ГОСТ 34988-2023 Смеси и напитки для питания детей раннего возраста на молочной и безмолочной основе. Метод определения эфиров монохлорпропандиолов и глицидиловых эфиров жирных кислот в пересчете на монохлорпропандиол и глицидол

        ГОСТ 34988-2023

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

СМЕСИ И НАПИТКИ ДЛЯ ПИТАНИЯ ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА НА МОЛОЧНОЙ И БЕЗМОЛОЧНОЙ ОСНОВЕ

Метод определения эфиров монохлорпропандиолов и глицидиловых эфиров жирных кислот в пересчете на монохлорпропандиол и глицидол

Milk and milk-free infant formula, follow-up formula and drinks for young children. Determination method of bounded monochlorpropanediols fatty acid esters and glycidyl fatty acid esters as free monochloropropanediol and glycidol

МКС 67.050

Дата введения 2024-09-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением науки "Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи" (ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 31 августа 2023 г. N 164-П)

За принятие проголосовали:

(Поправка. ИУС № 4-2024).

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 сентября 2023 г. N 1004-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34988-2023 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 сентября 2024 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС № 4, 2024 год

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на адаптированные, частично адаптированные молочные смеси, напитки для детей раннего возраста, специализированную пищевую продукцию диетического профилактического и диетического лечебного питания для детей раннего возраста, содержащие растительные масла и жиры, и устанавливает метод определения (измерения) содержания эфиров жирных кислот 2-хлор-1,3-пропандиола (2-МХПД) в пересчете на 2-МХПД, эфиров жирных кислот 3-хлор-1,2-пропандиола (3-МХПД) в пересчете на 3-МХПД и глицидиловых эфиров жирных кислот в пересчете на глицидол методом газовой хроматографии/тандемной масс-спектрометрии с предварительной экстракцией жира и 16-часовой щелочной переэтерификацией.

Стандарт распространяется на продукты с содержанием жира 10-35 г/100 г в сухих смесях и напитках и 1-10 г/100 г в жидких смесях и напитках. Настоящий стандарт не применяется в целях обязательной оценки (подтверждения) соответствия.

Диапазоны измерений содержания эфиров 2-МХПД в пересчете на 2-МХПД, эфиров 3-МХПД в пересчете на 3-МХПД и глицидиловых эфиров в пересчете на глицидол составляют:

0,03-2,10 мг/кг для каждого вещества в сухих смесях и напитках;

0,003-0,600 мг/кг для каждого вещества в жидких смесях и напитках.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 1770 (ИСО 1042, ИСО 4788) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4328 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 5789 Реактивы. Толуол. Технические условия

ГОСТ 6552 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия

ГОСТ 6709 Вода дистиллированная. Технические условия*

_________________

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 58144-2018 "Вода дистиллированная. Технические условия".

ГОСТ 6995 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 9293 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 12433 Изооктаны эталонные. Технические условия

ГОСТ 20015 Хлороформ. Технические условия

ГОСТ 22300 Реактивы. Эфиры этиловый и бутиловый уксусной кислоты. Технические условия

ГОСТ 24104 Весы лабораторные. Общие технические требования**

_________________

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809.1 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты

ГОСТ 28311 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 30648.1 Продукты молочные для детского питания. Методы определения жира

ГОСТ 33925 Продукты детского питания. Определение массовой доли жира методом Вейбулла-Бернтропа

ГОСТ ISO 3696 Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы контроля***

_________________

*** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 52501-2005 (ИСО 3696:1987) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

ГОСТ OIML R 76-1 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

_________________

4 Сущность метода

Методика основана на определении связанных форм 2,3-монохлорпропандиолов (эфиров жирных кислот 2-,3-МХПД) в виде фенилборных производных 2-,3-МХПД и глицидола (глицидиловых эфиров жирных кислот) в виде бромсодержащего фенилборного производного 3-монобромпропандиола (3-МБПД) в экстрагированном из исследуемого образца жире методом газовой хроматографии/тандемной масс-спектрометрии с 16-часовой щелочной переэтерификацией (ГХ-МС/МС).

Примечания

1 В процессе длительной щелочной переэтерификации происходит высвобождение МХПД и глицидола из их этерифицированных с жирными кислотами форм. При этом использование низких температур предотвращает нежелательное образование глицидола из свободных МХПД. Добавление подкисленного раствора бромида натрия останавливает реакцию высвобождения и приводит к образованию стабильной формы МБПД (3-МБПД>>2-МБПД) из свободного нестабильного глицидола.

2 На всех этапах щелочной переэтерификации следует избегать нагревания проб. Рекомендуется проверять кислотность водной фазы после добавления к пробе раствора бромида натрия.

5 Требования безопасности

5.1 При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования: помещение лаборатории должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией в соответствии с ГОСТ 12.4.021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать гигиенических нормативов*.

_________________

* В Российской Федерации - нормативов по СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания".

5.2 При подготовке и проведении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

5.3 Помещения, в которых проводят измерения, должны быть снабжены приточно-вытяжной вентиляцией. Работу необходимо проводить, соблюдая правила личной гигиены и противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004, и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

5.4 При работе с электроприборами необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ 12.1.019.

6 Требования к оператору

Работу по указанной методике могут выполнять специалисты, владеющие техниками хроматомасс-спектрометрического анализа и подготовки проб и изучившие инструкцию по эксплуатации к используемому хромато-масс-спектрометру.

7 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы

7.1 Средства измерений

Газовый хроматограф, оснащенный тройным квадрупольным масс-селективным детектором.

Хроматографическая колонка с фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм и толщиной неподвижной фазы 0,25 мкм, с малым уносом подвижной фазы (для ГХ-МС).

Примечание - Допускается использование других хроматографических колонок, обеспечивающих разделение определяемых аналитов.

Весы неавтоматического действия по ГОСТ 24104 и ГОСТ OIML R 76-1 с максимальной нагрузкой не более 200 г и пределом допускаемой погрешности ±0,2 мг.

Колбы мерные наливные 2-25-2, 2-50-2 и 2-100-2 по ГОСТ 1770.

Цилиндры мерные 1-100-2 и 1-25-2 по ГОСТ 1770.

7.2 Вспомогательное оборудование

Устройство для упаривания серии проб для пробирок объемом до 50 мл (концентратор вакуумный центробежный, прибор для упаривания в токе азота или аналогичные устройства).

Лабораторный встряхиватель (вортекс) любого исполнения.

Орбитальный шейкер с регулировкой скорости вращения.

Ультразвуковая ванна с частотой ультразвука не менее 35 kHz и мощностью ультразвука не менее 30 W

Центрифуга для микропробирок с возможностью поддержания скорости не менее 14000 g.

Сушильный шкаф электрический вентилируемый, обеспечивающий поддержание температуры в диапазоне от 50°С до 80°С.

7.3 Реактивы и материалы

Колбы Гр-50(100)(250)-14/23(19/26)(29/32) ТС или К-1-50(100)(250)-14/23(19/26)(29/32) ТС, или О-50(100)(250)-14/23(19/26)(29/32) ТС по ГОСТ 25336

Колбы Кн-1-100(250)(500)(1000)-14/23(29/32) ТС по ГОСТ 25336.

Универсальная индикаторная бумага.

3-монохлорпропан-1,2-диол (3-МХПД) (CAS No. 96-24-2, содержание основного вещества не менее 98%).

3-монохлорпропан-1,2-диол-1,1,2,3,3-d5 (3-МХПД-d5) (CAS No. 342611-01-2, содержание основного вещества не менее 97%, изотопная чистота не менее 97,7%).

1,2-дипальмитоил-3-монохлорпропандиол (1,2-дипальмитат-3-МХПД) (CAS No. 51930-97-3, содержание основного вещества не менее 98%).

1,3-дипальмитоил-2-монохлорпропандиол (1,3-дипальмитат-2-МХПД) (CAS No. 169471-41-4, содержание основного вещества не менее 98%).

1,2-дипальмитоил-3-монохлорпропандиол-1,1,2,3,3-d5 (1,2-дипальмитат-3-МХПД-d5) (CAS No. 1185057-55-9, содержание основного вещества не менее 98%, изотопная чистота не менее 98%).

1,3-дипальмитоил-2-монохлорпропандиол-1,1,2,3,3-d5 (1,3-дипальмитат-2-МХПД-d5) (CAS No. 1426395-62-1, содержание основного вещества не менее 98%, изотопная чистота не менее 97,4%).

Глицидол (CAS No. 556-52-5, содержание основного вещества не менее 95%).

Глицидил пальмитат (CAS No. 7501-44-2, содержание основного вещества не менее 98%).

3-монобромпропан-1,2-диол-1,1,2,3,3-d5 (3-МБПД-d5) (CAS No. 1246820-48-3, содержание основного вещества не менее 97%, изотопная чистота не менее 98,4%).

Неочищенное растительное масло холодного отжима, не подвергавшееся термической обработке (кроме пальмовых).

Примечание - Примерами подходящих растительных масел могут быть нерафинированные и недезодорированные оливковое масло класса extra virgin, рапсовое, горчичное масло и другие, которые не подвергались нагреву и в которых не обнаружены эфиры 3-МХПД, эфиры 2-МХПД или глицидиловые эфиры.

Кислота фенилборная (ФБК) (CAS N 98-80-6, содержание основного вещества не менее 95%).

Хлороформ, х.ч. по ГОСТ 20015.

Метанол, х.ч. по ГОСТ 6995.

Метанол для ВЭЖХ с содержанием основного вещества не менее 99,8%.

Примечание - Требуемое качество реактива устанавливают по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Толуол, ч.д.а. по ГОСТ 5789, с содержанием основного вещества не менее 99,5%.

Изооктан эталонный по ГОСТ 12433.

Натрия гидроокись, х.ч. или ч.д.а. по ГОСТ 4328.

Эфир диэтиловый, ч.д.а., с содержанием воды не более 0,3%.

Примечание - Требуемое качество реактива устанавливают по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Этилацетат, х.ч. по ГОСТ 22300.

Натрий бромистый, ч., с содержанием основного вещества не менее 98%.

Гексан, х.ч., с содержанием основного вещества не менее 99%.

Кислота ортофосфорная, х.ч. по ГОСТ 6552.

Вода для лабораторного анализа по ГОСТ 6709 или по ГОСТ ISO 3696, первой степени чистоты.

Гелий со степенью чистоты не менее 99,9999%.

Допускается использование других средств измерений с метрологическими характеристиками, вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, не уступающими вышеуказанным, а также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

8 Отбор проб

8.1 Отбор проб проводят по ГОСТ 26809.1.

8.2 Пробы жидких исследуемых образцов перемешивают путем переворачивания посуды с пробами не менее трех раз или переливания продукта в другую посуду и обратно не менее двух раз.

8.3 Допускается использование автоматических перемешивающих устройств при условии наличия обоснованных режимов, сохраняющих структуру и свойства продукта.

8.4 Пробы сухих исследуемых образцов растирают в ступке, тщательно перемешивая.

9 Приготовление растворов стандартов и контрольной пробы*

_________________

* Для приготовления растворов, указанных в разделе 9, допускается использование стандартов с аналогичными или лучшими характеристиками. При этом приготовление каждого раствора следует корректировать в соответствии с требуемой конечной концентрацией аналита.

9.1 Приготовление раствора внутреннего стандарта 3-МХПД-d5

9.2 Приготовление раствора внутреннего стандарта 3-МБПД-d5

9.3 Приготовление совместного раствора внутреннего стандарта 1,2-дипальмитоил-3-МХПД-d5 и 1,3-дипальмитоил-2-МХПД-d5

9.4 Приготовление совместного раствора 3-МХПД и глицидола для градуировки

9.5 Приготовление совместного раствора 1,2-дипальмитоил-3-МХПД и 1,3-дипальмитоил-2-МХПД для градуировки

9.6 Приготовление раствора глицидил пальмитата для контрольной пробы

Примечание - Растворы, приготовленные согласно 9.1-9.6, могут храниться в морозильной камере при температуре не выше минус 18°С в течение по меньшей мере двенадцати месяцев. При необходимости емкость с раствором допустимо помещать в ультразвуковую баню, чтобы гарантировать полное растворение аналита.

9.7 Приготовление контрольной пробы масла с известной концентрацией 3-МХПД, 2-МХПД и глицидола

9.7.1 Контрольную пробу рекомендуется готовить непосредственно в день подготовки проб и анализировать в каждой последовательности неизвестных, а также градуировочных образцов.

9.7.3 В пробирку добавляют неочищенное растительное масло холодного отжима - так, чтобы итоговая масса составила около 3 г. Полученную массу записывают.

9.7.4 Контрольную пробу плотно закрывают крышкой и тщательно (не менее 15 с) перемешивают на лабораторном встряхивателе до полного растворения толуола в масле.

9.7.5 Подготовку контрольной пробы для анализа осуществляют одновременно с неизвестными и/или градуировочными образцами согласно 12.2.

9.7.6 Ориентировочные эквивалентные концентрации 3-МХПД, 2-МХПД и глицидола в полученном масляном растворе должны составлять около 0,5 мг/кг каждого. Точные эквивалентные концентрации 3-МХПД, 2-МХПД и глицидола рассчитывают исходя из заявленной производителем чистоты стандартов и итоговой массы содержимого пробирки с контрольной пробой.

10 Приготовление растворов реактивов

10.1 Приготовление раствора гидроксида натрия 0,25%-ного

10.2 Приготовление раствора бромида натрия 55%-ного

10.3 Приготовление смеси диэтилового эфира и этилацетата 40:60 (об/об)

Примечание - Для экономии растворителей целесообразно готовить такой объем смеси, который соответствует количеству одновременно исследуемых проб жира.

10.4 Приготовление насыщенного раствора фенилборной кислоты

10.5 Приготовление смеси хлороформа и метанола 2:1 (об/об)

Примечание - Для экономии растворителей целесообразно готовить такой объем смеси, который соответствует количеству одновременно исследуемых продуктов.

11 Приготовление градуировочных растворов

11.1 Градуировочные растворы совместного разведения 3-МХПД и глицидола

11.2 Градуировочные растворы совместного разведения 1,2-дипальмитоил-3-МХПД и 1,3-дипальмитоил-2-МХПД

Примечание - Растворы, приготовленные согласно 11.1 и 11.2, могут храниться в морозильной камере при температуре не выше минус 18°С в течение по меньшей мере шести месяцев. При необходимости емкость с раствором допустимо помещать в ультразвуковую баню, чтобы гарантировать полное растворение аналита.

11.3 Приготовление градуировочных растворов проб А и Б

11.3.3 Подготовку градуировочных проб А осуществляют аналогично 12.2 начиная с 12.2.6.

11.3.4 Подготовку градуировочных проб Б осуществляют аналогично 12.2 начиная с 12.2.4.

12 Приготовление проб

12.1 Экстракция жира

12.1.1 Отобранный и гомогенизированный по разделу 8 образец продукта отвешивают в центрифужную пробирку подходящего объема*. Навеску образца выбирают таким образом, чтобы после упаривания и досушивания растворителя получилось около 1 г жира.

_________________

* При необходимости отбора большой навески (более 15 гр), например жидких продуктов, рекомендуется использовать несколько центрифужных пробирок на одну исследуемую пробу. При этом отобранный хлороформ из всех пробирок объединяют в одной колбе подходящего объема для упаривания.

12.1.2 К образцу приливают смесь хлороформ:метанол по 10.5 (первая экстракция) соответственно массе навески. Соотношение массы навески и требуемого объема растворителя должно составлять 1:10 (см. приложение А).

12.1.3 Центрифужную пробирку слегка встряхивают и перемешивают на орбитальном шейкере в течение не менее 1,5 ч.

12.1.4 Затем к образцу приливают дистиллированную воду (количество воды должно составлять треть объема смеси растворителей с учетом содержания воды в образце, см. приложение А), осторожно перемешивают и центрифугируют в течение 5 мин при не менее 1790 g.

12.1.5 Нижний (хлороформный) слой отбирают в предварительно взвешенные круглодонные или грушевидные колбы. В центрифужную пробирку вносят соответствующее первой экстракции количество хлороформа (см. приложение А), мешают и центрифугируют в течение 5 мин при не менее 1790 g.

12.1.6 Объединенные хлороформные экстракты упаривают на роторном испарителе. Колбы с полученным жиром помещают в сушильный шкаф при температуре не выше 80°С на 10-15 мин. Первое взвешивание проводят после высушивания в течение 10-15 мин, последующие взвешивания - после 10 мин высушивания. Постоянная масса считается достигнутой, если уменьшение массы при двух последовательных взвешиваниях не превышает 0,0005 г.

Примечания

1 Описанный метод экстракции жира не отменяет рекомендацию проводить отдельное измерение содержания жира и не может быть использован для определения содержания жира в исследуемом продукте. Определение содержания жира следует проводить по ГОСТ 33925 или ГОСТ 30648.1.

2 Не допускается использование методов кислотного гидролиза, кипячения или иных методов "жесткой" экстракции жира из продукта для последующего определения эфиров МХПД и глицидиловых эфиров в детском питании.

3 Номинальную вместимость лабораторной посуды подбирают в зависимости от навески образца продукта и необходимых объемов растворителей.

12.2 Подготовка проб экстрагированного жира

Примечание - Для повышения гомогенности и удобства отбора проб твердые жиры допустимо расплавлять. Для этого испытуемый жир помещают в сушильный шкаф или водяную баню при температуре от 50 до 80°С до расплавления. Пробы перемешивают стеклянной палочкой и отбирают необходимое количество в пробирки для анализа.

12.2.4 Далее подготовку проб А и Б осуществляют следующим образом.

Примечание - Перед добавлением растворов внутренних стандартов и эфира навеску жира можно погреть для ускорения растворения (при температуре от 50 до 80°С). Пробирку с жиром, добавленными внутренними стандартами и эфиром греть не рекомендуется ввиду быстрого испарения растворителей.

12.2.7 Верхний слой упаривают без нагревания на центрифужном концентраторе.

Примечания

2 Пробы рекомендуется анализировать сразу или в день приготовления; при хранении более суток возможно выпадение кристаллического осадка фенилборной кислоты, который перед анализом следует отделить от исследуемого раствора с помощью центрифугирования.

13 Проведение измерений

13.1 Условия проведения измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия: температура воздуха 20±5°С, относительная влажность не более 80% (условия измерений должны соответствовать требованиям, изложенным в паспортах или иных документах на используемое оборудование и материалы).

13.2 Хроматографические условия измерений

Хромато-масс-спектрометр включают и настраивают в соответствии с техническим руководством по его эксплуатации и устанавливают хроматографические параметры, представленные в таблице 1.

Таблица 1 - Основные параметры работы хромато-масс-спектрометра

Рекомендуется следующий порядок ввода пробы:

1) не менее 5 раз промыть микрошприц гексаном или изооктаном;

2) 2 раза промыть микрошприц вводимой пробой;

3) удалить пузырьки воздуха;

5) не менее 5 раз промыть микрошприц гексаном или изооктаном.

Работу проводят в режиме мониторинга выбранных реакций, при этом устанавливают параметры для переходов, представленные в таблице 2. Первый ион-фрагмент соответствующего аналита используют для количественного расчета, второй является подтверждающим.

Таблица 2 - Примеры параметров режима мониторинга выбранных реакций*

_________________

* В зависимости от характеристик используемого оборудования указанные значения m/z ионов-фрагментов и энергии соударения могут отличаться от приведенных. Данные таблицы могут использоваться для тройного квадрупольного масс-детектора Agilent 7000C.

Примеры получаемых хроматограмм по отдельным ионным переходам всех аналитов приведены в приложении Б.

13.3 Построение градуировочной кривой

При построении градуировочной зависимости для количественного определения 3-МХПД, 2-МХПД и глицидола анализируют рабочие стандартные градуировочные растворы различных уровней концентраций в указанных условиях, приготовленные согласно разделу 11. Затем строят графики зависимости отношения площади хроматографического пика аналита к площади пика внутреннего стандарта от отношения массы аналита к массе внутреннего стандарта во вводимой пробе для каждого фрагментного иона, используемого для количественного определения. Построение графиков можно проводить при помощи программы обработки данных ГХ-МС/МС или при помощи программы для работы с электронными таблицами. При построении графиков допустимо применять алгоритм программного взвешивания градуировочной кривой 1/х.

Рассчитанная в ходе градуировки концентрация по фрагментарному иону, используемому для количественного определения, должна совпадать с теоретической в пределах ±20%.

Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной кривой каждого фрагментного иона, используемого для количественного определения, составляет не менее 0,98.

14 Обработка и оформление результатов

a - угловой коэффициент наклона градуировочной кривой;

b - свободный коэффициент сдвига градуировочной кривой.

14.2Расчет содержания эфиров жирных кислот 3-МХПД в пересчете на 3-МХПД

0,6 - поправка на объем дозирования калибровочных проб;

Примечание - Для расчетов в каждом отдельном продукте предпочтительно использовать содержание жира, которое было предварительно измерено по ГОСТ 33925 или ГОСТ 30648.1. В случае невозможности провести измерение содержания жира допустимо использовать заявленное (маркируемое) производителем содержание жира. При этом протокол исследований должен содержать информацию о том, измеренное или заявленное значение было использовано в расчетах.

14.3 Расчет содержания эфиров жирных кислот 2-МХПД в пересчете на 2-МХПД

0,6 - поправка на объем дозирования калибровочных проб;

Примечание - Для расчетов в каждом отдельном продукте предпочтительно использовать содержание жира, которое было предварительно измерено по ГОСТ 33925 или ГОСТ 30648.1. В случае невозможности провести измерение содержания жира допустимо использовать установленное (маркируемое) производителем содержание жира. При этом протокол исследований должен содержать информацию о том, измеренное или заявленное значение было использовано в расчетах.

14.4 Расчет содержания глицидиловых эфиров в пересчете на глицидол

0,6 - поправка на объем дозирования калибровочных проб;

Примечание - Для расчетов в каждом отдельном продукте предпочтительно использовать содержание жира, которое было предварительно измерено по ГОСТ 33925 или ГОСТ 30648.1. В случае невозможности провести измерение содержания жира допустимо использовать установленное (маркируемое) производителем содержание жира. При этом протокол исследований должен содержать информацию о том, измеренное или заявленное значение было использовано в расчетах.

14.5 Поправка на возможное новообразование глицидола из 3-МХПД

В случае если площадь стандарта 3-МБПД-d5 в пробе Б составляет более 5% от площади стандарта 3-МХПД-d5 в пробе Б, проводят корректировку итогового содержания глицидола. В остальных случаях корректировку содержания глицидола с учетом его возможного новообразования из 3-МХПД считают не значимой и не вносят в итоговый результат.

14.6 Выражение результатов

Результат определения представляет собой:

- содержание эфиров жирных кислот 3-МХПД в пересчете на 3-МХПД, мг/кг исследуемого продукта, рассчитанное по формуле (5),

- содержание эфиров жирных кислот 2-МХПД в пересчете на 2-МХПД, мг/кг исследуемого продукта, рассчитанное по формуле (9),

- содержание глицидиловых эфиров жирных кислот в пересчете на глицидол, мг/кг исследуемого продукта, рассчитанное по формуле (15).

Результат анализа представляют в виде

где C - итоговый результат, рассчитанный с точностью до второго десятичного знака, мг/кг исследуемого продукта;

15 Метрологические характеристики методики

Метрологические параметры методики приведены в таблице 3.

Таблица 3 - Метрологические параметры методики

15.1 Повторяемость

r - предел повторяемости (расхождение между двумя параллельными определениями, выполненными в условиях повторяемости).

Для вероятности 0,95 предел повторяемости рассчитывают по формуле

При превышении предела повторяемости (сходимости) испытание повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

15.2 Воспроизводимость

R - предел воспроизводимости (расхождение между двумя определениями, выполненными в условиях воспроизводимости).

Для вероятности 0,95 предел воспроизводимости рассчитывают по формуле

где RR - относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %.

При превышении предела воспроизводимости испытание повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Приложение А

(справочное)

Определение объема растворителей для экстракции жира в зависимости от навески исследуемого продукта

Определение объема растворителей приведено в таблице А.1.

Таблица А.1

Приложение Б

(справочное)

Пример хроматограмм, полученных при анализе контрольной пробы масла с известной концентрацией 2-МХПД, 3-МХПД и глицидола 0,5 мг/кг каждого

Пример хроматограмм контрольной пробы масла приведен на рисунках Б.1 и Б.2.

Примечание - В скобках приведены переходы, по которым отображены пики соответствующих аналитов. Вертикальными линиями отмечены границы временных сегментов.

Рисунок Б.1 - Хроматограмма пробы А

Примечание - В скобках приведены переходы, по которым отображены пики соответствующих аналитов. Вертикальными линиями отмечены границы временных сегментов.

Рисунок Б.2 - Хроматограмма пробы Б