ГОСТ 34515-2019 Молоко, молочная продукция, соевые продукты. Определение массовой доли меламина

    ГОСТ 34515-2019

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МОЛОКО, МОЛОЧНАЯ ПРОДУКЦИЯ, СОЕВЫЕ ПРОДУКТЫ

Определение массовой доли меламина

Milk, dairy products, soy products. Determination of melamine

МКС 67.100.01;

67.050

Дата введения 2022-01-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Республиканским унитарным предприятием "Научно-практический центр гигиены"

2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по результатам голосования в АИС МГС (протокол от 30 января 2019 г. N 115-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 августа 2021 г. N 769-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34515-2019 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2022 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на молоко, молочную продукцию, соевые продукты и устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой доли меламина.

Диапазон измерений массовой доли меламина от 0,5 до 10,0 мг/кг продукта.

Предел количественного определения (LOQ) меламина составляет 0,5 мг/кг.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-6-2003* Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 7031-75 Песок кварцевый для тонкой керамики

ГОСТ 24147-80 Аммиак водный особой чистоты. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 предел количественного определения; LOQ: Наименьшее значение массовой концентрации определяемого соединения в анализируемой пробе, которое может быть измерено с установленной точностью в соответствии с настоящим стандартом.

3.2 диапазон измерений: Область значений массовой концентрации соединения в пробе, определяемая по настоящему стандарту.

4 Принцип метода

Метод основан на экстракции меламина 5%-ной смесью раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) с ацетонитрилом с помощью ультразвука, очистке и концентрировании полученного экстракта методом твердофазной экстракции и определении его содержания с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Детектирование осуществляется с помощью спектрофотометрического или диодно-матричного детектора.

5 Условия проведения измерений

При проведении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

- температура окружающего воздуха 18°С-23°С;

- относительная влажность воздуха 25%-75%;

- приготовление градуировочных растворов и растворов проб проводят при температуре (20±2)°С.

6 Реактивы, оборудование и материалы

6.1 Реактивы

Для проведения испытаний используются следующие реактивы:

6.1.1 Меламин с содержанием основного вещества более 99,8%.

6.1.2 Лимонная кислота, ос.ч.

6.1.3 Метанол для жидкостной хроматографии, оптическая плотность относительно дистиллированной воды при 200 нм не более 0,025, массовая доля воды не более 0,03%.

6.1.4 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, оптическая плотность относительно дистиллированной воды при 200 нм не более 0,025, массовая доля воды не более 0,03%.

6.1.5 Натрия октансульфонат, ос.ч.

6.1.6 Аммиак водный 25%-ный по ГОСТ 24147, ос.ч.

6.1.7 Кислота трихлоруксусная (ТХУ), ч.

6.1.8 Гексан, х.ч.

6.1.9 Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, ч.д.а.

6.1.10 Вода по ГОСТ 6709.

6.2 Оборудование

Для проведения испытаний используется следующее оборудование:

6.2.1 Хроматограф жидкостный, снабженный программным обеспечением для сбора и обработки данных, с диодно-матричным или УФ-спектрофотометрическим детектором.

_______________

6.2.3 Колонка защитная (предколонка), заполненная тем же сорбентом, что и колонка хроматографическая.

6.2.4 Весы лабораторные электронные специального класса точности по ГОСТ OIML R 76-1, с пределом допускаемой погрешности не более 0,0005 г.

6.2.5 Центрифуга лабораторная любой марки, обеспечивающая фактор разделения (g-фактор) не менее 1000.

6.2.6 Термостат жидкостный, обеспечивающий поддержание заданного температурного режима от 20°С с погрешностью ±1,0°С.

6.2.7 Установка для твердофазной экстракции.

6.2.9 Испаритель ротационный

6.2.10 Система фильтрации и дегазации жидкостей.

6.3 Материалы

Для проведения испытаний используются следующие материалы:

6.3.1 Пипетки градуированные 1-2-2-1, 1-2-2-2, 1-2-2-5, 1-2-2-10 или других типов и исполнений по ГОСТ 29227.

6.3.2 Цилиндры мерные 1-100-2 или других исполнений по ГОСТ 1770.

6.3.3 Колбы мерные 2-25-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-200-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

6.3.4 Колбы плоскодонные П-2-100-29, П-2-250-29 или других типов и исполнений по ГОСТ 25336.

6.3.5 Стакан В-1-1000 по ГОСТ 25336.

6.3.6 Колбы грушевидные Гр-25-14/23 ТС или других типов и исполнений по ГОСТ 25336.

6.3.7 Пробирки с пришлифованной пробкой П4-10-14/23ХС или других типов и исполнений по ГОСТ 25336.

6.3.8 Воронки делительные Вд-1-100-ХС или других типов и исполнений по ГОСТ 25336.

_______________

6.3.12 Фильтры мембранные из регенерированной целлюлозы с размером пор 0,2 мкм, диаметром 25 мм.

6.3.13 Фильтры мембранные из регенерированной целлюлозы с размером пор 0,45 мкм, диаметром 47 мм.

6.3.14 Песок кварцевый по ГОСТ 7031.

6.3.15 Фильтр "синяя лента" диаметром 70 мм.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не хуже вышеуказанных и вспомогательного оборудования, реактивов и материалов с техническими характеристиками не хуже вышеуказанных.

7 Методика измерения

7.1 Подготовка измерительной аппаратуры

Включают хроматограф согласно инструкции по эксплуатации. Устанавливают рабочие режимы для блока насосов и детектора. Проводят стабилизацию работы хроматографа на рабочих режимах в течение 40-60 мин.

7.2 Приготовление растворов

7.2.1 Приготовление раствора гидроокиси натрия

7.2.2 Приготовление 5,0%-ного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ)

7.2.3 Приготовление раствора аммиака в метаноле

7.2.4 Приготовление подвижной фазы

7.2.5 Приготовление растворов меламина

7.2.5.4 Приготовление градуировочных растворов меламина

Таблица 1 - Схема приготовления градуировочных растворов меламина

Градуировочные растворы хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой в холодильнике. Растворы стабильны в течение 7 сут.

7.3 Установление градуировочной характеристики

Полученные по 6.2.5.4 градуировочные растворы меламина хроматографируют, начиная с самой низкой концентрации.

Условия хроматографирования:

- объем вводимой пробы 20 мкл;

- температура термостата колонки 30°С;

- длина волны 240 нм;

- ширина оптической щели 16 нм.

Каждый градуировочный раствор хроматографируют не менее двух раз, принимая за результат измерения среднее арифметическое параллельных измерений.

7.3.1 Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика устанавливают зависимость площади пиков от соответствующей концентрации меламина в градуировочном растворе. Прямая градуировочного графика должна проходить через начало координат и определяться функциональной зависимостью:

Градуировочный график рассчитывается методом наименьших квадратов.

7.3.2 Контроль градуировочного графика

7.4 Отбор проб и подготовка проб к анализу

7.4.1 Отбор проб

Отбор проб осуществляется согласно ТНПА на продукцию.

7.5 Подготовка проб к анализу

Отобранные пробы хранят в холодильнике. Перед началом проведения пробоподготовки среднюю пробу образца предварительно выдерживают при температуре окружающей среды не менее 30 мин.

7.5.1 Проведение экстракции меламина

7.5.2 Проведение твердофазной экстракции

Полученный элюат упаривают досуха в этой же пробирке на роторном испарителе при температуре 50°С.

7.6 Проведение анализа

Анализ полученного по 7.5.2 раствора проводят на жидкостном хроматографе. Условия хроматографирования такие же, как и при построении градуировочного графика по 7.3. Определяют площади пиков, используя компьютерную систему обработки сигналов. Проводят анализ двух параллельных проб.

8 Расчет результатов

Допустимые расхождения между параллельными определениями по отношению к величине среднего арифметического значения не должны превышать 9,8%.

Гарантированный результат измерений, выдаваемый лабораторией, может быть представлен в виде

8.1 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, осуществляют согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2.1). Два результата испытаний должны быть получены в условиях повторяемости.

где 0,01 - коэффициент пересчета из процентов;

Если для значения абсолютного расхождения между двумя результатами единичных наблюдений выполняется условие

где 0,01 - коэффициент пересчета из процентов;

Если условие (8) не выполняется, то следует отказаться от полученных данных, выяснить и устранить причины, приводящие к неудовлетворительным результатам. Следует провести повторное выполнение измерений после устранения причин несоответствия.

8.2 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях промежуточной прецизионности

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в промежуточной прецизионности, осуществляют согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (пункт 5.3.2.2).

где 0,01 - коэффициент для пересчета процентов;

Если для значения абсолютного расхождения между результатами выполняется условие

Если условие (14) не выполняется, то следует отказаться от полученных данных, выяснить и устранить причины, приводящие к неудовлетворительным результатам. Следует провести повторное выполнение измерений после устранения причин несоответствия.

9 Характеристики метода