allgosts.ru11. ЗДРАВООХРАНЕНИЕ11.220. Ветеринария

ГОСТ 27147-86 Вирусвакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГЭ) культуральная. Технические требования и методы испытаний

Обозначение:
ГОСТ 27147-86
Наименование:
Вирусвакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГЭ) культуральная. Технические требования и методы испытаний
Статус:
Действует
Дата введения:
01/01/1988
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
11.220

Текст ГОСТ 27147-86 Вирусвакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГЭ) культуральная. Технические требования и методы испытаний



ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

СОЮЗА ССР

ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОЭНТЕРИТА СВИНЕЙ (ТГЭ)

КУЛЬТУРАЛЬНАЯ

ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ И МЕТОДЫ ИСПЫТАНИИ

ГОСТ 27147-86 (СТ СЭВ 5158-85)

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ

Москва

УДК 615.371:619:006.354    Группа Р31

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОЭНТЕРИТА СВИНЕЙ (ТГЭ) КУЛЬТУРАЛЬНАЯ

Технические требования и методы испытаний

Hog transmissible gastroenteritis (TGE) cultivated viral vaccine. Technical requirements and test methods

ГОСТ

27147—86

(СТ СЭВ 5158—85)

ОКСТУ 9384

Срок действия с 01.01.88 до 01.01.93

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на вирусвакцину против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, изготовленную из авирулентного штамма вируса ТГЭ, выращенного в культуре клеток и подвергнутого сублимационному высушиванию, предназначенную для иммунизации супоросных свиноматок в пунктах, неблагополучных по ТГЭ.

Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 5158—85.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1. Вирусвакцина по своим физическим и иммунобиологическим свойствам должна соответствовать характеристикам и нормам, указанным в таблице.

Наименование показателя

Характеристика и норма

1.    Внешний вид

2.    Наличие посторонней примеси, плесени, трещин флаконов

3.    Массовая доля влаги.

Сухая аморфная масса светло-желтого цвета Не допускается

1,5—3

%

4. Растворимость

5. Контаминация бактериальной и грибковой микрофлорой

При добавлении физиологического раствора вакцина должна растворяться в течение 1—2 мин в равномерную взвесь без хлопьев и комочков Высевы вакцины на питательные среды должны быть без роста микрофлоры после выдерживания при температуре (37±0,5)°С, на агаре Сабуро при температуре (22±2)°С в течение 14 дней

Издание официальное

Перепечатка воспрещена

(6) Издательство стандартов, 1987

Продолжение

Наименование показателя

Характеристика и норма

6. Инфекционная активность в титрах по ТЦД50/смэ

106

не ниже

7. Безвредность

Внутримышечное введение вакцины разведения 1 ; 1 в объеме 2 см3 подсвинкам массой 20— 25 кг не должно вызывать их заболевания и гибель в течение 14 дней

8. Иммуногенная актив

Процент защиты поросят-сосунов, полученных

ность производственного

от вакцинированных свиноматок, должен быть не

штамма

менее 70

2. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

2.1.    Отбор проб

2.1.1.    Для проведения испытания от каждой серии отбирают 25 флаконов, 15 используют для анализа, а десять хранят в архиве государственного контролера в течение 18 мес.

2.1.2.    Флаконы, предназначенные для хранения, сопровождают документом с указанием:

наименования биопрепарата; даты изготовления; номера серии; номера контроля; даты отбора пробы;

общего количества упаковочных единиц; объема серии; срока годности;

обозначения настоящего стандарта; должности и подписи лица, отобравшего пробу.

2.2.    Определение внешнего вида, цвета и наличия посторонней примеси

Для определения внешнего вида, наличия посторонней примеси, плесени, трещин флаконов, изменения консистенции каждый флакон с вакциной тщательно просматривают при дневном свете.

2.3.    Определение массовой доли влаги по ГОСТ 24061—80.

2.4.    Определение растворимости

Сущность метода заключается в определении времени, необходимого для полного растворения лиофилизата в равном объеме соответствующего растворителя.

2.4.1. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

часы;

шприцы инъекционные вместимостью 20 см3 по ГОСТ 18137—77;

канюли инъекционные; раствор физиологический.

2.4.2.    Проведение испытания

В открытый флакон с лиофилизированным препаратом при помощи инъекционного шприца вводят физиологический раствор в равном объеме от исходного объема препарата до лиофилизации.

2.4.3.    Обработка результатов

Препарат после встряхивания должен полностью раствориться в течение 1—2 мин.

2.5.    Определение контаминации бактериальной и грибковой микрофлорой

Сущность метода заключается в определении роста бактерий и грибов в посевах из проб вакцины на питательные среды.

2.5.1.    Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

термостат с температурой нагрева (22±2)°С и (37±0,5)°С;

флаконы вместимостью 100 см3;

пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 см3 по ГОСТ 20292—74; раствор физиологический;

бульон мясо-пептонный (МПБ) по ГОСТ 20730—75; бульон мясо-пептонный печеночный (МППБ) под вазелиновым маслом;

агар мясо-пептонный (МПА); агар Сабуро.

2.5.2.    Проведение испытания

Для проведения испытания берут не менее 5 флаконов. Содержимое каждого флакона растворяют в 10—12 см3 стерильного физиологического раствора. Из каждого флакона берут по 0,5 сми делают посевы не менее чем в две пробирки с каждой питательной средой и агаром Сабуро. Питательные среды с посевами инкубируют при температуре (37±0,5)°С, а агар Сабуро при температуре (22±2)°С в течение 14 дней.

2.6.    Определение инфекционной активности Сущность метода заключается в определении титра вакцины

на основании вызываемого цитопатического действия в культуре клеток и вычислении ТЦД 50/см3.

2.6.1. Аппаратура и материалы Для проведения испытания применяют: термостат с температурой нагрева (37± 0,5)°С; микроскоп;

пробирки по ГОСТ 25336—82;

сосуды стеклянные для выращивания клеток и вируса; пипетки вместимостью 1 и 10 см3 по ГОСТ 20292—74;

раствор физиологический; среду поддерживающую; культуру клеток.

2.6.2.    Подготовка к испытанию

Из лиофилизага вакцины готовят до 10~7 десятикратные разведения на физиологическом растворе. Для испытания серии отбирают свежую культуру клеток в 20 пробирках со сплошным монослоем. В стерильных условиях среду роста заменяют свежей поддерживающей средой. В каждом опыте оставляют 4 пробирки с незараженной культурой клеток.

2.6.3.    Проведение испытания

По четыре пробирки с восприимчивой культурой клеток заражают разведениями вакцины от 10~3 до 10~7, добавляют 1 см3 разведения вируса и выдерживают в термостате при температуре {37±0,5)°С. При помощи микроскопа контролируют цитопатичес-кие изменения в испытуемых инфицированных культурах. Конечный учет культур клеток проводят не ранее чем через 5 дней после заражения.

2.6.4.    Обработка результатов

Обработку результатов проводят вычислением титра инфекционное™ по методу Кербера или Рида и Менча.

2.7. Определение безвредности

2.7.1.    Сущность метода заключается в выявлении реакции подсвинков в ответ на парэнтеральное введение им удвоенной дозы вакцины.

2.7.2.    Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют: термометр для измерения температуры тела; шприцы инъекционные вместимостью 10 см3 по ГОСТ 18137—77;

канюли инъекционные; раствор физиологический.

2.7.3.    Подготовка к испытанию

На каждую серию вакцины берут двух здоровых подсвинков массой 20—25 кг и измеряют у них температуру в течение 8 дней. В день испытания лиофилизат вакцины растворяют 1 : 1 в физиологическом растворе с таким расчетом, чтобы в 2 см3 разведения вакцины содержалось вируса в дозе 2 * 10е ТЦДзо/см3.

2.7.4.    Проведение испытания

Для проведения испытания двум подсвинкам вводят разведение вакцины внутримышечно в дозе 2* 106 ТЦД 50/см* в объеме

2 см3.

2.7.5.    Обработка результатов

Серию вакцины считают безвредной, если в течение 14 дней после вакцинации клинические проявления у привитых животных не наблюдались.

2.8. Определение иммуногенности

Сущность метода заключается в испытании посевного вируса ТГЭ (производственного штамма), используемого для изготовления вакцины, в опыте по защите поросят-сосунов.

2.8.1.    Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

шприц инъекционный вместимостью 5 см3 по ГОСТ 18137—77;

канюли инъекционные;

семь вакцинальных доз посевного вируса ТГЭ с титром не ниже 106 ТЦД50/смз , используемого для изготовления вакцины;

3 см3 вирулентного вируса ТГЭ, вызывающего у незащищенных поросят мортальность выше 70%.

2.8.2.    Подготовка к испытанию

При испытании иммуногенности посевного вируса ТГЭ (производственного штамма), используемого для изготовления вакцины, предназначенной для перорального применения, трем супоросным свиноматкам за 2—3 недели до ожидаемого опороса вводят перорально с сухим кормом ежедневно в течение 7 дней вирус ТГЭ в дозе 106 ТЦД 50/смз . В качестве контроля оставляют трех не-вакцинированных свиноматок.

2.8.3.    Проведение испытания

Не позднее 3 дней после опороса заражают не менее чем по 10—20 поросят-сосунов в испытуемой и контрольной группах вирулентным вирусом ТГЭ. Для этого каждому поросенку вводят перорально вирулентный вирус в дозе 103 ЛД50/см8 в объеме 3 см3. В течение 14 дней ежедневно наблюдают за поросятами, погибших поросят удаляют.

2.8.4.    Обработка результатов

Процент защиты испытуемой группы поросят вычисляют по разности между процентом выживаемости поросят в испытуемой группе и процентом выживаемости поросят в контрольной группе. Выживаемость в контрольной группе должна составлять не более 30%.

3. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЯ

Для каждой проверенной серии вирусвакцины составляют протокол испытания, который должен содержать следующие данные: наименование штамма вируса ТГЭ; использованный метод;

результат испытания показателей качества; дату изготовления;

подпись лица, проводившего испытание; обозначение настоящего стандарта.

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Госагропромом СССР ИСПОЛНИТЕЛИ

Ю. Л. Малахов,, д-р вет. наук; Э. В. Ивановский, д-р вет. наук, Л. А. Мельникова, д-р мед. наук; И. И. Касюк

2.    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от II декабря 1986 г. № 3762

3.    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4.    ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД, на который дана ссылка

Номер пункта, подпункта, перечисления, приложения

ГОСТ 18137—77

2.4.1; 2.8.1

ГОСТ 20292—74

2.5.1; 2.6.1

ГОСТ 20730—75

2.5.1

ГОСТ 24061—80

2.3

ГОСТ 25336—82

2.6.1

Редактор Г, П. Шсииина Технический редактор М. И. Максимова Корректор И. В. Асауленко

Сдано в наб. 30.12.86 Поди, в печ. 24.02.87 0,5 уел. п. л. 0,5 уел. кр.-отт. Й,38 уч.-изд. л. Тир. 8009    Цена 3 кон.

Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов, 123840, Москва, ГСП, Новопресненекий пер., 3 Тип. «Московский печатник». Москва, Лялин пер., 6. Зак. 4