ГОСТ 27147-86 Вирусвакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГЭ) культуральная. Технические требования и методы испытаний

ГОСТ 27147-86
(СТ СЭВ 5158-85)

Группа Р31

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОЭНТЕРИТА СВИНЕЙ (ТГЭ) КУЛЬТУРАЛЬНАЯ

Технические требования и методы испытаний

Hog transmissible gastroenteritis (TGE) cultivated viral vaccine. Technical requirements and test methods

ОКСТУ 9384

Срок действия с 01.01.88
до 01.01.93*
________________
* Ограничение срока действия
снято постановлением Госстандарта России
от 30.06.92 N 624 (ИУС N 9, 1992 год).
- .

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Госагропромом СССР

ИСПОЛНИТЕЛИ

Ю.А. Малахов, д-р вет. наук; Э.В. Ивановский, д-р вет. наук, Л.А. Мельникова, д-р мед. наук; И.И. Касюк

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 11 декабря 1986 года N 3762

3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Настоящий стандарт распространяется на вирусвакцину против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, изготовленную из авирулентного штамма вируса ТГЭ, выращенного в культуре клеток и подвергнутого сублимационному высушиванию, предназначенную для иммунизации супоросных свиноматок в пунктах, неблагополучных по ТГЭ.

Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 5158-85.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1. Вирусвакцина по своим физическим и иммунобиологическим свойствам должна соответствовать характеристикам и нормам, указанным в таблице.

2. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

2.1. Отбор проб

2.1.1. Для проведения испытания от каждой серии отбирают 25 флаконов, 15 используют для анализа, а десять хранят в архиве государственного контролера в течение 18 мес.

2.1.2. Флаконы, предназначенные для хранения, сопровождают документом с указанием:

наименования биопрепарата;

даты изготовления;

номера серии;

номера контроля;

даты отбора пробы;

общего количества упаковочных единиц;

объема серии;

срока годности;

обозначения настоящего стандарта;

должности и подписи лица, отобравшего пробу.

2.2. Определение внешнего вида, цвета и наличия посторонней примеси

Для определения внешнего вида, наличия посторонней примеси, плесени, трещин флаконов, изменения консистенции каждый флакон с вакциной тщательно просматривают при дневном свете.

2.3. Определение массовой доли влаги по ГОСТ 24061-80.

2.4. Определение растворимости

Сущность метода заключается в определении времени, необходимого для полного растворения лиофилизата в равном объеме соответствующего растворителя.

2.4.1. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

часы;

шприцы инъекционные вместимостью 20 см по ГОСТ 18137-77;

канюли инъекционные;

раствор физиологический.

2.4.2. Проведение испытания

В открытый флакон с лиофилизированным препаратом при помощи инъекционного шприца вводят физиологический раствор в равном объеме от исходного объема препарата до лиофилизации.

2.4.3. Обработка результатов

Препарат после встряхивания должен полностью раствориться в течение 1-2 мин.

2.5. Определение контаминации бактериальной и грибковой микрофлорой

Сущность метода заключается в определении роста бактерий и грибов в посевах из проб вакцины на питательные среды.

2.5.1. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

термостат с температурой нагрева (22±2)°С и (37±0,5)°С;

флаконы вместимостью 100 см;

пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 см по ГОСТ 20292-74;

раствор физиологический;

бульон мясо-пептонный (МПБ) по ГОСТ 20730-75;

бульон мясо-пептонный печеночный (МППБ) под вазелиновым маслом;

агар мясо-пептонный (МПА);

агар Сабуро.

2.5.2. Проведение испытания

Для проведения испытания берут не менее 5 флаконов. Содержимое каждого флакона растворяют в 10-12 см стерильного физиологического раствора. Из каждого флакона берут по 0,5 см и делают посевы не менее чем в две пробирки с каждой питательной средой и агаром Сабуро. Питательные среды с посевами инкубируют при температуре (37±0,5)°С, а агар Сабуро при температуре (22±2)°С в течение 14 дней.

2.6. Определение инфекционной активности

Сущность метода заключается в определении титра вакцины на основании вызываемого цитопатического действия в культуре клеток и вычислении ТЦД.

2.6.1. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

термостат с температурой нагрева (37±0,5)°С;

микроскоп;

пробирки по ГОСТ 25336-82;

сосуды стеклянные для выращивания клеток и вируса;

пипетки вместимостью 1 и 10 см по ГОСТ 20292-74;

раствор физиологический;

среду поддерживающую;

культуру клеток.

2.6.2. Подготовка к испытанию

Из лиофилизата вакцины готовят до 10 десятикратные разведения на физиологическом растворе. Для испытания серии отбирают свежую культуру клеток в 20 пробирках со сплошным монослоем. В стерильных условиях среду роста заменяют свежей поддерживающей средой. В каждом опыте оставляют 4 пробирки с незараженной культурой клеток.

2.6.3. Проведение испытания

По четыре пробирки с восприимчивой культурой клеток заражают разведениями вакцины от 10 до 10, добавляют 1 см разведения вируса и выдерживают в термостате при температуре (37±0,5)°С. При помощи микроскопа контролируют цитопатические изменения в испытуемых инфицированных культурах. Конечный учет культур клеток проводят не ранее чем через 5 дней после заражения.

2.6.4. Обработка результатов

Обработку результатов проводят вычислением титра инфекционности по методу Кербера или Рида и Менча.

2.7. Определение безвредности

2.7.1. Сущность метода заключается в выявлении реакции подсвинков в ответ на парэнтеральное введение им удвоенной дозы вакцины.

2.7.2. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

термометр для измерения температуры тела;

шприцы инъекционные вместимостью 10 см по ГОСТ 18137-77;

канюли инъекционные;

раствор физиологический.

2.7.3. Подготовка к испытанию

На каждую серию вакцины берут двух здоровых подсвинков массой 20-25 кг и измеряют у них температуру в течение 8 дней. В день испытания лиофилизат вакцины растворяют 1:1 в физиологическом растворе с таким расчетом, чтобы в 2 см разведения вакцины содержалось вируса в дозе 2·10 ТЦД.

2.7.4. Проведение испытания

Для проведения испытания двум подсвинкам вводят разведение вакцины внутримышечно в дозе 2·10 ТЦД в объеме 2 см.

2.7.5. Обработка результатов

Серию вакцины считают безвредной, если в течение 14 дней после вакцинации клинические проявления у привитых животных не наблюдались.

2.8. Определение иммуногенности

Сущность метода заключается в испытании посевного вируса ТГЭ (производственного штамма), используемого для изготовления вакцины, в опыте по защите поросят-сосунов.

2.8.1. Аппаратура и материалы

Для проведения испытания применяют:

шприц инъекционный вместимостью 5 см по ГОСТ 18137-77;

канюли инъекционные;

семь вакцинальных доз посевного вируса ТГЭ с титром не ниже 10 ТЦД, используемого для изготовления вакцины;

3 см вирулентного вируса ТГЭ, вызывающего у незащищенных поросят мортальность выше 70%.

2.8.2. Подготовка к испытанию

При испытании иммуногенности посевного вируса ТГЭ (производственного штамма), используемого для изготовления вакцины, предназначенной для перорального применения, трем супоросным свиноматкам за 2-3 недели до ожидаемого опороса вводят перорально с сухим кормом ежедневно в течение 7 дней вирус ТГЭ в дозе 10 ТЦД. В качестве контроля оставляют трех невакцинированных свиноматок.

2.8.3. Проведение испытания

Не позднее 3 дней после опороса заражают не менее чем по 10-20 поросят-сосунов в испытуемой и контрольной группах вирулентным вирусом ТГЭ. Для этого каждому поросенку вводят перорально вирулентный вирус в дозе 10 ЛД в объеме 3 см. В течение 14 дней ежедневно наблюдают за поросятами, погибших поросят удаляют.

2.8.4. Обработка результатов

Процент защиты испытуемой группы поросят вычисляют по разности между процентом выживаемости поросят в испытуемой группе и процентом выживаемости поросят в контрольной группе. Выживаемость в контрольной группе должна составлять не более 30%.

3. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЯ

Для каждой проверенной серии вирусвакцины составляют протокол испытания, который должен содержать следующие данные:

наименование штамма вируса ТГЭ;

использованный метод;

результат испытания показателей качества;

дату изготовления;

подпись лица, проводившего испытание;

обозначение настоящего стандарта.

Электронный текст документа

и сверен по:

М.: Издательство стандартов, 1987