allgosts.ru11. ЗДРАВООХРАНЕНИЕ11.220. Ветеринария

ГОСТ 23681-79 Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная. Технические условия

Обозначение:
ГОСТ 23681-79
Наименование:
Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная. Технические условия
Статус:
Действует
Дата введения:
06/30/1980
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
11.220

Текст ГОСТ 23681-79 Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная. Технические условия



ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

СОЮЗА ССР

3K53BESSBS2K

СПЕРМА ЖЕРЕБЦОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ СВЕЖЕПОЛУЧЕННАЯ

ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ

ГОСТ 23681-79

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ

Москва

РАЗРАБОТАН Министерством сельского хозяйства СССР ИСПОЛНИТЕЛИ

Н. Г. Балашов, Г. ▲. Голикова, М. В. Косенко, ▲. И. Науменков, В. Н. Родина, Н. К. Романькова, Е. Л. Фомина, Н. Ф. Чуклов

ВНЕСЕН Министерством, сельского хозяйства СССР

Член Коллегии А. Д. Третьяков

УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государст-венного комитета СССР по стандартам от 4 июня 1979 г. № 1997

УДК 619:611-031.11:006.35    Группа P3f

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

СПЕРМА ЖЕРЕБЦОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ СВЕЖЕПОЛУЧЕННАЯ

Технические условия

Fresh пол-diluted sperm of stallions. Specification

ГОСТ

23681—79

ОКП 989510

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 4 июня 1979 г. № 1997 срок действия установлен

с 01.07.1980 г. до 01.07.1985 г.

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на свежеполученную неразбавленную сперму, взятую в искусственную вагину от жеребцов в возрасте 3 лет и старше и предназначенную для искусственного осеменения.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1.    Свежеполученная неразбавленная сперма жеребцов должна быть сохранена не более 30 мин и соответствовать требованиям настоящего стандарта.

1.2.    Сперму получают от здоровых жеребцов с оплодотворяющей способностью спермы не менее 55%.

Примечание. Допускается с разрешения Министерства сельского хозяйства СССР или министерства сельского хозяйства союзной республики получать сперму от высококлассных жеребцов или жеребцов с ценными в генетическом отношении признаками с оплодотворяющей способностью спермы менее 55%.

1.3.    Свежеполученная неразбавленная сперма жеребцов по органолептическим, физическим, биологическим и морфологическим показателям должна соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 1.

1.4.    Сперма, предназначенная для замораживания, должна иметь резистентность к холодовому шоку не ниже 0,1; коэффициент осмотической (физиологической) резистентности спермиев должен быть не ниже 1.

Издание официальное

Перепечатка воспрещена ©Издательство стандартов, 1979

Таблица I

Наименование показателя

Характеристика и норма

Внешний вид

Однородная жидкость светло-серого цвета, без хлопьев, крови и гноя

Концентрация спермиев, млн/мл, не менее Подвижность спермиев, баллы, не менее Выживаемость спермиев при 2—5° С при разбавлении спермы 1 : 3 лактозо-хелато-цитратно-желточной средой:

показатель абсолютной выживаемости (5), не

150

5,0

менее

450

выживаемость, ч, не менее

Количество спермиев с анормальной морфоло-

150

гией, %, не более

20

Резистентность к холодовому шоку и коэффициент осмотической (физиологической) резистентности спермиев определяют периодически не реже одного раза в квартал.

1.5. Сперма по ветеринарно-санитарному состоянию должна соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 2.

Таблица 2

Наименование показателя

Норма

Общее количество бактерий в 1 мл, не более

5000

Коли-титр, не более

0,1

Патогенные и условно патогенные микроорга-

Не допускаются

низмы

Концентрация водородных ионов (pH) при

19±1°С

7,3 ±0,4

Общее количество бактерий, коли-титр, патогенные и условно патогенные бактерии, концентрацию водородных ионов (pH) определяют предприятия искусственного осеменения периодически не реже одного раза в квартал в лабораториях государственной ветеринарной службы.

2. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

2.1.    Метод отбора проб

2.1.1.    Отбор проб — по ГОСТ 20909.1—75.

2.2. Внешний вид, цвет, наличие или отсутствие хлопьев, крови, гноя определяют, осматривая сперму в мензурке в проходящем свете при периодическом встряхивании мензурки.

2.3.    Концентрацию спермиев определяют в счетной камере по ГОСТ 20909.5—75 со следующим изменением: сперму разбавляют в 10 или 20 раз, набирая ее до отметки 0,5 или 1,0 и заполняя 3%-ным раствором хлористого натрия до отметки 11.

2.4.    Определение подвижности спермиев — по ГОСТ 20909.4—75 со следующим изменением: раствор лимоннокислого натрия к капле спермы не добавляют.

2.5.    Определение показателя абсолютной выживаемости (S) и выживаемости спермиев в часах — по ГОСТ 20909.4—75 со следующим изменением: сперму жеребцов разбавляют 1 : 3 лак-тозо-хелато-цитратно-желточной средой следующего состава:

вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72— 100 мл; лактоза — 11 г; хелатон — 0,1 г;

натрия бикарбонат 4,2%-ный раствор — 0,2 мл; натрия цитрат 35,7%-ный раствор — 0,25 мл; желток куриного яйца — 1,6 г; спермосан-3 по ГОСТ 22636—77 — 30000 ЕД.

2.6.    Определение количества спермиев с анормальной морфологией — по ГОСТ 20909.3—75.

2.7.    О п р е д е л е н и е резистентности спермиев к холодовому шоку

Сущность метода заключается в определении выживаемости спермиев после быстрого их охлаждения до температуры 1—3°С.

2.7.1.    Аппаратура, материалы и реактивы Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284—67;

термостат ТМ-1 для микроскопа; стекла предметные по ГОСТ 9284—75;

стекла покровные размером 18X18 мм по ГОСТ 6672—75; палочки стеклянные или пипетки пастеровские; пробирки стеклянные вместимостью 1,5 мл и более; штатив для пробирок;

глюкозу по ГОСТ 6038—74, 7%-ный раствор.

2.7.2.    Подготовка к испытанию

Перед испытанием готовят на прокипяченной дистиллированной воде 7%-ный раствор глюкозы.

В чистые флаконы, подогретые до 30°С, разливают по 1 мл спермы и добавляют по 3 мл 7%-ного раствора глюкозы, подогретого до 30°С. Все перемешивают.

Готовят ванну со льдом с температурой 1—2°С.

2.7.3.    Проведение испытания

В пипетку набирают 0,5 мл спермы, разбавленной 7%-ным раствором глюкозы, и помещают в тонкостенные 1,5-миллилит-

ровые стеклянные пробирки, из расчета на каждую пробу спермы не менее четырех пробирок.

Пробирки со спермой помещают в водяную баню при температуре 37°С на 5 мин. Затем две пробирки с исследуемой спермой переносят в ванну с тающим льдом (температура 1—2°С) и выдерживают 20 мин. Оставшиеся две пробирки выдерживают 20 мин при комнатной температуре.

Подвижность спермиев определяют под микроскопом по ГОСТ 20909.4—75 с изменением, указанным в п. 2.4.

2.7.4. Обработка результатов

Резистентность спермиев к холодовому шоку (Rx) вычисляют по формуле

йл

где а 1 — подвижность спермиев после холодового шока;

а2 — подвижность спермиев в пробирках, выдержанных 5 мин при 37°С и 20 мин при комнатной температуре.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемое расхождение между результатами параллельных определений не должно превышать ±10%'.

Пример. Подвижность спермиев в пробирках, выдержанных 5 мин при 37°С и 20 мин при комнатной температуре,— 6,0 баллов, а спермиев в пробирках, подвергнутых холодовому шоку,— 1,0 балл.

Следовательно, резистентность к холодовому шоку равна

U0

6,0

0,16.

2.8. Определение коэффициента осмотической (физиологической) резистентности спермиев

Для определения коэффициента осмотической (физиологической) резистентности спермиев устанавливают осмотическую (физиологическую) резистентность, а затем вычисляют коэффициент осмотической (физиологической) резистентности.

2.8.1.    Определение осмотической (физиологической) резистентности спермиев

Сущность метода заключается в определении устойчивости спермиев к действию гипотонического раствора глюкозы.

2.8.1.1.    Аппаратура, материалы и реактивы

Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284—67;

термостат ТМ-1 для микроскопа;

флаконы вместимостью 10—15 мл;

микропипетки стеклянные;

колбы стеклянные вместимостью 100 мл по ГОСТ 1770—74;

стекла предметные по ГОСТ 9284—75;

стекла покровные по ГОСТ 6672—75;

глюкозу по ГОСТ 6038—74, 3, 4, 5 и 6%-ный растворы;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72.

2.8.1.2.    Подготовка к испытанию

При определении осмотической резистентности свежеполу-ченной неразбавленной спермы должны строго соблюдаться правила, предупреждающие холодовый шок спермиев. Растворы и лабораторная посуда, применяемые для проведения испытания, должны быть чистыми и подогретыми до 30—35°С.

Берут по два пенициллиновых флакона с раствором глюкозы каждой из концентрации глюкозы. Глюкозу разливают по 2 мл в каждый флакон. Флаконы закрывают резиновыми пробками и ставят в термостат при температуре 30—35°С на 10— 15 мин.

2.8.1.3.    Проведение испытания

В каждый флакон с раствором глюкозы вносят по 0,2 мл испытуемой спермы. Получают разбавление 1 : 10. Пробирки с разбавленной спермой выдерживают 20 мин при комнатной температуре 18—22°С.

Подвижность спермиев в разбавленной капле определяют по ГОСТ 20909.4—75 с изменением, указанным в п. 2.4.

2.8.1.4.    Обработка результатов

Осмотическую резистентность спермиев (R0) выражают значением концентрации раствора глюкозы, при которой подвижность спермиев составляет не менее 0,5 балла. Чем ниже концентрация раствора глюкозы, в которой спермин остаются живыми, тем выше осмотическая резистентность спермиев.

Пример. В пробирке 4 (3%-ный раствор глюкозы) определена единичная подвижность спермиев, а в пробирке 3 (4%-ный раствор глюкозы) подвижность спермиев 0,5 балла. Следовательно, значение осмотической резистентности спермиев равно 4. Или, если в пробирке 4 мертвые спермин, в пробирке 3 — единичная подвижность спермиев, а в пробирке 2 (5%-ный раствор глюкозы) — подвижность 0,5 балла, то осмотическая резистентность спермиев равна 5,0.

2.8.2. Коэффициент осмотической (физиологической) резистентности (RK) вычисляют по формуле

где 4 — постоянный коэффициент;

Ro — осмотическая резистентность (концентрация раствора глюкозы, %).

2.9.    Определение "'общего количества бактерий — по ГОСТ 20909.2—75.

2.10.    Определение коли-титра спермы — по ГОСТ 20909.2—75.

2.11.    Патогенные и условно патогенные микроорганизмы устанавливают по гемолитическим свойствам, плазмокоагуляции и способности убивать белых мышей при подкожном или внут-рибрюшинном введении культуры. При проявлении одного из указанных признаков микроорганизмы считают патогенными.

2.12.    Определение концентрации водородных ионов (pH) спермы — по ГОСТ 20909.5—75.

Редактор Н. Е. Шестакова Технический редактор В. Ю. Смирнова Корректор Е. И. Евтеева

Сдано в яаб. 21.06 Г9 Подп. в печ. 08.08.79 0,5 п. л. 0,42 уч.-изд. л. Тир. 6000 Цена 3 ков-

Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов. Москва, Д-557, Новопресненский пер., 3. Тип. «Московский печатник», Москва, Лялин йер., 6. Зак. 899