2    Санитарное состояние свежеполучанных эмбрионов, а также эмбрионов, подлежащих замораживанию, устанавливают на основании выборочного микробиологического исследования предпоследнего промывочного раствора соответствующей среды, не менее чем от шести партий эмбрионов в один квартал.

7.2.3    Для определения санитарного состояния эмбрионов отбирают по 2 см3 соответствующей среды - 1 см3 среды используют для микробиологических исследований. 1 см3 среды помещают в пробирку, плотно закрывают, маркируют и хранят в замороженном виде до использования всех эмбрионов данной партии.

7.2.5    Контроль стерильности сред проводят по ГОСТ 28085.

8 Транспортирование и хранение

8.1    Эмбрионы транспортируют в сопровождении специалиста с соблюдением правил асептики. Время транспортирования сеежепо л ученных эмбрионов не должно превышать пять часов.

8.2    Эмбрионы транспортируют всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозок скоропортящихся грузов и багажа, действующими на данном виде транспорта.

8.3    Оттаянные эмбрионы пересаживают реципиентам в течение 10-15 мин.

8.4    Эмбрионы хранят в стерильных укупоренных пайетах с соблюдением требований (2) в специально предназначенном для этого хранилище.

Приложение А (справочное)

Рекомендации по риску передачи болезней через эмбрионы,

отобранные /л vivo

А.1 8 соответствии с |4] следующие болезни и возбудители болезней классифицированы в четыре категории. Данная классификация относится исключительно к эмбрионам, отобранным in vivo.

В категорию 1 включены болезни и возбудители болезней, в отношении которых имеются надежные доказательства, позволяющие утверждать, что риск лередачи незначителен, лри условии, что обращение с эмбрионами проводилось надлежащим образом.

В категорию 1 включены следующие болезни и возбудители болезней:

•    Brucella abortus (поражает крупный рогатый скот);

•    губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота (поражает крупный рогатый скот);

•    ящур (поражает крупный рогатый скот);

-    катаральная лихорадка овец (поражает крупный рогатый скот);

-    энзоотический лейкоз крупного рогатого скота;

•    болезнь Ауески: требует обработки трипсином (поражает крупный рогатый скот, оленей, овец, свиней, лошадей и др.):

•    инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота: требует обработки трипсином.

В категорию 2 включены болезни и возбудители болезней, в отношении которых имеются доказательства, достаточные, чтобы утверждать, что риск передачи незначителен, при условии, что обращение с эмбрионами проводилось надлежащим образом, но в отношении которых имеющиеся данные должны быть перепроверены в ходе новых трансплантаций.

В категорию 2 включены следующие болезни и возбудители болезней:

-    катаральная лихорадка овец (к заболеванию восприимчив крупный рогатый скот).

В категорию 3 включены болезни и возбудители болезней, в отношении которых имеются определенные доказательства, позволяющие утверждать, что риск передачи незначителен, при условии, что обращение с эмбрионами проводилось надлежащим образом, но в отношении которых эти определенные доказательства должны быть подкреплены дополнительными экспериментальными результатами в ходе новых трансплантаций in vivo или in vitro.

В категорию 3 включены следующие болезни и возбудители болезней:

•    Campylobacter fetus:

-    губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота:

•    Haemophilus somnus (поражает крупный рогатый скот);

-    Micobacterium paratuberculosis (поражает крупный рогатый скот);

-    Neospora caninum (поражает крупный рогатый скот)

•    чума крупного рогатого скота (поражает крупный рогатый скот):

•    репродуктивно-респираторный синдром свиней [болезнь часто протекает в ассоциации с другими инфекциями (болезнь Ауески. пареовирусная и энгероеирусная инфекция, энцефаломиокардит. грипп, лептоспироз и др.)]:

•    вирус иммунодефицита крупного рогатого скота;

•    вирус вирусной диареи крупного рогатого скота.

В категорию 4 включены болезни и возбудители болезней, в отношении которых проведены или проводятся исследования, показавшие:

-    что пока никаких заключений о риске передачи сделать нельзя или

-    что риск передачи путем пересадки эмбрионов не может быть незначительным, даже если обращение с эмбрионами проводилось надлежащим образом.

В категорию 4 включены следующие болезни и возбудители болезней:

-    анаплазмоз крупного рогатого скота;

-    Chlamydia psittaci (поражает крупный рогатый скот, овец);

-    энтеровирус (поражает крупный рогатый скот, свиней):

•    заразный узелковый дерматит:

-    Escherichia coli ОЭ:К99 (поражает крупный рогатый скот);

-    катаральная лихорадка овец (коз (у крупного рогатого скота возможны аборты, рождение уродливого потомства)];

-    гепрпесвирус-4 крупного рогатого скота:

•    Leptospira borgpetersenii серовар hardjobovis (крупный рогатый скот);

болезнь Бордера (обладает высокой патогенностью для плодов крупного рогатого скота); Mycobacterium bovis (поражает крупный рогатый скот); везикулярный стоматит (поражает крупный рогатый скот, свиней);

Trichomonas foetus (поражает крупный рогатый скот);

Ureapiasma / Mycoplasma spp. (поражает крупный рогатый скот, коз); вирус Акабане (поражает крупный рогатый скот); вирус парагриппа-3 (поражает крупный рогатый скот).

Приложение Б (справочное)

Эмбрионы крупного рогатого скота: стадии развития и качество

День цикла: 6 Код стадии развития: 3 Код качества: 1 Комментарии: а

День цикла: 6.5 Код стадии развития: 3 Код качества: 1 Комментарии: а

День цикла: 6.5 Код стадии развития: 3 Код качества: 2 Комментарии: а. 6


День цикла: 6.5 Код стадии развития: 3 Код качества: 2 Комментарии: а. b


День цикла: 7

Код стадии развития: 4

Код качества: 1


День цикла: 6.5 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: b. с. d


День цикла: 7

Код стадии развития: 4

Код качества: 1


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: d

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: d


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: d

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: 6

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: Ь


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: 6


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: 6. е


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Кед качества: 3 Комментарии: (ш д


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: Ь


7^1*. -

./&+• - ^

/    V \\    *    ■,



День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 3 Комментарии: f. д



День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 3 Комментарии: f. д

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 3 Комментарии: f. д

День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 3 Комментарии: /. д


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 3 Комментарии: f, д. h


День цикла: 7

Код стадии развития: 5

Код качества: 1


День цикла: 7 Код стадии развития: 5 Код качества: 3 Комментарии: d


День цикла: 7

Код стадии развития: 5

Код качества: 1



День цикла: 7 Код стадии развития: 5 Код качества: 1 Комментарии: d. h

День цикла: 7 Код стадии развития: 5 Код качества: 2 Комментарии: в


День цикла: 7

Код стадии развития: 5

Код качества: 2

День цикла: 7

Код стадии развития: 5

Код качества: 2

День цикла: 7 Код стадии развития: 5 Код качества: 3 Комментарии: g


День цикла: 7

Код стадии развития: 5

Код качества: 3


День цикла: 7,5 Код стадии развития: 6 Код качества: 1 Комментарии: б. к


День цикла: 7

Код стадии развития: 6

Код качества: 1


День цикла: 7.5 Код стадии развития: 6


Кед качества: 2 Комментарии: к


День цикла: 7.5 Код стадии развития: 6


Код качества: 1 Комментарии: к


День цикла: 7,5 Код стадии развития: 7 Код качества: 1


День цикла: 7.5 Код стадии развития: 7 Код качества: 1

День цикла: 7.5 Код стадии развития: 7 Код качества: 1 Комментарии: у

День цикла: 7.5 Код стадии развития: 7 Код качества: 1 Комментарии: у


День цикла: 7.5 Код стадии развития: 7 Код качества: 2 Комментарии: у. к


День цикла: 8 Код стадии развития: 8 Код качества: 1 Комментарии: у


День цикла: 8 Код стадии развития: 8 Код качества: 1 Комментарии: у


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 2 Комментарии: /


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: т


День цикла: 7 Код стадии развития: 4 Код качества: 1 Комментарии: п


Комментарии

а - Если подобные эмбрионы извлечены на седьмой день или позже, но стадия их развития не соответствует ожидаемой, то показатель качества снижается на один балл.

6 - Крупные клетки, выделенные из клеточной массы ранее 16-клеточной стадии, составляют не

более 15 % всего клеточного материала до стадии поздней морулы.

с - Отдельные большие бластомеры указывают на то. что компактизация не завершена и он является более ранним.

d - Выделенные или маленькие бластомеры составляют менее чем 15 % от всей клеточной массы, эмбрион соответствует стадии развития.

е - Сперматозоиды на зоне пеллюцида.

f - Выделенные клетки или дебрис (посторонние включения) представляют трудности для определения наличия, качества и жизнеспособности эмбриона.

д - Код качества 3 относится к эмбрионам, у которых менее 50 % клеток в пределах зоны пеллюцида.

Л - Эмбрионы содержат качественные клетки, но их очень мало. Если эмбриональных клеток менее 25 % всего клеточного материала, им присваивают код качества 4 (непригодные).

/- Неправильная форма и изменения в развитии полости бластоцисты.

J - Сжатие полости бластоцисты считается нормальным физиологическим процессом, что не снижает качественную оценку.

к - Выделение клеток на стадиях экспандированной. полностью экспактированной и вылупившейся бластоцисты часто сжимают зону пеллюцида в случае физиологического коллапса или при введении криопротектора.

/ - Эмбрион имеет плоскую или вогнутую зону пеллюцида. что может послужить причиной его фиксации в чашке Петри или пайете. Этот дефект не позволяет дать им высшую оценку, но не является причиной выбраковки в рамках определенных коммерческих соглашений, если нет других причин для снижения оценки.

т - Посторонние клеточные включения на поверхности зоны пеллюцида указывают, что эмбрион не был отмыт надлежащим образом.

п - Эмбрион имеет трещину зоны пеллюцида. Эмбрионы, не имеющие интактную зону пеллюцида в интернациональных коммерческих программах, не утилизируют.

Приложение В (рекомендуемое)

Пример оформления документа, подтверждающего благополучие животных, от которых получены эмбрионы, а также соответствие условий получения и замораживания эмбрионов международным требованиям

Ветеринарный сертификат на эмбрионы крупного рогатого скота

Страна..........................................................................................

Учреждение, выдавшее сертификат....................................................

Раздел 1 Происхождение эмбрионов

Место происхождения эмбрионов (страна, край, республика, область.

район)...........................................................................................

Название центра (пункта) сбора эмбрионов..........................................

Вид упаковки.................................................................................

Маркировка...................................................................................

Название и адрес экспортера..............................................................

Раздел 2 Место назначения эмбрионов

Место назначения эмбрионов..............................................................

Страны транзита...............................................................................

Пункт пересечения границы...............................................................

Название и адрес получателя..............................................................

Средство транспортировки.................................................................

Раздел 3 Информация о состоянии здоровья Настоящим удостоверяется следующее:

1    Экспортируемые эмбрионы крупного рогатого скота получены от здоровых племенных животных.

2    Животные-доноры находились под наблюдением ветеринарных специалистов в хозяйствах и

стадах, благополучных по инфекционным и инвазионным заболеваниям, в течение не менее шести месяцев до отбора спермы и эмбрионов:    туберкулеза (tuberculosis), паратуберкулеэа

(paratuberculosis). бруцеллеза (brucellosis), лейкоза (leucosis), инфекционного ринотрахеита (rhinotracheitis infectiosa bovum), вирусной диареи (diarrhea viralis bovum), трихомоноза (trichomoniasis), кампилобактериоза (campylobactehosis), сибирской язвы (anthrax), блутанга (bluetoungue), эпизоотического аборта (epizooticsl abortus), лептоспироза (leptospirosis), хламидиоза (chlamydiosis), микоплазмоза (mycoplasmosis), чумы (pestis bovum), инфекционной плевропневмонии крупного рогатого скота (pleuropneumonis infectiosa bovum). ящура (aphtae epizooticae).

3    Поголовье животных пункта, где получены эмбрионы, подвергается регулярным диагностическим исследованиям: содержание животных и извлечение эмбрионов проводится с соблюдением санитарных требований.

Производитель................. донор...............исследовались на следующие заболевания с

отрицательными результатами:

1)    туберкулез......................................................................

2)    паратуберкулез................................................................

3)    бруцеллез........................................................................

4)    лейкоз.............................................................................

5)    инфекционный ринотрахеит.................................................

6)    вирусная диарея................................................................

7)    трихомоноз.....................................................................

8)    кампилобактвриоз............................................................

9)    вибриоз..........................................................................

10)    лептослироз...................................................................

11)    хламидиоз.....................................................................

12)    микоплазмоэ..................................................................

13)    другие болезни..............................................................

4    Животные-доноры обрабатывались...........................................

препаратом в дозировке, рекомендуемой производителем.

5    Племенные животные (доноры спермы и эмбрионов) протестированы на достоверность происхождения.

6    У животных, от которых получены эмбрионы, их родителей и потомства нет генетически обусловленных заболеваний.

7    Сперма, использованная для осеменения животных-доноров. отвечает требованиям для

экспорта в........................................................

(место назначения)

Копия ветеринарного сертификата на сперму прилагается.

8    Самки-доноры содержались в одном и том же хозяйстве в течение 60 дней перед извлечением эмбрионов и не имели контакта с животными, ввезенными в страну в течение последних 12мес.

9    Эмбрионы были собраны и обработаны сотрудниками указанного выше цента (пункта), который:

а)    уполномочен и имеет разрешение, позволяющее заниматься данным видом деятельности:

б)    осуществил получение, обработку, хранение и транспортирование эмбрионов в соответствии с методами, рекомендованными Международным обществом трансплантации эмбрионов (IETS) и Всемирной организацией здравоохранения животных.

10    Среды, инструменты для сбора, обработки и хранения эмбрионов свободны от патогенных микроорганизмов и безопасны для эмбрионов.

11    Эмбрионы помещены в пайеты. которые маркированы в соответствии с руководством Международным обществом трансплантации эмбрионов VETS).

12    Эмбрионы заморожены в.......................................................

CtKAjatw «фислрогекгор и раяим аэмораниаанйв)

13    Контейнер для транспортирования очищен и продезинфицирован безопасными для эмбрионов средствами и заполнен жидким азотом.

14    Режим оттаивания:................................................................

Опись эмбрионов

контейнера

N*

пайеты

Характеристика

эмбриона

Дата получения эмбриона

Кличка и номер донора

Кличка и номер быка

Информация о животных

Порода

Бы*

Доиоо эмбрионов (коооаа/телка)

Дата

извлечении

эмбрионов

Кличка

Регистра-

номер

дата

рождении

продуй-

тиоиые

качества

кличка

регистра

ционный

номер

дата

рождении

продук

тивность

Должностное лицо органа

исполнительной власти.

уполномоченное выдавать

ветеринарный сертификат_/

«_»_20_г.

М.П.

Библиография

[1) Единые ветеринарные (ветеринарно-санитарные) требования, предъявляемые к товарам, подлежащим ветеринарному контролю (надзору), утвержденные Решением Комиссии Таможенного союза от 18 июня 2010 г. № 317

|2) Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. Утверждена Госагропромом СССР 05.06.87

[3) Stringfellow D.A. Seidel S.M: Manual of the International Embryo Transfer Society: A procedural guide and general information for the use of embryo transfer technology emphasizing sanitary procedures. 3rd edition. Savoy. IL: International Embryo Transfer Society: 1998.172 p.

|4] Кодекс здоровья наземных животных МЭБ. 2012 г., том 1

Действуют на территории Таможенного союза.

УДК 636.082.4:006.354    МКС 11.220

Ключевые слова: средства воспроизводства, эмбрионы, крупный рогатый скот, животные-реципиенты. доноры яйцеклеток, доноры эмбрионов

Подписано в печать 02.02.2015. Формат 60x847».

Уел. печ. л. 2.79. Тираж 36 экз. Зак. 437.

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ»

123995 Москва. Гранатный лер.. 4.