allgosts.ru67. ПРОИЗВОДСТВО ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ67.120. Мясо, мясные продукты и другие животные продукты

ГОСТ ISO 15141-2-2013 Продукты пищевые. Определение содержания охратоксина А в зерне и зерновых продуктах. Часть 2. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с очисткой бикарбонатом

Обозначение:
ГОСТ ISO 15141-2-2013
Наименование:
Продукты пищевые. Определение содержания охратоксина А в зерне и зерновых продуктах. Часть 2. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с очисткой бикарбонатом
Статус:
Действует
Дата введения:
07/01/2017
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
67.120

Текст ГОСТ ISO 15141-2-2013 Продукты пищевые. Определение содержания охратоксина А в зерне и зерновых продуктах. Часть 2. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с очисткой бикарбонатом



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION. METROLOGY AND CERTIFICATION

{ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

ГОСТ

ISO 15141-2-2013

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

Определение содержания охратоксина А в зерне

и зерновых продуктах

Часть 2

Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с очисткой бикарбонатом

(ISO 15141-2:1998, IDT)

Издание официальное

Москве

Стакдартимформ

2016

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Республиканским государственным предприятием «Казахстанский институт стандартизации и сертификации» и Техническим комитетом по стандартизации Республики Казахстан ТК 71 «Экологическая безопасность сырья, материалов, веществ и сооружений» на основе собствен-ного перевода на русский язык англоязычной версии международного стандарта, указанного в пункте 5

2    ВНЕСЕН Комитетом технического регулирования и метрологии Министерства индустрии и новых технологий Республики Казахстан

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по переписке (протокол от 5 ноября 2013 г. № 61-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3)66)004-37

Код страны по МК (ИСО 3)66) 004—37

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Казахстан

KZ

Госстандарт Республики Казахстан

Киргизия

KG

Кыргыэстандарт

Молдова

MD

Молдова-Стандарт

Россия

RU

Росстандарг

Таджикистан

TJ

Таджикстандарг

Узбекистан

UZ

Узстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 августа 2016 г. № 943-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 15141-2—2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.

5    Настоящий оандар! идеи iимен международному С1андар|у ISO 15141-2.1996 «Продую ы пищевые. Определение содержания охратоксина А в зерне и зерновых продуктах. Часть 2. Метод жидкостной хроматографии высокого разрешения с очисткой бикарбонатом» («Foodstuffs — Determination of ochratoxin A in cereals and cereal products — Part 2. High performance liquid chromatographic method with bicarbonate dean up». IDT).

Международный стандар* ISO 15141-2:1996 подготовлен Европейским комитетом по стандартизации (CEN) в сотрудничестве с Техническим комитетом ISO ТС 34 «Сельскохозяйственные пищевые продукты». Подкомитетом SC ПК 4 «Зерновые и бобовые» в соответствии с Соглашением по техническому сотрудничеству между ISO и CEN (Венское Соглашение).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

И

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и попраеок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет ()

© Стандартинформ. 2016

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

III

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Содержание

1    Область применения...................................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................................1

3    Сущность метода......................................................................1

4    Реактивы.............................................................................1

5    Средства измерений и оборудование.....................................................3

6    Проведение испытания.................................................................3

7    Обработка результатов испытаний...........................................................5

8    Прецизионность.......................................................................5

9    Протокол испытаний...................................................................6

Приложение А (справочное) Данные по прецизионности.........................................7

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии межгосударственных стандартов

ссылочным международным стандартам.....................................9

Библиография........................................................................10

IV

ГОСТ IS015141-2—2013

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

Определение содержания охратоксина А в зерне и зерновых продуктах

Часть 2

Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с очисткой бикарбонатом

Foodstuffs. Determination of ochratoxin A in cereals and cereal products. Part 2.

High performance iquid chromatographic method with bicarbonate clean up

Дата введения — 2017—07—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения охратоксина А (ОТА) и распространяется на зерно и зерновые продукты. Нижний предел количественного определения составляет 3 мкг/кг.

Метод успешно валидирован при проведении межлабораторных сравнительных испытаний по [1] на цельном ячмене, содержащем 2.9; 3.0; 7.4; 14.4 мкг/кг охратоксина А. на цельной кукурузе, содержащей 8.2 мкг/кг и 16.3 мкг/кг охратоксина А. а также на пшеничных отрубях, содержащих 3.8 мкг/кг и

4.5 мкг/кг охратоксина А.

Настоящий метод не распространяется на определение охратоксина А во ржи.

Примечание — Данный меюд также применим к пшеничной муке.

2    Нормативные ссылки

8 настоящем стандарте использованы ссылки на межгосударственные стандарты, которые являются обязательными. Для датированных ссылок применяют только указанное издание. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения).

EN ISO 3696:1995 Water for analytical laboratory use — Specification and test methods (ISO 3696:1987) (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний).

3    Сущность метода

Охратоксин А экстрагируют из зерна смесью хлороформа и водного раствора фосфорной кислоты и выделяют разделением жидких фаз. Выделенный водный бикарбонатный раствор переносят в патрон для твердофазной экстракции С,» и элюируют охратоксин А смесью этилацвтат— метанол—уксусная кислота. Охратоксин А отделяют методом обращенно-фаэовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее ВЭЖХ) и количественно определяют хроматографией с флуоресцентным детектором. Хроматография производного метилового эфира подтверждает идентификацию охратоксина А (2) — [5].

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Охратоксин А вызывает повреждение почек и печени и является канцерогеном. Соблюдают соответствующие меры предосторожности [6] при работе с такими соединениями и. в частности, избегают работы в сухом виде. т.к. вследствие электростатических свойств это может привести к рассеиванию и вдыханию. Стеклянная посуда должна быть очищена 4%-ным раствором гипохлорита натрия. Следует обратить внимание на положение, сделанное Международным агентством по изучению рака [7], [8].

4 Реактивы

При проведении испытаний используют только реактивы общепризнанного аналитического класса, дистиллированную воду или воду не ниже первой степени чистоты no EN ISO 3696. Растворитель должен иметь степень чистоты, необходимую для проведения анализа методом ВЭЖХ.

Издание официальное

1

ГОСТ ISO 15141-2—2013

4.1    Хлороформ, стабилизированный 2-метил-2-бутеном или этанолом.

4.2    Фосфорная кислота, с(НэР04) - 0.1 моль/дм3.

4.3    Диатомовая земля

900 г диатомовой земли, обработанной кислотой, на всю ночь помещают в метанол (см. 4.7). Фильтруют через двойной слой бумаги в воронку Бюхнера (см. 5.6). промывают 8 дм3 воды и сушат в течение 12 ч при температуре 150 °С.

4.4    Раствор бикарбоната натрия, с (NaHC03) = 30 г/дм3.

4.5    Этилацетат

4.6    Толуол

4.7    Метанол

4.8    Ледяная уксусная кислота (СН3СООН) = 98 %

4.9    Ацетонитрил

4.10    Дихлорметан

4.11    Раствор для элюирования: смешивают в объемном отношении 95:5:0.5 этилацетат (см. 4.5). метанол (см. 4.7) и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8).

4.12    Подвижная фаза: смешивают ацетонитрил (см. 4.9). воду и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8) в объемном соотношении 99: 9Э : 2 и дегазируют.

4.13    Смесь растворителей: смешивают толуол (см. 4.6) и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8) в объемном соотношении 99:1.

4.14    Трифторид бора

4.15    Трифторид бора, раствор в метаноле, с (BF3) = 14 г/см3

Примечание — Испытания проводят в вытяжном шкафу, избегая контакта с кожей, глазами и дыхательными путями.

4.16    Охратоксик А. кристаллический и в жидком виде

4.17    Охратоксин А. основной раствор

Растворяют 1 мг охратоксина А (кристаллы) (см. 4.16) или содержимое 1 ампулы (в жидком виде) в смеси растворителей (см. 4.13) для получения раствора, содержащего от 20 до 30 мкг/см3 охратоксина А.

Для определения точной концентрации регистрируют спектр поглощения между длиной волны 300 нм и 370 км с шагом в 5 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см (см. 5.4) относительно смеси растворителей. Определяют дллну волны в максимуме поглощения, регистрируя спектр вблизи него с шагом в 1 км.

Массовую концентрацию охратоксина А. ром. в мг/см3 вычисляют по формуле

Рога

г Ап ох х

М»100

к*б

(D

где А»», — М — к —

б —

оптическая плотность в максимуме поглощения (при 333 нм);

относительная молекулярная масса охратоксина А (М- 403 г/моль);

относительный молярный коэффициент поглощения охратоксина А в смеси растворителей (544 м3/моль);

толщина поглощающего слоя кварцевой кюветы, см.

4.18    Стандартный раствор охратоксина А

Разбавляют основной раствор (см. 4.17) смесью растворителя (см. 4.13) до получения стандартного раствора с массовой концентрацией охратоксина А 4 мкг/см3.

Этот раствор может храниться в холодильнике при 4 °С. Его устойчивость должна проверяться.

4.19    Градуировочные растворы охратоксина А

Дозируют 5:10; 25; 50; 100 мкл аликвоты стандартного раствора (см. 4.18) в разные пробирки емкостью от 4 до 5 см3 (см. 5.16) с помощью шприцов с фиксированным объемом (см. 5.16). Выпаривают досуха подтоком азота. Добавляют 1.0 см3 подвижной фазы (см. 4.12) в каждую пробирку для получения массовых концентраций охратоксина А. составляющих 0.5; 1.0; 2,5; 5.0; 10.0 нг/25 мкл.

4.20    Раствор гипохлорита натрия, с (NaOCI) = 4 г/100 см3.

2

ГОСТ ISO 15141-2—2013

5 Средства измерений и оборудование

Применяют следующее лабораторное оборудование:

5.1    Мельница лабораторная и сито с размером ячеек 1 мм.

5.2    Блендер высокоскоростной с сосудом вместимостью 1250 см3 с крышкой.

5.3    Спектрометр для проведения измерений в области длин волн в диапазоне от 300 до 370 нм. имеющий ширину спектральной полосы не более ± 2 нм.

5.4    Кюветы кварцевые с толщиной поглощающего слоя 1 см и незначительной поглощающей способностью в диапазоне длин волн от 300 до 370 нм.

5.5    Фильтры из стеклянного волокна, толщиной 0.3 мм. с размером пор 1.5 мкм. диаметром 9.0 см (или его эквивалентом).

5.6    Воронки Бюхнера соответствующих диаметров, например 9 см и 25 см.

5.7    Бумага гофрированная фильтровальная.

5.8    Воронки делительные вместимостью 25 см3 и 100 см3.

5.9    Центрифуга с пробирками или колбами вместимостью 100 см3.

5.10    Патрон для тведдофаэном экстракции одноразовый, представляющий собой полипропиленовую трубку вместимостью 3 см3, содержащий 500 мг силикагеля С с размером частиц 40 мкм.

5.11    Устройство для вакуумной фильтрации многопозиционное, приспособленное для установки патронов для твердофазной экстракции. Может быть заменен шприцем (5-10) см3 с подходящим адаптером (типа Луер).

5.12    Пробирки вместимостью 10 см3 с крышками, политетрафторэтиленовым (PTFE) покрытием и резьбой.

5.13    Фильтр мембранный с размером лор 0.45 мкм.

5.14    Оборудование 8ЭЖХ. состоящее из следующего:

5.14.1    Хроматограф жидкостный высокоэффективный (реэервуардляэлюента.насосс регулируемым потоком от 0.5 до 5 см3/мин. инжектор проб, петли объемом 25 мкл флуоресцентного детектора), совместимый с записывающим устройством или интегратором.

5.14.2    Аналитическая колонка обратной фазы ВЭЖХ. например от Supelco":

-длина............................................................................................250 мм:

* внутренний диаметр.........................................................................4,6 мм:

• уплотнение — сферический материал С (5 мкм) или его эквивалент.

Примечание — Также могу использоваться более короткие колонки (например, колонка длиной от 120 до 150 мм).

5.15 Виалы вместимостью 5 см3, с крышками с политетрафторэтиленовым (PTFE) покрытием и резьбой или другая герметичная емкость.

G.1C Шприц с фиксированным объемом.

6 Проведение испытания

6.1    Общие положения

Испытание проводят в течение одного рабочего дня. Если несколько образцов подвергаются последовательному испытанию в одно и то же время, все они должны анализироваться в течение следующей ночи с помощью автосемплера.

6.2    Подготовка образца

Образец измельчают с помощью лабораторной мельницы или миксера до тех пор. пока он не будет проходить через сито (см. 5.1). и тщательно перемешивают.

6.3    Экстракция охратоксина А из образца

Взвешивают навеску (50 ± 0.1) г. подготовленную по 6.2. помещают в сосуд блендера (см. 5.2) и добавляют сначала 250 см3 хлороформа (см. 4.1). а затем 25 см3 фосфорной кислоты (см. 4.2).

Смешивают в течение 3 мин при средней скорости. В конце смешивания добавляют 10 г (45 см3) диатомовой земли (см. 4.3). Фильтруют экстракт через фильтр из стеклянного волокна (см. 5.5). покрытый диатомовой землей слоем 9 см. в воронке Бюхнера (см. 5.6) или через гофрированную бумагу (см. 5.7). Отбирают 50 см3 фильтрата.

"Supetoo является примером коммерчески доступного продукта. Эта информация дается для удобства пользователей настоящего стандарта и не является поддержкой этого продукта.

3

ГОСТ ISO 15141-2—2013

6.4    Разделение

Переносят 50 см3 фильтрата в делительную воронку вместимостью 100 см3 (см. 5.8). Добавляют 10 см3 раствора бикарбоната натрия (см. 4.4) и осторожно взбалтывают. Дают фазам разделиться. Если образуется эмульсия, центрифугируют в течение 2 мин при 2000 об/мин. Отбирают верхнюю водную фазу для твердофазной экстракции.

6.5    Подготовка патрона

Подсоединяют патрон С18(см. 5.11) к отверстиям вакуумного коллектора (см. 5.12) с коническими колбами или химическими стаканами на 25 см3 внутри вакуумного коллектора для сбора растворителей для обработки и промывки. Промывают каждый патрон дважды метанолом порциями по 2 см3 (см. 4.7). 2 см3 воды и 2 см3 раствора бикарбоната натрия (см. 4.4).

Примечание — В процехе работы не допускается высушивание колонки.

Для ускорения элюирования применяют слабое разрежение. Эта процедура также может осуществляться вручную путем применения давления от шприца (5-10) см3, прикрепленного наверху патрона. Оставляют приблизительно 2 ми растворителя сверху фритты.

6.6    Экстракция колонкой

Пипеткой отбирают 5 см3 бикарбонатный экстракт (см. 6.4) в колонку C1ft.

Примечание — В процессе работы не допускается высушивание колонки.

Промывают 2 см3 раствора фосфорной кислоты (см. 4.2). а затем 2 см3 воды. Удаляют промывные жидкости.

Элюируют охратоксин А 8см3 раствора для элюирования (см. 4.11). Элюат собирают в пробирку емкостью 10 см3 (см. 5.13). в ко*орой содержится 2 см3 воды.

Перемешивают элюат стеклянной палочкой для смешивания двух фаз. Пипеткой отбирают экстракт охратоксина А (верхнюю фазу) в другую пробирку емкостью 10 см3 с крышкой и резьбой (см. 5.13). Дважды промывают оставшуюся фазу из первой пробирки 1 см3 этилацетата (см. 4.5) и добавляют к фазе охратоксина А во второй пробирке. Выпаривают досуха под током азота.

Сухой остаток сразу же растворяют в 500 мкл (VT) подвижной фазы (см. 4.12) и фильтруют через микрофильтр с лорами 0,45 мкм (см. 5.14) в пробирку емкостью 5 см3 с крышкой и резьбой (исследуемый раствор образца).

Сохраняют оставшийся исследуемый раствор образца для подтверждения идентификации охратоксина А путем образования метилового эфира (см. 6.11).

6.7    Условия ВЭЖХ анализа

Если использовались коленка в соответствии с 5.10.2 и подвижная фаза в соответствии с 4.12, то рекомендуемыми являются нижеследующие параметры:

•    скорость потока подвижной фазы.....................................................1 см3/мин;

•    длина волны возбуждения флуоресценции......................................... 333 нм;

•    длина волны эмиссии..................................................................... 460 нм;

•    отрезающий фильтр.......................................................................420 нм;

- объем дозирования (V,)..........................................................от 20 до 25 мкл

(использование не менее 50 мкл для заполнения 25 мкл петли).

6.8    Градуировочная кривая

Градуировочную кривую строят при первоначальном определении и при изменении хроматографических условий.

Вводят не менее четырех 'радуировочных растворов различных концентраций (см. 4.19).

Строят график зависимости флуоресценции градуировочных растворов от массы охратоксина А. выраженной в нг/мкл.

Прослеживают, чтобы проводился тест на линейность (9).

6.9    Идентификация

Определяют охратоксин А путем сравнения времени удерживания образца с временем удерживания стандартного вещества.

Иногда может потребоваться определение пика охратоксина А введением исследуемого раствора и стандартного образца одновременно.

4

ГОСТ ISO 15141-2—2013

6.10    Определение

Незамедлительно проводят хроматографию образца. Для выполнения определения посредством метода внешнего стандарта определяют площадь пика или высоту пика, и сравнивают результаты с соответствующими значениями стандартного вещества с ближайшей площадью/высогой пика или используют градуировочную кривую. В случае градуировочной кривой для нее готовят дополнительные растворы с концентрациями е диапазоне линейной зависимости.

Вводят равные объемы исслздуемого раствора и стандартного раствора, используемые для по* строения градуировочной кривой.

Находят массу охратоксина А. в нанограммах, соответствующую флуоресценции исследуемого раствора на градуировочной кривей.

Если охратоксин А. содержащийся в образце, находится вне градуировочной кривой, изменяют количество введенного образца путем концентрирования или разбавления исследуемого раствора.

6.11    Подтверждение

При необходимости подтверждают идентификацию охратоксина А с помощью хроматографии производного метилового эфира (гримерно на 15 мин больше).

Количественно переносят оставшийся исследуемый раствор (см. 6.6) в делительную воронку емкостью 25 смэ (см. 5.6). споласкивают виалуЗ раза 1 см3 дихлорметана(см.4.10). Встряхивают и дают слоям разделиться. Отбирают нижний слой в виалу (см. 5.16) и выпаривают досуха.

Переносят 0.1 см3 стандартного раствора охратоксина А (см. 4.18) в другую пробирку (см. 5.16) и выпаривают досуха.

Добавляют 0.5 см3 раствора трифгорида бора в метаноле (см. 4.15) в каждую виалу. закрывают крышкой и нагревают в течение 15мин на водяной бане с температурой (50-60) °С. Выпаривают досуха на водяной бане под током азота.

Если присутствует вода, добавляют 1 см3 ацетонитрила (см. 4.9) и продолжают выпаривание досуха. Охлаждают и разбавляют подвижной фазой (см. 4.12) до такого же объема, который использовался для анализа методом ВЭЖХ исследуемого раствора (см. 6.7.3). и подвергают этот раствор хроматографическому разделению в условиях, как описано в 6.7.

Полноту дериватиэации проверяют по хроматограммам.

7 Обработка результатов испытаний

Массовую долю охратоксина A. wOTA, мкг/кг, вычисляют по формуле

*5-?г

“'огд-    . т .

(2)

где Rs

Ут

На

У,

отклик введенного исследуемого раствора, измеренного как площадь пика или высота пика; конечный объем раствора исследуемого образца (здесь 0.5 см3);

вычисленный средний нормализованный отклик (отклик для 1 нг охратоксина А) пяти разных градуировочных растворе (см. 4.19);

объем введенного анализируемого образца (здесь; 0,025 см3);

масса анализируемого образца е конечном экстракте, в данном случае:

50 г * 50 см3 * 5 см3 /250 см3 * 10 см3 = 5 г.

Результат округляют до двух десятичных знаков после запятой и записывают в протоколе испытания. Указывают, применялась ли поправка на выход (извлечение).

8 Прецизионность

8.1 Общие положения

Сведения по межлабораторным испытаниям прецизионности метода е соответствии с (1) обобщены в приложении А. Значения, полученные при межлабораторном испытании, могут быть не применимыми к диапазонам концентрации аналита и матрицам, отличным от тех, которые указаны в приложении А.

5

ГОСТ ISO 15141-2—2013

8.2 Повторяемость

Абсолютное расхождение между двумя отдельными результатами испытаний, полученными на идентичном образце, одним оператором, с помощью одного и того же оборудования, в течение макси* мального короткого промежутка времени, будет превышать предел повторяемости г не более чем в 5 % случаев, приведенных в таблице 1.

Таблица 1

Образец

Среднее значение, unto

Значение предела повторяемости г. ыи/tr

Ячмень

7.4

Ячмень

14.4

3.1

Кукуруза

8.2

Кукуруза

16.3

9.2

Ячмень

3.0

1.28

Ячмень

2.9

1.37

Пшеничные огруби

4.5

2.16

Пшеничные огруби

3.8

2.23

8.3 Воспроизводимость

Абсолютная разность мехду двумя отдельными результатами на идентичном образце, между двумя лабораториями будет превышать предел воспроизводимости R не более чем в 5 % случаев, приведенных в таблице 2.

Таблица 2

Образец

Среднее значение.

Значение предела аоспроиз-

ыкг/кг

аодимости й.мШкг

Ячмень

7.4

5.6

Ячмень

14.4

10.6

Кукуруза

8.2

4.8

Кукуруза

16.3

12.9

Ячмень

3.0

1.9

Ячмяын

?,я

1.74

Пшеничные огруби

4.5

3.35

Пшеничные огруби

3.8

2.58

9 Протокол испытаний

В протоколе испытаний должны содержаться следующие данные:

•    информация, необходимая для идентификации образца:

•    использованный метод испытания и ссылка на настоящий стандарт;

•    результаты и единицы измерений, в которых выражены результаты:

•    дата и тип отбора образьов (если известно):

•    дата получения лабораторной пробы;

•    дата проведения испытаний:

•    любые особенности, наблюдавшиеся в ходе испытаний:

•    любые операции, не указанные в методе или считающиеся вспомогательными, которые могли повлиять на результаты.

6

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Приложение А (справочное)

Данные по прецизионности

В соответствии с (1) в межлабсраторном испытании определены нижеследующие параметры. Испытание проводилось АОАС International в Купертино совместно с Международным союзом теоретической и прикладной химии (IUPAC) и Комитетом Северных стран по анализу пищевых продуктов (NMKL). В исследовании принимали участие 16 лабораторий из Европы. Канады и США. где в образцы ячменя и кукурузы добавлялись 10 мкг/кг и 20 мкг/кг охратоксина А (4). (5]. Результаты этого испытания даны 8 таблице А.1.

Таблица А.1 — Результаты испытаний

Образец

Ячмень

Ячмень

Куеуруза

Кукуруза

Год проведения межлабораторною испытания

1990

1990

1990

1990

Количество лабораторий

16

16

16

16

Количество образцов

1

2

1

2

Количество лабораторий, оставшихся после исключения выбросов (резко отклоняющихся значений)

15

14

15

15

Количество выбросов (лабораторий)

1

2

1

1

Количество принятых результатов

15

28

15

30

Среднее значение мкг/кг

7.4

14.4

8.2

16.3

Среднеквадратичесхое отклонение повторяемости s,. мкг/кг

1.1

3.3

Относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости RSD,. %

7.9

20.1

Предел повторяемости г. мкг/кг

3.1

9.2

Среднеквадрэтическое отклонение воспроизводимости Sr. мкг/кг

2.0

3.6

1.7

4.6

Относительное среднеквадрэтическое отклонение воспроизводимости RSDr. %

27.2

26.5

20.7

28.4

Предел воспроизводимости R. мкг/кг

5.6

10.6

4.8

12.9

Выход. %

74

72

82

82

7

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Во второ*.I межлабораторном испытании 12 лабораторий в Европе анализировали образцы пшеничных отрубей, к которым был добавлен охратохсж А, и образцы ячменя, загрязненные естественным способом. Концентрации охратоксина А находились в диапазоне от 3 до 9 мхг/хг [4], [5]. Результаты этого исследования даются в таблице А.2.

Таблица А.2 — Результаты испытаний

Обрами

Ячмень

Ячмень

Пшеничные

отруби

Пшеничные

отруби

Год проведения межлабораторного испытания

1993

1993

1993

1993

Количество лабораторий

16

16

16

16

Количество образцов

2

2

2

2

Количество лабораторий, оставшихся после устранения выбросов

12

12

12

12

Количество выбросов {лабораторий)

4

4

4

4

Количество допустимых результатов

24

24

24

24

Среднее значение ~ мкг/кг

3.0

2.9

4.5

3.8

Среднеквадратичесхое отклонение повторяемости s,. мкг/кг

0.46

0.49

0.77

0.80

Относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости RSD,. %

15.2

17.1

17.1

20.8

Предел повторяемости л мкг/ю

1.28

1.37

2.16

2,23

Среднеквадратическое отклонение воспроизводимости 5» мкг/кг

0.68

0.62

1,20

0.92

Относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости KSUff. %

22.6

21./

26.6

24.2

Предел воспроизводимости R, мкг/кг

1.90

1.74

3.35

2.58

Выход. %

68

70

8

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Приложение ДА (справочное)

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам

Таблица ДАЛ

Обозначение ссылочного международного стандарта

Стелек» сэ» ответе ты*

Обозначение и наименование межгосударственного стандарта

ISO 3696:1995

IDT

ГОСТ ISO 3696—2013 «Веда для лабораторного анализа. Технические требования и методы контроля»

Примечание — В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандарта:

- IDT — идентичный стандарт.

9

ГОСТ ISO 15141-2—2013

Библиография

[1]    ISO 5725:1066 Precision of test methods — Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests (Точность методов испытаний. Определение повторяемости и воспроизводимости для стандартного метода испытаний посредством межлаборагорных испытаний).

[2] АОАС INTERNATIONAL Official Methods of Analysis 16th Ed 1995. AOAC INTERNATIONAL. Gaithersburg. MD. USA. Method 991.44.

[3]    Nordic Committee on Food Analysis (1992) No 143. Ochratoxin A. Liquid chromatographic determination in barley and maize. (Комитет северных стран no анализу пищевых продуктов (1992 г). № 143. Охрагоксин А. Жидкостно-хроматографическое определение в ячмене и кукурузе).

[4]    Nesheim. S.. Stack. М.Е.. Trucksess. M.W., Eppley. R.M. and Krogh. P,: Rapid solvent-efficient method for liquid chromatographic determination of ochratoxin A in com. barley and kidney: Collaborative study. J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1992. 75.481-487.

[5]    Larsson. К and Mdlter. T. (1Э96) LC-determination of ochratoxin A in barley, wheat-bran and rye with the АОАС/ IUPAC/NMKL method: A NMKL collaborative study. J. Assoc. OH. Anal. Chem. InL. 79. 1996. 1102—1106.

[6]    Tauchmann. F.; Mintzlaff. H.-J.; Leistner. L.: SchutzmaBnahmen beim Arbeiten mit Mykotoxinen (Protective measures for working with myootoxins) Alimenta 1972. 11, 85.

[7]    Castegnaro. M.. Hunt. D.C. Sansone. E.B.. Schuller. P.L.. Striwardana, M.G.. Telling. G.M.. van Egmond. H.P.. and Walker. E A: Laboratory decontEmination and destruction of aflatoxins B1. B2 . G1 and G2 in laboratory wastes. In: IARC Scientific publication no 37, International Agency for Research on Cancer (WHO), Lyon. France: 1980. 59p.

[6] Castegnaro. M.. Barek. J.. Fremy. J.M.. Lafontame. M.. Miraglia. M.. Sansone. E.B.. and Telling. G.M.: Laboratory decontamination and destruction of carcinogens in laboratory wastes. In: IARC Scientific publication no 113. International Agency for Research on Cancer (WHO). Lyon. France: 1991.63p.

[9] van Trijp. J.M.P. and Roos. A H.: Model for the calculation of calibration curves. RIKILT Report 91.02. January 1991.

10

ГОСТ ISO 15141-2—2013

УДК 664.69:543.544.5:006.35    МКС 67.120    ЮТ

Ключевые слова: охратоксин А, зерно, высокоэффективная жидкостная хроматография.

11

Редактор Н. Н. Мигумова Технический редактор В. И. Прусакова Корректор О. в. Лазарева Компьютерная верстка А. С. Тыртышмого

Сдано а набор 29.08.2016. Подписано е печать 3>.0&.201б. Формат 60 * 84 Vj. Гарнитура Ариал. Усл.печ.л. 1.66. Уч.-изд. п. 1.6$ Тирах 39 экз Зак. 2048

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

Издано и отпечатано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ». 12396$ Москва. Гранатный пер., 4. ru