База ГОСТовallgosts.ru » 07. МАТЕМАТИКА. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ » 07.100. Микробиология

ГОСТ Р 57650-2017 Продукция микробиологическая. Кормобактерин. Технические условия

Обозначение: ГОСТ Р 57650-2017
Наименование: Продукция микробиологическая. Кормобактерин. Технические условия
Статус: Принят

Дата введения: 08/01/2018
Дата отмены: -
Заменен на: -
Код ОКС: 07.100.30, 65.020
Скачать PDF: ГОСТ Р 57650-2017 Продукция микробиологическая. Кормобактерин. Технические условия.pdf
Скачать Word:ГОСТ Р 57650-2017 Продукция микробиологическая. Кормобактерин. Технические условия.doc


Текст ГОСТ Р 57650-2017 Продукция микробиологическая. Кормобактерин. Технические условия



ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ    ГОСТР

стандарт    57650—

российской    2017

ФЕДЕРАЦИИ

ПРОДУКЦИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ. КОРМОБАКТЕРИН

Технические условия

Издание официальное

Москва

Стандартииформ

2017

ГОСТ Р 57650—2017

Предисловие

1    РАЗРАБОТАН Ассоциацией «Некоммерческое партнерство Координационно-информацион-ный центр государств — участников СНГ посближениюрегупяторных практик» при участии ООО «Центр Промышленной Биотехнологии имени Княгини Е. Р. Дашковой»

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 326 «Биотехнологии»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ приказом Федеральногоагентства по техническому регулированию и метрологии от 12 сентября 2017 г. № 1051 -от

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. № 162-ФЗ «О стандартизации е Российской Федерации». Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе «Национальные стандарты». а официальный текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет ()

© Стандартинформ.2017

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

ГОСТ Р 57650—2017

Содержание

1    Область применения...................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................1

3    Технические требования................................................3

4    Требования безопасности...............................................4

5    Правила приемки.....................................................4

6    Методы испытаний....................................................4

7    Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение............................11

8    Указания по применению...............................................12

9    Гарантии изготовителя.................................................12

Библиография........................................................13

in

ГОСТ Р 57650—2017

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРОДУКЦИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ. КОРМОБАКТЕРИН

Технические условия

Microbiological products. Cormobactennum. Specifications

Дата введения — 2017—08—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на кормобактерин. представляющий собой высокобелковую и витаминную биомассу, которая используется е качестве белковой добавки в кормовые раиионы сельскохозяйственных животных и птицы.

2    Нормативные ссылки

S настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.008 Система стандартов безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.044 (ИСО 4589) Система стандартов безопасности труда. Пожаровэрывоопасность веществ и материалов. Номенклатура показателей и методы их определения

ГОСТ 12.2.003 Система стандартов безопасности труда. Оборудование производственное. Общие требования безопасности

ГОСТ 12.4.021 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 12.4.028 Система стандартов безопасности труда. Респираторы ШБ-1 «Лепесток*». Технические условия

ГОСТ 12.4.103 Система стандартов безопасности труда. Одежда специальная защитная, средства индивидуальной защиты ног и рук. Классификация

ГОСТ 12.4.253 Система стандартов безопасности труда. Средства индивидуальной защиты глаз. Общие технические требования

Г ОСТ 245 Реактивы. Натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный. Технические условия ГОСТ 857 Кислота соляная синтетическая техническая. Технические условия ГОСТ 1770 (ИС01042. ИСО 4788) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки. колбы, пробирки. Общие технические условия ГОСТ 2081 Карбамид. Технические условия

ГОСТ 2228 Мешки из бумаги и комбинированных материалов. Общие технические условия ГОСТ 4159 Реактивы. Йод. Технические условия

ГОСТ 4198 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия

Падение официальное

1

ГОСТ Р 57650—2017

ГОСТ 4208 ческие условия ГОСТ 4232 ГОСТ 4233 ГОСТ 4525 ГОСТ 4528 ГОСТ 5100 ГОСТ 5833 ГОСТ 5962 ГОСТ 6038 ГОСТ 6259 ГОСТ 6672 ГОСТ 6691 ГОСТ 6709 ГОСТ 8515 ГОСТ 9147 ГОСТ 9284 ГОСТ 10354 ГОСТ 11109 ГОСТ 11773 ГОСТ 12026 ГОСТ 13805 ГОСТ 16280 ГОСТ 17206 ГОСТ 19651 ГОСТ 20730

Реактивы. Соль закиси железа и аммония двойная сернокислая (соль Мора). Техни-

Реактивы. Калий йодистый. Технические условия Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия Реактивы. Кобальт хлористый 6-водный. Технические условия Реактивы. Кобальт (II) азотнокислый 6-водный. Технические условия Сода кальцинированная техническая. Технические условия Реактивы. Сахароза. Технические условия

Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия

Реактивы. О-глюкоэа. Технические условия

Реактивы. Глицерин. Технические условия

Стекла покровные для микролрепаратое. Технические условия

Реактивы. Карбамид. Технические условия

Вода дистиллированная. Технические условия

Диаммонийфосфат. Технические условия

Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия Стекла предметные для микропрепаратов. Технические условия Пленка полиэтиленовая. Технические условия Марля бытовая хлопчатобумажная. Общие технические условия Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный. Технические условия Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия Пвптонсухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия Агар пищевой. Технические условия Агар микробиологический. Технические условия Диаммонийфосфат кормовой. Технические условия

Питательные среды. Бульон мясо-пептонный (для ветеринарных целей). Техничес

кие условия

ГОСТ 21241 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 22967 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 25706 Лулы. Типы, основные параметры. Общие технические требования

ГОСТ 28489 Микроскопы световые. Термины и определения

ГОСТ 29227 (ИСО 855-1) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 32044.1 (ИСО 5983-1) Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого протеина. Часть 1. Метод Къельдаля

ГОСТ 32901 Молоко и молочная продукция. Методы микробиологического анализа

ГОСТ Р 8.857 Государственная система обеспечения единства измерений. pH-метры. Методика

поверки

ГОСТ Р 51232 ГОСТ Р 53228 еания. Испытания ГОСТ Р 54951 ГОСТ Р 55064 ГОСТ Р 57233 ГОСТ Р 57234

Вода питьевая. Общие требования к организации и методам контроля качества Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требо-

Корма для животных. Определение содержания влаги Натр едкий технический. Технические условия

Продукция микробиологическая. Правила приемки и методы отбора проб Продукция микробиологическая. Упаковка, маркировка, транспортирование и хра

нение

ГОСТ Р 57248 Препараты ферментные. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ Р 57249 Препараты ферментные. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты*, который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта сучетом всех внесенных еденную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на кото

2

ГОСТ Р 57650—2017

рый дане датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения нестоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана двтироввннвя ссылке, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется принять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение. в котором дана ссылка на него, рекомендуется принять в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Технические требования

3.1    Кормобактерин получают сбраживанием барды ацетонобутилового производства (отходов переработки растительного сырья: муки и патоки) культурой Azotobactersuisc последующим концентрированием путем выпаривания и сушки.

Препарат должен соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготавливаться по технологическому регламенту с соблюдением действующих санитарных правил и норм.

3.2    Требования к сырью

Для производства кормобактерина должны применяться сырье и вспомогательные материалы, соответствующие требованиям технологического регламента:

•    культура Azotobactersuis. которая по показателям должна соответствовать утвержденным требованиям:

•    барда ацетонобутилового производства;

•    карбамид по ГОСТ 2081:

•    диаммоний фосфат технический по ГОСТ 8515 или

•    диаммоний фосфат кормовой по ГОСТ 19651;

-    меласса свеклосахарная по действующей нормативно-технической документации (НТД):

•    кислота соляная синтетическая техническая по ГОСТ 857 или

•    кислота соляная техническая по [1]:

•    кобальт хлористый 6-водный по ГОСТ 4525 или

•    кобальт азотнокислый 6-водный по ГОСТ 4528:

-    натр едкий технический по ГОСТ Р 55064;

•    сода кальцинированная техническая по ГОСТ 5100.

3.3    По органолептическим, физико-химическим и биологическим показателям кормобактерин должен соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице 1.

Таблица!— Характеристики препарата кормобактерин

Nt п/п

Наименование показателя

Характеристика и нерпа

Метод испытания

1

внешний вид и цвет

Однородный порошок коричневого цвета

По 6.2

2

Массовая доля влаги. %. не более

10.0

По ГОСТ Р 54951

3

Массовая доля сырого протеина в пересчете на абсолютно сухое вещество. %. не менее

40.0

По 6.4

4

Мвссовая доля белка в пересчете на абсолютно сухое вещество (С8). %, не менее

20.0

По 6.5

S

Число микробных клеток’’, тыс./r, не более

100

По 6.6

6

Количество сальмонелл в 50 г продукта21

Отсутствуют

По 6.7

7

Количество колиформных бактерий в 0.1 г продукта

Отсутствуют

По 6.8

8

Безвредность в тест-дозе, мг:

•    на одного цыпленка

•    на одну мышь

600

100

По 6.9

11 Показатель по пунктам 4. 5. 8 изготовитель определяет в каждой 10-й партии кормобактерина.

2> Нормы по показателям пунктов 6. 7 предприятие-изготовитель гарантирует. Показатель определяется по требованию потребителя.

3

ГОСТ Р 57650—2017

4 Требования безопасности

4.1    Кормобаюгерин лостепени воздействия наорганиэм в соответствии с ГОСТ 12.1.007 относится к веществам 4-го класса опасности по [2].

Предельно допустимая концентрация (ПДК) кормобактерина в воздухе рабочей зоны согласно ГОСТ 12.1.005 должна составлять 6 мг/м3.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) кормобактерина в атмосферном воздухе населенных мест — 0,03 мг/м3.

4.2    При работе с микроорганизмами следует соблюдать требования биологической безопасности поГОСТ 12.1.008.

4.3    При работес препаратом необходимо пользоваться индивидуальным средствами защиты:

•    для органовдыхания — респиратором ШБ-1 «Лепесток» по ГОСТ 12.4.028:

•    глаз — очками защитными по ГОСТ 12.4.253;

-    рук — перчатками по ГОСТ 12.4.103.

4.4    При производстве, применении и испытании препарата должны соблюдатьобщие требования безопасности по ГОСТ 12.2.003 и санитарно-эпидемиологические правила по [3].

4.5    Все работы в помещенияхс препаратом следует проводить при работающей общей и местной приточно-вытяжной вентиляции в соответствии с ГОСТ 12.4.021.

4.6    Кработеслрепаратом не допускаются лица с хроническими воспалительными заболеваниями органов дыхания, зрения, кожи и лица, склонные к аллергическим реакциям.

4.7    Все работники, контактирующие с препаратом, проходят периодические медицинские осмотры по [4].

4.8    КормобактеринвсоответствиисГОСТ 12.1.044относитсякчислу пожаро-взрывоопасных препаратов:

-    нижний концентрационный предел воспламенения — 115 г/м3;

•    температура вспышки — 195 *С;

•    температура тления — 204 “С:

•    температура самовоспламенения — 475 вС.

Тушение следует проводить распылением воды со смачивателем или пеной.

5    Правила приемки

Кормобактерин сдают и принимают в установленном порядке в соответствии с требованиями ГОСТ Р 57233.

6    Методы испытаний

6.1    Отбор проб

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ Р 57248.

Масса объединенной пробы должна составлять не менее 500 г. Масса пробы, направляемой на анализ или хранение, составляет не менее 100 г.

6.2    Определение внешнего вида и цвета

Определение внешнего вида и цвета препарата проводят визуально по каждой единице фасовки в момент отбора пробили при выделении среднего объема объединенной пробы при использовании автоматического пробоотборника.

6.3    Определение массовой доли влаги — по ГОСТ Р 54951.

6.4    Определение массовой доли сырого протеина

Массовую долю сырого протеина определяют поГОСТ32044.1 (титриметрический метод, скатали-затором 2) со следующим изменением: для отгонки аммиака в приемную колбу наливают 60 см3 раствора серной кислоты концентрацией 0.05 моль/дм3 (0.1 н).

6.5    Определение массовой доли белка

Метод основан на определении в продукте белкового азота с последующим пересчетом на белок. Сущность метода заключается в способности белка давать осадки с солями тяжелых металлов: меди, свинца, ртути, железа, олова и др.

ГОСТ Р 57650—2017

6.5.1    Аппаратура, материалы в реактивы

Для проведения испытания применяют оборудование, материалы и реактивы по ГОСТ 32044.1. а также:

•    весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228, 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов:

•    стаканы стеклянные по ГОСТ 25336. вместимостью 250 см3;

•    воронки Бюхнера по ГОСТ 9147. вместимостью 120 см3:

•    колбы для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336;

•    цилиндры 2—25 лоГОСТ 1770;

•    бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026. марки ФОБ. ФОС или ФОМ.

6.5.2    Проведение испытания

Препарат массой 1.0000 г взвешивают в стакане с точностью до 4-го десятичного знака, затем приливают 15—25 см3 нагретой до кипения дистиллированной воды. Содержимое стакана хорошо перемешивают. Не прекращая перемешивания, приливают цилиндром 25 см3 раствора с массовой долей сернокислой меди 6 % и 25 см3 раствора с массовой долей гидроокиси натрия 1.25 %. Смесь оставляют на 2—3 ч. чтобы жидкость над осадком стала прозрачной. Жидкость и осадок отфильтровывают через вакуум-фильтр. Осадок на фильтрате промывают водой до тех пор. пока фильтрат не станет бесцветным.

Промытый и подсушенный на воздухе осадок с фильтром переносят в колбу для сжигания. Дальнейшее определение белкового азота ведут по ГОСТ 32044.1.

6.5.3    Обработка результатов

Массовую долю белка X в пересчете на абсолютно сухое вещество. %. вычисляют по формуле

^_ (Vi-V2) К 0.0014 6.25 100    m

М {1-0.01ИО    *

где Vy — объем раствора гидроокиси натрия концентрации 0.1 моль/дм3 (0.1 н), израсходованный на титрование 50 см3 раствора серной кислоты концентрации 0.05 моль/дм3 (0.1 н) в контрольном опыте, см3:

V2 — объем раствора гидроокиси натрия концентрации 0.1 моль/дм3 (0.1 н). израсходованный на титрование остатка серной кислоты, не связанный с выделившимся аммиаком при его отгонке. см3;

К — поправочный коэффициент к титру раствора гидроокиси натрия концентрации 0.1 моль/дм3 (0.1 н);

0.0014 —количество азота, эквивалентное 1 см3 точного раствора серной кислоты концентрации 0.05 моль/дм3 (0.1 н);

6,25 — коэффициент для пересчета азота на белок;

М — масса навески препарата, г:

W — массовая доля влаги в кормобактерине. %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 1.0% относительных, а расхождение между результатами, полученными в разных условиях, — 3 % относительных.

6.6 Определение числа микробных клеток

6.6.1 Аппаратура, материалы и реактивы:

•    весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228, 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов:

-    термостат любого типа, обеспечивающий температуру нагрева (37 ± 0.2) *С;

•    лупа с увеличением в 8—10 раз лоГОСТ 25706;

•    прибор для счета колоний бактерии (ПСБ) по [5];

-    колбы 2-250-2 по ГОСТ 25336;

•    пипетки 1.4-2-1 поГОСТ 29227;

•    пробирки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336, вместимостью 10 см3:

•    чашки ЧБН-2 по ГОСТ 25336;

•    натрий хлористый по ГОСТ 4233;

•    агар микробиологический лоГОСТ 17206 или

5

ГОСТ Р 57650—2017

•    агар пищевой по ГОСТ 16260;

•    бульон мясо-пептонный по ГОСТ 20730;

-    вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

-    марля бытовая по ГОСТ 11109.

6.6.2    Подготовка к испытанию

Мясо-пептонный агар готовят по ГОСТ 32901.

6.6.3    Проведение испытания

Препарат массой 1.00 г взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака, помещают в колбу с 99 см3 стерильного физиологического раствора, получают разведение 10'2 и тщательно встряхивают. Из полученной взвеси готовят последующие разведения 10-3 и 10-4.

После оседания взвешенных частии из верхнего слоя жидкости берут суспензию каждого разведения и засевают на 2—Зчашки следующим образом: 1 см3 суспензии, взятой стерильной пипеткой, помещают в центр каждой чашки и заливают около 15 см3 расплавленного и охлажденного до температуры 45 *С мясо-лептонного агара. При посеве и заливке агаром крышку чашки Петри быстро приоткрывают и закрывают.

Сразу после заливки агара содержимое чашки тщательно перемешивают, делая чашками круговые движения на гладкой поверхности стола для равномерного распределения посевного материала. После застывания агара чашки перевертывают крышками вниз, помещают в термостат и выдерживают в течение 48 ч при температуре (37 ± 0,2) ®С.

6.6.4    Обработка результатов

Число выросших колоний подсчитывают в каждой чашке, поместив ее вверх дном (без крышки), пользуясь лупой и прибором для подсчета колоний. Каждую подсчитанную колонию отмечают на дне чашки чернилами. При большом числе колоний и равномерном их распределении дно чашки делят на четыре одинаковых сектора, подсчитывают число колоний в двух-трех секторах, находят среднее арифметическое и умножают на общее число секторов. Таким образом находят общее число колоний, выросших на одной чашке. Для подсчета общего числа микробных клеток в 1.00 г препарата число колоний, выросших на каждой чашке, умножают на соответствующее разведение. Полученные результаты по отдельным чашкам складывают и делят на количество подсчитанных чашек. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

6.7 Метод выявления сальмонелл

6.7.1    Сущность метода

Метод заключается в предварительном обогащении проб в неизбиратепьной жидкой среде, последующем обогащении на жидкой среде, посеве на твердую селективную среду. После инкубирования среда исследуется на присутствие колоний, подозреваемых на сальмонеллы, и в подтверждение их принадпежности к сальмонеллам.

6.7.2    Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды:

-    автоклав электрический или других аналогичных марок;

•    петля бактериологическая;

-    баня водяная любого типа, обеспечивающая температуру нагрева от 20 *С до 100 ®С с точностью терморегуляции ±3 “С;

•    весы лабораторныеобщегоназначения поГОСТ Р53228не ниже 2-го класса точности, снаиболь-шим пределом взвешивания 200 гили других аналогичных типов;

-    дистиллятор;

-    колбы по ГОСТ 25336 типа Ки. вместимостью 2000 см3;

-    лупа по ГОСТ 25706;

•    pH-метр по ГОСТ Р 8.857 или другой прибор для определения pH среды в интервале 1 +14 с погрешностью не более 0,1 ед. pH;

•    микроскоп типа МБИ по ГОСТ 28489 или других аналогичных марок:

-    пинцеты по ГОСТ 21241;

•    пробирки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336 вместимостью 10 см3:

-    пипетки 1.4.5-1.2.5.10 по ГОСТ 29227;

-    пипетки пастеровские:

•    стекла предметные для микролрепаратов по ГОСТ 9284;

•    стекла покровные для микропреларатов по ГОСТ 6672:

•    спиртовки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336;

•    термостат любого типа, обеспечивающий температуру нагрева (5010.2) *С;

6

ГОСТ Р 57650—2017

•    цилиндры 2*10.100.500.1000 по ГОСТ 1770;

•    бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026;

•    чашки ЧБН*2 по ГОСТ 25336;

•    штативы для пробирок;

•    шпатель:

•    агар висмут-сульфитный сухой:

•    бактоагар Плоски рева сухой;

•    среда Левина сухая;

•    среда Эндо сухая;

•    сыворотки поливалентные и моновалентные 0 и Н — агглютинирующие;

•    пептон фирмы «Спора» или фирмы «Рихтер»;

•    пептон сухой для бактериологических целей по ГОСТ 13805;

•    вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

•    натрий хлористый по ГОСТ 4233;

•    натрий фосфорнокислый двуэамещенный по ГОСТ 11773;

•    лактоза по [6];

•    натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-еодный по ГОСТ 245;

•    натрий кислый селенистокислый;

•    питательная среда с индикатором «ВР» и сахарозой, сухая;

- мочевина по ГОСТ 6691.

•    глюкоза ло ГОСТ 6038;

•    мясо-лептонный бульон по ГОСТ 20730;

•    фуксин основной:

•    кислота карболовая;

•    глицерин по ГОСТ 6259;

•    спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962;

•    кристаллвислет:

•    калий йодистый ло ГОСТ 4232;

•    йод кристаллический по ГОСТ 4159;

•    калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 419S:

•    бриллиантовый зеленый;

•    экстракт дрожжевой по (7);

•    сахароза по ГОСТ 5833:

•    феноловый красный индикатор ло [8];

•    соль закиси железа и аммония двойная сернокислая (соль Мора) по ГОСТ 4208:

. среда селенитовая или среда магниевая;

•    вода лептонная;

. среда Ресселя;

•    агартрехсахарныйсмочевиной.

6.7.3 Подготовка к испытанию

6.7.3.1 Состав и приготовление питательных сред

Все компоненты, используемые для приготовления сред, взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака.

Пептонная вода. Состав среды:

пептон......................................................10.00 г.

хлористый натрий...............................................5,00 г.

вода дистиллированная......................................... 1000 см3.

Приготовление среды

К1000 см3 дистиллированной воды добавляют 10,00 г пептона и 5,00 г хлористого натрия, кипятят до растворения пептона, фильтруют и устанавливают pH. равным 7,2—7.4. после чего стерилизуют при

температуре 120 *С в течение 30 мин.

Селенитовая среда. Состав среды:

натрий кислый селенисто-кислый (без теллурита)...........................4.00    г.

пептон.......................................................5.00    г.

натрий фосфорнокислый однозамещенный (безводный).......................3.00    г

лактоза......................................................4,00    г

вода дистиллированная......................................... 1000 см3.

7

ГОСТ Р 57650—2017

Приготовление питательной среды

Вколбу вместимостью 2000 см3 с дистиллированной водой добавляют фосфаты, пептон и лактозу, тщательно перемешивают до растворения и стерилизуют при температуре (112 ± 1) вС втечение 30 мин. Отдельно на стерильной дистиллированной воде готовят растворе массовой долей кислого селенисто* кислого натрия 10 %. который добавляют к среде перед употреблением из расчета 0.4 см3 на 10 см3 сре

ды. Готовая среда должна иметь pH. равный 6.6—7.1.

Магниевая среда. Состав среды:

пептон.......................................................4.20    г;

натрий хлористый...............................................7.00    г:

калий фосфорнокислый одноэамещенный (безводный).......................1,50    г;

экстракт дрожжевой............................................. 20.00    г;

вода дистиллированная.......................................... 890 см3.

Приготовление питательной среды

Все компоненты растворяют при кипении в дистиллированной воде, затем добавляют следующие растворы:

хлористый магний кристаллический................................... 36.00    г:

вода дистиллированная......................................... 90.00 см3:

водный раствор бриллиантового зеленого с массовой долей 0.1 %...............5,00 см3.

Среду разливают в колбы и стерилизуют при температуре (112 ± 1) *С в течение 20 мин.

Среда Ресселя и сухих питательных сред. Состав среды:

сухой питательный агар с индикатором ВР и лактозой........................ 40.00 г;

сухой питательный агар............................................5.00 г;

глюкоза......................................................1,00 г;

вода дистиллированная......................................... 1000 см3.

Приготовление среды

К950см3дистиллированнойводыпоследовательнодобавляют40.00гсухоголитательногоагарас индикатором ВР и лактозой, 5.00г сухого питательного агара. Смесь растворяютпри нагревании докипе-ния. 8 50 см3 дистиллированной воды растворяют 1.00 г глюкозы и добавляют к указанной выше смеси. Среду разливают в стерильные пробирки по 5—6 см3, стерилизуют текучим паром два раза по 30 мин. Трехсахарный агаре мочевиной. Состав среды:

лактоза......................................................1.00 г;

сахароза.....................................................1,00 г;

глюкоза

0.10 г:

мочевина

1.00 г:

соль Мора....................................................0.02 г;

натрия серноватистокислого (гипосульфита)..............................0.63 г;

фенолово красный (фенолрот)...................................0.4—0.6 см3:

питательный агар (pH — 7,2 — 7,4)....................................100 см3.

Все компоненты, кроме фенолрота. растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды (10см3)наводянойбанвивносятврасплавлвнныйагар,фильтруютчереэ марлю и доводят pH до уровня 7.2—7.4. Затем добавляют 0.4—0.6 см3 фенолрота и разливают в пробирки по 5—6 см3. Стерилизуют в прогретом автоклаве при температуре (111 ± 1) *С в течение 20 мин.

6.7.4 Проведение испытания

6.7.4.1    Предварительное обогащение

Фламбированным шпателем берут 50.00 г препарата, взвешенного с точностью до 2-го десятичного знака, и переносят его в колбу. содержащую450 см3 пептонной воды. Содержимое колбы тщательно перемешивают и ставят в термостат при температуре 37 *С на 16—24 ч.

6.7.4.2    Обогащение

Приливают 10 см3 содержимого колбы к 50 см3 селенитовой или магниевой среды.

Селенитовую среду с посевом выдерживают в термостате при температуре 37 *С в течение 24—48ч.

6.7.4.3    Посев на чашки

После выдерживания в течение 18—24 ч делают посев из каждой колбы на чашки с твердыми дифференциально-диагностическими средами бактоагаром Плоскирева. висмут-сульфитным агаром, со средой Эндо или Левина (по две чашки).

8

ГОСТ Р 57650—2017

Перед посевом содержимое колб тщательно перемешивают и делают посев штрихом диаметром 2,5—3.0 мм на чашки.

Посевы помещают в термостат на 18—24 ч при температуре (37 ± 0.2) *С. посевы на еисмуг-суль-фитном агаре — на 48 ч.

На селективных средах сальмонеллы растут, образуя характерные колонии: на среде Плоскирв-ва — в виде бесцветных или нежно-розовых колоний, но более плотных и несколько меньшего размера, чем на среде Эндо; на среде Левина — в виде прозрачных, бледных, нежно-розовых или розовато-фиолетовых колонии.

На висмут-сульфитном агаре Salmonella typhi. Salmonella paratyphi А растут в виде мелких, нежных, серовато-зеленых колоний с черным центром.

S. cholerae suis — в виде зеленых колоний. Колонии почти всех других сальмонелл значительно крупнее, темно-коричневого цвета с металлическим блеском, окруженные ореолом, цвет среды под колонией — черный.

Если рост колоний выражен слабо или не наблюдается типичных колоний сальмонелл, чашки повторно выдерживают в термостате при температуре (3710.2) "С в течение 20—24 ч. Затем снова определяют наличие типичных колоний сальмонелл.

6.7.4    4 Подтверждение присутствия Salmonella

При обнаружении на чашках подозрительных колоний исследуют 3—5 колоний в каждой чашке.

Колонии высевают на комбинированную среду Расселя или двухсахарный (лактоза, глюкоза) агар, предпочтительнее на трехсахарный (лактоза, глюкоза, сахароза) «скошенный столбик» с мочевиной.

8ысе в колоний также делают на короткий пестрый ряд. включающий скошенный агар и среды Гиссас лактозой, глюкозой и сахарозой, а также на бульон Хоттингера для определения индола и сероводорода.

Культуры, ферментирующие лактозу, глюкозу и сахарозу с образованием газа и расщепляющие мочевину, отбрасывают. Культуры, не ферментирующие лактозу и сахарозу и не расщепляющие мочевину. подлежат дальнейшему исследованию.

Изучают морфологию культуры в мазке, окрашенном по Граму. и подвижность (в висячей или раздавленной капле или в полужидком агаре).

Культуры, представляющиесобой грамотрицательные палочки, ферментирующие глюкозу собра-зованием газа, не ферментирующие лактозу и сахарозу, не расщепляющие мочевину и не образующие индол, подвергают серологическому исследованию в реакции агглютинации или на предметном стеклес набором агглютинирующих сывороток.

Серологические подтверждения

Поливалентную агглютинирующую сыворотку применяют для дифференцирования культур рода сальмонелла от других возбудителей кишечных инфекций, а монорвцепторные 0- и Н-сыеоротхи — для идентификации сальмонеллезных культур.

Предварительно культуры испытывают в реакции агглютинации на предметном стекле с поливалентной сывороткой.

Отрицательная реакцияс поливалентной сывороткой означает, что испытуемая культура не принадлежит к роду Salmonella, и последующий анализ с 0- и Н-агглютинирующими сыворотками не проводят.

Культуры, дающие положительную реакцию агглютинации с поливалентной сывороткой, также проверяют с монорецепторными агглютинирующими сыворотками.

Сначала с помощью монорецепторных 0-сывороток устанавливают принадлежность культур к той или иной серологической группе.

Установив серологическую группу, к которой отнесена данная культура, последнюю проверяют в реакции агглютинации с Н-сыворотками I и II фазы.

На основании положительной реакции агглютинации с определенными 0- и Н-сыворотками анализируемую культуру относят к одному из серотипов.

6.7.5    Обработка результатов

Обнаружение подвижных (кроме S. gallinarum, S. pullorum) грамогрицательных бактерий, не разлагающих лактозу и сахарозу, разлагающих глюкозу и маннит, выделяющих сероводород, не образующих индол, дающих положительную реакцию агглютинации с поливалентной и монорецепторными 0- и Н-сальмонеллеэными сыворотками, указывает на присутствие в исследуемой пробе бактерий из рода сальмонелл.

6.8 Метод определения количества колиформкых бактерий

6.8.1 Сущность метода

Метод заключается в высеве определенного количества продукта в агариэованную среду, культивировании посевов при (3010.5) вС в течение 48 ч и подсчете колоний колиформных бактерий.

9

ГОСТ Р 57650—2017

6.6.2    Аппаратура, материалы и реактивы:

•    весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228.2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов:

•    термостат любого типа, обеспечивающий температуру нагрева (30 ± 1) ‘С;

•    прибор для подсчета колоний по действующей НТДпо (5);

•    pH-метр по ГОСТ Р 8.857 или другой прибор для определения pH среды в интервале 1 + 14 с погрешностью не более 0.1 ед. pH:

•    баня водяная с пределом терморегуляции от 20 °С до 100 °С и точностью терморегуляции ±3 ®С;

-    чашки ЧБН 2 по ГОСТ 25336:

-    пробирки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336. вместимостью 10 см3:

-    пептонно-солевой раствор pH = 7.0:

•    колбы по ГОСТ 25336 типа Кн. вместимостью 2000 см3:

-    пипетки 1,4—2—1.10 по ГОСТ 29227;

-    агар лактоэный с кристаллическим фиолетовым, нейтральным красным и желчью:

•    стаканчик для взвешивания пробирки:

•    шпатель для взятия навески:

•    фильтровальная бумага по ГОСТ 12026.

6.8.3    Подготовка к испытанию

6.8.3.1 Состав и приготовление питательных сред Пептонно-солевой раствор. Состав среды:

натрий хлористый...............................................8.50 г:

пептон для бактериологических целей..................................1,00 г;

вода дистиллированная......................................... 1000 см3.

Приготовление среды

8.50 г хлористого натрия и 1.00 г пептона растворяют в воде при медленном нагревании. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают pH (7.0 ± 0.1). разливают в конические колбы и пробирки, стерилизуют при температуре (121 ± 1)*С в течение 30 мин.

Раствор хранят в темном месте при температуре от 0 *С до 5 *С не более 30 сут.

Агар лактоэный с кристаллическим фиолетовым, нейтральным красным и желчью. Состав среды:

пептон.......................................................7.00    г:

дрожжевой экстракт..............................................3,00    г;

лактоза (безводная).............................................10,00    г;

хлорид натрия..................................................5.00    г:

желчные соли..................................................1,50    г;

нейтральный красный.............................................0.03    г;

кристаллический фиолетовый....................................... 0.002    г;

агар.......................................................9—16 г:

вода дистиллированная......................................... 1000 см3.

Компоненты, кроме кристаллического фиолетового, взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака, кристаллический фиолетовый взвешивают с точностью до 3-го десятичного знака.

Приготовление среды.

Все компоненты растворяют в воде, дают постоять несколько минут, хорошо перемешивают, устанавливают pH таким образом, чтобы после кипячения он составлял (7,4 ± 0,1) при температуре 25 вС, доводят до кипения, периодически перемешивая, кипятят в течение 2 мин и немедленно охлаждают до температуры (45 ±0.5) ’С в водяной бане. Необходимо исключить перегрев среды и повторный ее нагрев. Среду не стерилизуют в автоклаве и используют в течение 3 ч с момента изготовления.

6.8.4 Проведение испытания

Разведение для лосевое готовят следующим образом: к 1.00г препарата, взвешенномусточ-ностью до 2>го десятичного знака, добавляют 9 см3 пегттонно-солевого раствора (pH = 7.0) и тщательно перемешивают с жидкостью до получения однородной суспензии.

Из первого разведения 10-1 готовят последующие разведения 10~2 и т. д. Порядок разведения выбирают в зависимости от предполагаемой обсемененности продукта, чтобы на чашках развивалось не более 150 колоний (если на чашке вырастает более 150 колоний, колонии колиформных бактерий могут иметь нетипичную морфологию).

Посев производят изодного-двух последовательных 10-кратных разведений. Из каждого разведения делают высев на две-три чашки Петри. По 1 см3 суспензии вносят в чашки с заранее маркированным

Ю

ГОСТ Р 57650—2017

дном. Не позднее чем через 15 мин после внесения посевного материала в чашки Петри его заливают 12 см3 расплавленной и охлажденной до температуры (45 ± 0,5) *С агариэованной лактоэной среды. Сразу после заливки среды содержимое чашки тщательно перемешивают путем легкого вращательного покачивания для равномерного распределения посевного материала. Затем чашки Петри с посевами оставляют на горизонтальной поверхности до полного застывания питательной среды. После полного застывания около 4 см3 агариэованной лактоэной среды, расплавленной и охлажденной до температуры (45 ± 0.5) вС. дополнительно вносят на поверхность чашки с посевным материалом, перемешивают и дают застыть.

Для проверки стерильности в контрольную чашку вносят 12 см3 агариэованной среды.

После застывания питательной среды чашки переворачивают крышками вниз и инкубируют в термостате при температуре (30 ± 1) *С в течение 24 ч.

6.8.5 Обработка результатов

Учитывают характерные для колиформных бактерий колонии на чашках, в которых выросло всего не более 150 колоний. Через 24 ч после инкубации при температуре 30 *С колиформные бактерии образуют темно-красные колонии диаметром 0.5 мм и более.

Для подсчета отбирают чашки с посевом из тех разведений, где выросло 15—150 типичных колоний колиформных бактерий. Результаты обрабатывают и пересчитывают на 0.10 г препарата.

6.9 Определение безвредности

6.9.1    Аппаратура и реактивы:

•    шприц медицинский инъекционный по ГОСТ 22967;

•    ступка фарфоровая по ГОСТ 9147;

- вода питьевая по ГОСТ Р 51232.

6.9.2    Проведение испытания

Для проведения испытания отбирают пять цыплят 30-дневного возраста массой около 300 г или пять белых мышей массой по 14—16 г.

Кормобактерин тщательно растирают в ступке с водой. Воду добавляют с таким расчетом, чтобы 1 см3 готовой суспензии содержал 200 мг кормобактерина.

Суспензию вводят цыплятам шприцем с тонким резиновым зондом через рот в течение 5 сут однократно в дозе Зсм3 на каждого (из расчета 1 см3 на ЮОгжиеой массы).

Мышам суспензию вводят через рот с помощью иглы, на конец которой наплавлена олива диаметром не более 1 мм. Препарат вводят ежедневно е течение 5 сут однократно в дозе 0.5 см3 на каждую мышь (из расчета 100 мг препарата на одну мышь).

Допускается определение безвредности путем естественного скармливания кормобактерина мышам массой 16—18 г.

Препарат массой 1.00 г. взвешенный с точностью до 2-го десятичного знака, смешивают с водой в соотношении 1:10 (из расчета 200 мгна мышь). Пять мышей помещают в отдельные клетки, в которые ставят раствор препарата, налитый в чашку Петри, на 1 сут. На время исследования другого питья не дают. Мыши получают препарат в течение 5 сут.

6.9.3    Обработка результатов

Кормобактерин считают безвредным, если все цыплята остаются живыми в течение 5 сут. мыши в течение двух-трех последующих суток наблюдения. При гибели хотя бы одного цыпленка или мыши в повторном опыте препарат бракуют.

Каждого цыпленка или мышь используют в опыте один раз.

7 Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение

7.1    Упаковка и маркировка

Упаковку и маркировку кормобактерина проводят в соответствии с ГОСТ Р 57234 и ГОСТ Р 57249, кроме мешков марки НМ.

7.1.1    Допускается упаковка кормобактерина в мешки марки НМ только для потребителейобластей Центральной России.

Упаковка в мягкие специализированные контейнеры разового использования для сыпучих продуктов по НТД с вкладышем из пленки полиэтиленовой — по ГОСТ 10354 (с 01.01.94 г.).

Допускается упаковка препарата в мешки или вкладыши из полиплена по [9].

Препарат фасуют по 10.15.20 кг. Погрешность взвешивания единицы упаковки не более ±1.25 %.

и

ГОСТ Р 57650—2017

7.1.2    Маркировка кормобактерина — по ГОСТ Р 57249 с нанесением манипуляционного знака «Боится сырости».

7.2    Транспортирование и хранение

Транспортирование и хранение препарата — по ГОСТ Р S7234 и ГОСТ Р S7249.

Каждую партию отделяют одну от другой.

Хранение кормобактерина — по ГОСТ Р 57249 при температуре не выше 30 *С и не ниже минус 30вС и относительной влажности не выше 70 %.

8    Указания по применению

Кормобактерин должны применять в соответствии с «Наставлением по применению кормобактерина в животноводстве», а также по [10].

9    Гарантии изготовителя

9.1    Изготовитель гарантирует соответствие кормобактерина требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий применения, хранения и транспортирования препарата.

9.2    Гарантийный срок хранения — 6 мвс со дня изготовления препарата.

Гарантийный срок хранения препарата, упакованного в бумажные мешки по ГОСТ 2226 марки НМ. — 2 мес.

По истечении гарантийного срока хранения кормобактерин проверяют на соответствие требованиям настоящего стандарта и применяют согласно наставлениям по использованию.

12

ГОСТ Р 57650—2017

J1J ТУ 6-01-1194-79 (2) Классификация потенциально опасных веществ

(2) СП 2.2.2.1327-03

(4)    Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

от12алреля2011 г.№302н

(5)    ТУ 64-1-2401-77

(в) ТУ 6-09-2293-79

(7)    ТУ 6-09-3462-83

(8)    ТУ 6-09-5170-84

(9)    ТУ 6-19-371-87

|10| ГУВ МСХ СССР Б/Н от 18 мая 1978 г.

Библиография

Кислота соляная техническая

Приказ Министерства природных ресурсов Российской Федерации и экологии от 4 декабря 2014 г. № S36 «Об утверждении Критериев отнесения отходов к I—V классам опасности по степени негативного воздействия на окружающую среду*

Гигиенические требования к организации технологических процессов, производственному оборудованию и рабочему инструменту

Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся предварительные и периодические обязательные медицинские осмотры (обследования)

Приборы для счета колоний бактерий ПСБ

Альфа-Д-лактоза. 1-водная (4-О-Бетв-Д-гвлакто-пиракоэил-Альфа-Д-глюкопи-раноза)

Экстрвктдрожжевой чистый

Феноловый красный, индикатор (фенолсульфофтвлеин)чистый для анализа Материалы пленочные многослойные «Полиплен»

Методические указания по лабораторной диагностике Б. Ауески

13

ГОСТ Р 57650—2017

УДК 630.86:006.354    ОКС 07.100.30:65.020.00

Ключевые слова: кормобактерим. белковая добавка, сельскохозяйственные животные и птица

14

БЗ S—2017/77

Редактор Л.С. Зимипова Технический редактор В. Н. Прусакова Корректор и.И. Першине Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой

Сдано е набор 13.09.2017. Подписано а печать 05.10.2017. Формат 80 ■ 84Гарнитура Ариел.

Уел. печ. л. 2.32. Уч.-изд. п. 2.12. Тира* 23 aw. Зак. 1891 Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

Издано и отпечатано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ». 123001 Москва. Гранатный лер., 4. www.90atinfo.1u *ifoQgosl>nfo.ru