allgosts.ru65. СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО65.120. Корма для животных

ГОСТ 34209-2017 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Иммуноферментный метод определения плевромутилинов

Обозначение:
ГОСТ 34209-2017
Наименование:
Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Иммуноферментный метод определения плевромутилинов
Статус:
Действует
Дата введения:
01/01/2019
Дата отмены:
-
Заменен на:
-
Код ОКС:
65.120

Текст ГОСТ 34209-2017 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Иммуноферментный метод определения плевромутилинов


ГОСТ 34209-2017



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Иммуноферментный метод определения плевромутилинов

Feeds, mixed feeds, raw material. Immunoenzymatic methodfor determination of pleuromutilins



МКС 65.120

Датавведения 2019-01-01

Предисловие

Предисловие


Цели, основные принципы иосновной порядок проведения работ по межгосударственнойстандартизации установлены в ГОСТ1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основныеположения" и ГОСТ1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандартымежгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственнойстандартизации. Правила разработки, принятия, обновления иотмены"

Сведения остандарте

1РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением"Всероссийский государственный Центр качества и стандартизациилекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ")

2ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию иметрологии

3ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии исертификации (протокол от 14 июля 2017 г. N 101-П)

За принятиепроголосовали:

Краткоенаименование страны по МК (ИСО3166) 004-97

Код страныпо
МК (ИСО3166) 004-97

Сокращенноенаименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики РеспубликиАрмения

Беларусь

BY

Госстандарт РеспубликиБеларусь

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

4ПриказомФедерального агентства по техническому регулированию и метрологииот 5 октября 2017 г. N 1355-ст межгосударственный стандарт ГОСТ34209-2017 введен в действие в качестве национального стандартаРоссийской Федерации с 1 января 2019 г.

5ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация обизменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодноминформационном указателе "Национальные стандарты", а текстизменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе"Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отменынастоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликованов ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты".Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются такжев информационной системе общего пользования - на официальном сайтеФедерального агентства по техническому регулированию и метрологии всети Интернет (www.gost.ru)

1Область применения


Настоящий стандартраспространяется на корма, комбикорма, комбикормовое сырье иустанавливает иммуноферментный метод определения суммарногосодержания плевромутилинов (тиамулина и вальнемулина).

2Нормативные ссылки


Внастоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующиемежгосударственные стандарты:

ГОСТ12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарнаябезопасность. Общие требования

ГОСТ12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредныевещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда.Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видовзащиты
_______________
В Российской Федерации действует ГОСТ Р12.1.019-2009 "Система стандартов безопасности труда.Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видовзащиты".


ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственнаясистема обеспечения единства измерений. Весы неавтоматическогодействия. Часть 1. Метрологические и технические требования.Испытания

ГОСТ334-73 Бумага масштабно-координатная. Технические условия

ГОСТ1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторнаястеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие техническиеусловия

ГОСТ2652-78 Калия бихромат технический. Технические условия

ГОСТ4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Техническиеусловия

ГОСТ13496.0-2016 Комбикорма, комбикормовое сырье. Методы отборапроб

ГОСТ25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы,основные параметры и размеры

Примечание - Припользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действиессылочных стандартов в информационной системе общего пользования -на официальном сайте Федерального агентства по техническомурегулированию и метрологии в сети Интернет или ежегодномуинформационному указателю "Национальные стандарты", которыйопубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускамежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" затекущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то припользовании настоящим стандартом следует руководствоватьсязаменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отмененбез замены, то положение, в котором дана ссылка на него,применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3Термины, определения и сокращения

3.1 В настоящем стандартеприменены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1.1тест-система: Набор (комплект) специально подобранныхреагентов (реактивов) и составных частей, предназначенный дляопределения одного или нескольких конкретных веществ.

3.1.2 вспомогательныйраствор: Раствор, приготовляемый заблаговременно и необходимыйдля приготовления других типов растворов.

3.1.3 рабочийраствор: Раствор одного или нескольких реактивов,приготовляемый непосредственно перед использованием и необходимыйдля выполнения процедуры анализа.

3.2 В настоящем стандартеприменены следующие сокращения:

ПМ - плевромутилины;

ВАЛ - вальнемулин;

ТИАЛ - тиамулин;

АГ - антиген;

AT - антитела;

ИФА - иммуноферментныйанализ;

ОП - оптическаяплотность;

П- относительное поглощение.

ТМБ -3,3',5,5'-тетраметилбензидин;

ФК - ферментныйконъюгат.

4Сущность метода

4.1 Иммуноферментныйметод основан на измерении массовой концентрации ПМ в растворахэкстрактов проб с помощью непрямого твердофазного конкурентногоИФА.

4.2 Непрямой твердофазныйконкурентный ИФА основан на способности ПМ взаимодействовать соспецифичными АТ, полученными против ВАЛ, в условиях конкуренции сбелковым конъюгатом ВАЛ, нанесенным на поверхность лунок планшета -твердофазным АГ.

4.3 Связавшиеся с твердойфазой АТ выявляют путем измерения интенсивности окрашиванияконечного продукта реакции: вторичных антивидовых АТ, меченныхпероксидазой хрена, с субстрат-хромогенной смесью.

Аналитический сигнал(регистрируемое значение ОП), характеризующий степеньвзаимодействия АТ с АГ, обратно пропорционален массовойконцентрации ПМ в растворе.

5Предел обнаружения суммарного содержания плевромутилинов

5.1 Предел обнаружениясуммарного содержания плевромутилинов представлен в таблице 1.


Таблица 1 - Пределы обнаружения суммарного содержанияплевромутилинов

Определяемыйкомпонент

Пределобнаружения, мкг/кг

Суммарное содержание ВАЛ иТИАЛ

100

5.2 Специфичность АТ,применяемых для определения содержания плевромутилинов, выраженнаяв коэффициентах перекрестного реагирования, представлена в таблице2.


Таблица 2 - Специфичность АТ, применяемых для определениясуммарного содержания плевромутилинов

Определяемыйкомпонент

Коэффициентперекрестного реагирования, %

ВАЛ

100

ТИАЛ

30

6Требования безопасности и условия выполнения измерений

6.1 При выполненииизмерений необходимо соблюдать требования техники безопасности приработе с химическими реактивами по ГОСТ12.1.007.

6.2 Помещения, в которыхпроводится анализ и подготовка проб, должны быть оборудованыприточно-вытяжной вентиляцией, и соответствовать требованиямпожарной безопасности по ГОСТ12.1.004 и электробезопасности по ГОСТ12.1.019.

6.3 К выполнениюизмерений допускаются лица, владеющие техникой ИФА и изучившиеинструкцию по применению тест-системы и инструкции по эксплуатациииспользуемых приборов.

6.4 При выполненииизмерений соблюдают следующие условия:

-температура окружающего воздуха

от 15°С до30°С;

-относительная влажность воздуха

от 20% до80%.

7Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, посуда иреактивы

7.1 При выполненииизмерений применяют следующие средства измерений, вспомогательныеустройства, материалы и посуду:

-весы неавтоматического действия высокого класса точности поГОСТOIML R 76-1 с максимальной нагрузкой не более 150 г и пределомдопускаемой абсолютной погрешности ±0,01 г;

-компьютер с установленным программным обеспечением для управления иобработки результатов измерений;

-фотометр вертикального типа фотометрирования с диапазоном измеренийОП от 0 до 3 в комплекте с интерференционными светофильтрами длядлин волн 450 нм;

-мельницу лабораторную;

-калькулятор любого типа с логарифмической функцией;

-систему получения деионизированной воды высокой чистоты;

-термостат любого типа, поддерживающий температуру (37±1)°С;

-холодильник бытовой с цифровым контроллером температуры и рабочимдиапазоном температур от 2°С до 8°С;

-центрифугу лабораторную рефрижераторную со скоростью вращения неменее 4750 об/мин и диапазоном температур от 4°С до 25°С, садаптерами для пробирок вместимостью 15 см;

-шейкер вертикального вращения 360° в одной плоскости с адаптеромдля пробирок и диапазоном скорости от 20 до 100 об/мин;

-шейкер вортексного типа, с вставкой для одной пробирки и диапазономскорости от 150 до 2500 об/мин;

-шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий поддержание температуры(95±5)°С;

-бумагу масштабно-координатную по ГОСТ334, марки Н-1;

-бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ12026;

-колбы конические Кн-1-100(250)-24/29 ТС по ГОСТ25336;

-пипетки многоканальные переменной вместимости 0,03-0,3 см, с допустимой относительной погрешностьюдозирования по метанолу и ацетонитрилу не более ±1,0%;

-пипетки одноканальные переменной вместимости 0,005-0,05; 0,1-1,0;0,5-5,0 см с допустимой относительной погрешностьюдозирования по карбинолу и ацетонитрилу не более ±1%;

-пробирку стеклянную типа П 1-14-120 ХС по ГОСТ25336;

-пробирки полипропиленовые вместимостью 15 см с завинчивающимися крышками;

-пробирки микроцентрифужные вместимостью 1,5 см;

-цилиндр 1-100-1 по ГОСТ1770.

7.2 При выполненииизмерений применяют следующие реактивы:

-ацетонитрил для ВЭЖХ-МС с массовой долей основного вещества неменее 99,9%;

-воду дистиллированную по ГОСТ6709;

-воду деионизированную для ВЭЖХ, полученную с использованием системыпроизводства ультрачистой воды из дистиллированной воды по ГОСТ6709;

-калия бихромат по ГОСТ2652;

-кислоту серную по ГОСТ4204, концентрированную;

-тест-систему для непрямого твердофазного конкурентного ИФА вкомплектации (см. приложение А), предназначенную для определенияПМ.

7.3 Допускаетсяприменение других средств измерений и посуды, не уступающихвышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам иобеспечивающих необходимую точность измерения, а такжевспомогательных устройств, реактивов и материалов по качеству нехуже вышеуказанных.

8Подготовка к выполнению измерений

8.1 Подготовкалабораторной посуды и оборудования

8.1.1 При подготовке кпроведению измерений лабораторную стеклянную посуду моют смесьюводного раствора бихромата калия с концентрированной сернойкислотой, многократно промывают водопроводной водой, ополаскиваютдистиллированной водой и высушивают в сушильном шкафу.

8.1.2 Подготовку ипроверку фотометра проводят в соответствии с руководством поэксплуатации прибора.

8.2 Приготовлениерастворов

8.2.1 Приготовлениехромовой смеси

Вколбе вместимостью 250 см взвешивают 5,0 г бихромата калия,растворяют в 50 см деионизированной воды, затем добавляют 100см концентрированной серной кислоты.

Срок хранения раствора ввытяжном шкафу при комнатной температуре - не более 1 мес. Еслираствор приобретает зеленый оттенок, его готовят заново.

8.2.2 Приготовлениерабочего раствора реакционного буфера для промывки

Вколбу вместимостью 100 см вносят 95 см деионизированной воды, добавляют 5см реактива N 2 (см. приложение А),перемешивают.

Срок хранения растворапри температуре от 2°С до 8°С - не более 1 мес.

8.2.3 Приготовлениерабочего раствора ферментного конъюгата (ФК)